【化学测定方法】高效液相色谱法测定尿中马尿酸的规范化研究刘婕，梅勇*，王倩，江金凤，周倩(武汉科技大学医学院，武汉［摘要］目的:进一步完善和规范化甲苯接触者尿中马尿酸的高效液相色谱测定法。方法:采用ODSC18柱，流动相为甲醇－0．01mol/L磷酸(40+60)，流量为1．0ml/min，检测波长228nm。结果:马尿酸在10μg/ml～500μg/ml范围内线性良好，相关系数r为0．9999，平均加标回收率为99%，平均相对标准偏差RSD为1．1%，最低检测浓度0．41mg/L。结论:该方法快速、准确、灵敏度高，有良好的重现性和稳定性，可用于职业接触甲苯人群尿中马尿酸的测定。［］O657．7+2［文献标识码］［］1004－8685(2011)12－2840－03AStandardizedexperimentalstudyonthedeterminationofhippuricacidinurinebyHPLCLIU激e，MEIYong*，WANGQian，激ANG激n－feng，ZHOUQian(MedicalCollege，WuhanUniversityofScienceandTechnology，Wuhan430065，China)［Abstract］Objective:ToexploreafurtherresearchontheanalyticalmethodforthedeterminationofhippuricacidinurinebyHPLC．Methods:C18columnwasusedtodeterminethehippuricacid．ThemobilephasewasusedwithMethanol－0．01mol/Lwerelinearintherangeof10μg/ml～500μg/ml，withacorrelationcoefficientmorethan0．9999．Theaveragerecoverywas99%andtheaverageRSDwas1．1%．Theminimumdetectableconcentrationwas0．41mg/L．Conclusion:Themethodiscon-venientandaccuratewithgoodreproducibilityandstability，andcanbeusedtodeterminehippuricacidinurineoftolueneexpo-sureworkers．［Keywords］HPLC;Urine;Hippuricacid目前甲苯作为世界范围内广泛使用的有机溶剂，主要应用于喷漆、染料、橡胶、印刷业等行业生产和化工原料的作业中［1］，其危害性引起人们很大的关注。对甲苯职业暴露的工人进行生物监测是预防职业损伤的必要手段。生物接触限值作为一类卫生标准有着独特的优势，它体现的是机体内暴露剂量，较作业环境职业接触限值更能客观、准确反映作业工人实际接触情况［2］。对甲苯暴露工人的尿中代谢物的研究显示，马尿酸是甲苯的主要代谢物［3］，作为甲苯的接触生物标志物受到广泛应用，美国和日本等许多国家以马尿酸作为甲苯环境暴露的评价指标。我国1996年就推荐了卫生标准WS/T53－1996，运用高效液相色谱法测定尿中马尿酸的方法［4］。有文献［5，6］报道按照该标准所提供条件难以达到分离要求，且繁琐费时，我们实验室也按照WS/T53－1996的方法进行了马尿酸的测定，分离效果不甚理想有严重拖尾现象。因此，本研究旨在开展职业接触甲苯尿中马尿酸测定方法的规范化研究，按照我国职业卫生标准制定指南［7］的要求进行方法学逐项研究，为我国制定尿中马尿酸的测定标准提供可靠、可行的参考依据。1材料与方法1．1仪器与试剂LC－3000高效液相色谱仪，配紫外检测器(山东滕州鲁创分析仪器有限公司)，KQ2200E型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)，H－6数显控温水浴锅(国华电器有限公司)，KF系列溶剂过滤器(天津市欧科商贸中心)，BS21S万分之一电子天(德国sartorious公司);TDL80－2B型高速离心机(上海安亭科学仪器厂)，WH－3型涡旋混合器(上海泸西分析仪器厂);磷酸(分析纯，金山化学试剂有限公司)，氯化钠(分析纯，上海化学试剂有限公司)，乙酸乙酯(天津恒兴化学试剂制造有限公司)，盐酸(信阳市化学试剂厂)，马尿酸(CAS:495－69－2，纯度≥99%，购自中国惠兴生化试剂有限公司)，1．21．2．1测定方法色谱条件色谱柱:venusil×BPC18(5μm，250mm×4．6mm);流动相:甲醇+0．01mol/L磷酸(40+60);紫外检测器:228nm，流速:1．0ml/min，进样量:10μl;柱温:室温。1．2．2工作曲线的绘制马尿酸标准储备液:准确称取马尿酸50．0mg，用超纯水定容至50ml。此溶液的浓度为［作者简介］刘婕(1988－)，女，硕士研究生，主要从事卫生检验学方面研究。*通讯联系人，E－mail:meiyong2006@163．com中国卫生检验杂志2011年12月第21卷第12期ChineseJournalofHealthLaboratoryTechnology，Dec2011;Vol21No12284110μg/ml，50μg/ml，100μg/ml，200μg/ml，500μg/...