c-myc蛋白在颅咽管瘤中的表达及意义陈淳郭川邓发斌周宇(史洋成都市第六人民医院610051)【摘要】目的检测c-myc基因蛋白在颅咽管瘤中表达及特点，探讨它们与肿瘤复发性及侵袭性的关系。方法将44例颅咽管瘤分为复发和非复发两组，采用免疫组化(SP)法，检测c-myc基因蛋白。结果c-myc在复发性颅咽管瘤组中的表达阳性率明显高于非复发性颅咽管瘤组，两组间差异有统计学意义(P<0.05)；结论c-myc的表达值与颅咽管瘤的复发和侵袭性有关，可以预测肿瘤复发危险性。【关键词】颇咽管瘤c-myc【中图分类号】R730【文献标识码】A【文章编号】2095-1752(2012)32-0026-02木研究采取前瞻性队列研究，收集颅咽管瘤病例组成两个队列并观察预后，应用抗体检测颅咽管瘤组织c-myc蛋白的表达，明确复发组及非复发组的c-myc蛋白的表达是否有显著性差异及其与肿瘤预后的关系，加深对颅咽管瘤分子发病机制的认识，探讨它们与肿瘤复发性、侵袭性的关系。我们应用免疫组化技术，通过检测44例颅咽管瘤中c-myc蛋白的表达情况，探讨颅咽管瘤的复发与c-myc蛋白表达的相关性，期望通过c-myc蛋白的表达情况能预测颅咽管瘤预后。1对象和方法1.1研究对象1998年1月〜2002年12月在成都市第六人民医院及三六三医院神经外科接受手术的颅咽管瘤患者病理标木44例，男性23例，女性21例;均为石蜡标木。木组年龄4〜65岁，平均37.34岁。纳入标准：1、第一次接受手术，未经放、化疗者；---本文来源于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除---2、手术方案由全科室讨论，由有经验的神经外科医生进行手术操作，术中由以上两位医生共同判断肿瘤是否与下丘脑、Will&rsquo;S血管系统粘连或侵润，肿瘤组织是否达到全切；3、肿瘤最大径>2cm,术中认为达到全切、术后即复查MRI未见肿瘤残余；4、术后愿接受随访II病历资料完整者。排除标准：1、术前进行过放、化疗者；2、术后死因不明者或死于其他明确病因；3、病员未顺从复查者；4、术后失访者。44例病人均经显微手术全切，根据手术后1〜3年随访MRI明确是否复发，据此分两组：复发性颅咽管瘤组28例，男性13例，女性15例，年龄6〜62岁，平均38.12岁,非复发性颅咽管瘤组16例，男性10例，女性6例，年龄4〜65岁，平均36.19岁。对照组10例，取材于因脑外伤、脑出血手术内减压时所取周围脑组织标本。1.2方法1.2.1免疫组化(SP)法。(1)试剂来源a.I抗：c-myc(9E10)sc-40(鼠抗人IgG)北京中杉生物工程公司b.II抗：SP超敏试剂盒Kit9710福州迈新生物工程公司c.DAB：ZLI9032北京中杉生物工程公司(2)免疫组化方法a.切片常规脱蜡至水b.3%H2O2室温10分钟&rarr;0.01MPBS洗片c.抗原修复：0.01M枸椽酸缓冲液PH6.0,微波20分钟，中火---本文来源于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除---d.封闭：用未免疫的山羊血清封闭30分钟，室温e.滴加I抗：4°C过夜c-myc1:100f.PBS洗片5分钟&times;3g.滴加II抗：生物素化羊抗鼠（I抗为单抗）或生物素化羊抗兔（I抗为兔抗）37°C20分钟&rarr;PBS5分钟&times;3h.DAB显色：30秒钟一30分钟左右&rarr;水洗i.苏木素复染2分钟j.脱水透明封片结果：阳性：棕黄色一一黄色表达于核内，阴性细胞核为兰色1.2.2图像采集与分析Olympus-BX51图像采集系统，CCD快速拍照，图像采集由图像技术室老师施行和作出分析。1.2.3结果判定抗体染色后细胞核呈棕黄色为阳性，根据每一显微镜视野下（&times;400）抗体阳性染色数计算表达阳性率,30%以上记为表达阳性,30%以下为表达阴性（存在非特异性染色）。1.2.4统计学处理应用SPSS11.5统计软件分析数据，颅咽管瘤c-myc蛋白表达阳性率的比较采用&chi;2检验。2结果本组病例44例颅咽管瘤，术后随访1〜3年，平均随访23个月。复发28例，复发率为63.64%,复发时间为8个月〜32个月，平均16.7月，其中19例复发1次，6例复发2次，3例复发3次。2.1、c-myc在对照组及颅咽管瘤中免疫组织化学染色结果。2.2、c-myc在复发性颅咽管瘤组中的表达阳性率明显高于非复发性颅咽管瘤组，两组间差异有统计学意义（P<0.05）,见表1。表1c-myc在复发性与非复发性颅咽管瘤中的表达阳性率（％）---本文来源于网络，仅供参考，勿照抄，如...