HBVM与定量PCR法检测HBVDNA相关性探析

HBV-M与定量PCR法检测HBV-DNA相关性探析【摘要】目的:探讨乙肝病毒DNA(HBV-DNA)与其血清学标志物1IBV-M之间的相关性。方法:选取本院收治的乙肝患者183例作为研究对象,采集并分离患者的血清标本,分别釆用荧光定量PCR法和酶联免疫吸附法对患者的HBV-DNA>HBV-M进行检测,在不同的HBV-M模式下分析英与HBV-DNA间的关系。结果:在HBsAg(+)+HBeAg(+)+HBcAb(+)的模式下,HBV-DNA的检测阳性率为97.9%;HBsAg(+)+HBeAg(+)模式下,HBV-DNA的检测阳性率是100%;两者比较差异无统计学意义,但这两种模式下的检测阳性率都显著高于其他模式(P〈0・05)。结论:乙肝病毒的血清学标志物的模式不同,HBV-DNA的检测阳性率不同,乙肝患者机体内的病毒含量也有差异,HBV-M和HBV-DNA的检测分别是乙肝感染的间接证据和直接证据,同时对患者进行这两项指标的检测对于乙肝的临床诊断、病情判定、传染性的评估具有重要的意义。【关键词】HBV-M;1IBV-DNA;荧光定量PCR技术;相关性[Abstract]Objective:TodiscussthecorrelationbetweenhepatitisBvirusDNAandHBV-M.Method:Fivehundredandforty-ninehepatitisBpatientswereselectedinourhospiLa1.Patients'serumsampleswerecollected,itsHBV-DNAandHBV-MweredetectedbyusingquantitativePCRandenzyme-linkedimmunosorbentassay.ThecorrelativebetweenHBV-MandHBV-DNAwasanalyzed.ResuIt:TnHBsAg(+)+IIBeAg(+)+HBcAb(+)mode,thepositiverateofHBV-DNAwas97.9%.InHBsAg(+)+HBeAg(+)mode,thepositiverateofHBV-DNAwas100%・Thepositiverateswerenotseensignificantdifferencebetweenthetwomodes,buttheyweresignificantlyhigherthantheothermodes(P<0.05)・Conclusion:TherearesomecorrelationsbetweenserologicalmarkersofhepatitisBvirusandHBV-DNA.HBV-MandHBV-DNAtestingarecircumstantialevidenceanddirectevidenceofhepatitisBinfection,whilethesetwoindicatorsofpatientclinicaldiagnostictestingforhepatitisB,theconditiondetermination,infectiousassessmentareofgreatsignificance・[Keywords}HBV-M;HBV-DNA;FluorescencePCR;CorrelativeanalysisFirst-author?saddress:ThePeople'sHospitalofGuangfengCounty,Guangfeng334600,Chinadoi:10.3969/j.issn.1674-4985.2014.25.042乙肝是临床上常见的感染性疾病,由乙肝病毒引起,作为乙肝的高发地区,其对我国人民的健康造成了很大的威胁。乙肝病毒血清标志物HBV-M可以反映人体对乙肝病毒的免疫状态,其检测也是是判断患者病情、乙肝病毒传染性的依据Z—[1-3],但无法直接反映乙肝病毒在体内的复制情况,而荧光定量PCR则可以对HBV-DM进行定量的检测与分析[4]。本文主要探讨HBV-M与HBV-DNA之间的相关性,具体报告如下。1资料与方法1.1一般资料选取本院收治的乙肝患者作为研究对象。患者均经临床诊断确诊为乙肝,并排除甲型肝炎、丙型肝炎、丁型肝炎、戊型肝炎以及庚型肝炎的叠加感染患者[5-7]o共收治患者183例,其中男118例,女65例,患者年龄6〜77岁,平均(37.6±2・3)岁。1.2方法空腹采集患者的静脉血,并离心分离血清,分别采用荧光定量PCR法和酶联免疫吸附法对患者的HBV-DNA.HBV-M进行检测。选择酶联免疫吸附法检测,严格按照ELISA试剂盒上的操作说明检测患者的1IBV-M,并使用酶标仪记录结果。荧光定量PCR技术检测:将1()0UL的血清标本与等量DNA提取液混合,离心,将上清液去除后再加25UL处理液,水浴加热10min后再次离心,将得到的上清液2uL置于PCR管中,设置循环参数,使血清标本进行PCR反应。同时,使用相同的方法处理其他对照品[8]。反应完全Z后,以阳性梯度标准品的Ct值作标准曲线并计算IIBV-DNA含量[9-1叮。1.3统计学处理釆用SPSS13.0统计软件对数据进行分析,计量资料以(x±s)表示,采用t检验,计数资料采用字2检验,P2结3讨论本文分别使用酶联免疫吸附法和荧光定量PCR法对1IBV-M和1IBV-DNA进行检测,并对不同HBV-M模式下的HBV-DNA检测阳性率进行比较可见,在HBsAg(+)+HBeAg(+)+HBcAb(+)和HBsAg(+)+HBeAg(+)两种模式下,患者的HBV-DNA检测阳性率最高,提示血清HBsAg和HBeAg同时呈阳...

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