曲马多在中毒大鼠体内动态分布研究摘要：目的研究曲马多在染毒大鼠体内动态分布规律。方法将曲马多LD50（0.228g/kg）灌胃染毒的大鼠于不同时间点（5min、15min、0.5h、1h、2h、3h、5h、8h、14h、20h）处死，立即取心血及脏器（心、肝、脾、肾、脑、肺、胃）。检材酸化（pH1～2）、碱化（pH14），乙醚萃取两次，挥干定容，气质联用法定性，气相色谱法定量检测曲马多含量。结果大鼠经LD50给药后均出现抽搐、兴奋性增强、对疼痛反应减弱等症状，个别动物出现中毒死亡现象；不同时间点各组织脏器曲马多含量以脾、肝、肾、肺、胃最高，心血及脑较低。结论曲马多LD50灌胃大鼠体内曲马多分布不均匀，脏器中含量高于心血含量。曲马多中毒法医学鉴定中应采集心血、肝、肺、肾、胃和胃内容进行全面毒物分析。关键词：曲马多；中毒；动态分布；毒物动力学：R971文献标识码：A：1672-1349（2011）08-0986-02曲马多（Tramadol，TR）又名曲马朵，为非麻醉性中枢镇痛药，具有镇痛作用谱广，持续时间长等特点，可用于缓解癌症、骨折、手术等导致的中度至重度疼痛，在临床上广泛应用。有报道显示曲马多具有轻度耐药性和依赖性，由于曲马多开发之初人们对其成瘾性认识不够全面深入，未将其列为特殊药品进行管理，药物滥用现象时有发生，大剂量服用本药导致成瘾、中毒死亡的案例国内外均有报道［1］。到目前为止，曲马多的研究多集中于临床药理学和药物代谢动力学方面［2-4］，法医毒物动力学的研究报道较少。在前期研究的基础上，?克明等对曲马多中毒者血药浓度［5］，死后分布特点［6］、死后再分布特点［7］进行了研究报道，本实验着重研究曲马多在中毒大鼠体内动态分布，旨在揭示曲马多在中毒大鼠体内的动态分布规律，为曲马多中毒（死）案件和法医学鉴定提供实验依据。1材料与方法1.1试剂与药品盐酸曲马多片剂：每片50mg（郑州凯利药业有限公司生产）；曲马多标准品（购自公安部物证鉴定中心）；内标：SKF525A（中国标准技术开发公司），其余试剂均为分析纯。1.2实验动物Wistar大鼠，雄性，体重200g±10g，由河北医科大学实验动物中心提供。实验前禁食24h。1.3主要仪器及条件GC-2010气相色谱仪（日本岛津）；TRACEDSQ气相色谱-质谱联用仪（ThermoFinnigan）；气相色谱条件：DB-5毛细管柱（30m×0.25mm×0.25μm），FTD检测器，进样口温度280℃；空气60mL/min，氢气2.3mL/min，载气为高纯氮气15mL/min，铷珠电流2A，柱温150℃，检测器温度300℃。柱温为程序升温：150℃（1min）→10℃/min→300℃（1min）。不分流进样，进样量1μL。气相色谱/质谱条件：DB-5毛细管柱（30m×0.25mm×0.25μm），EI源70eV，质量范围：50～650；柱温：140℃（1min）→30℃/min→250℃（10min）；离子源、传输线和进样口温度均为250℃；分流进样，分流比为50∶1；载气：高纯氦气（He）1.0mL/min，恒流模式。1.4动物模型制备雄性Wistar大鼠66只，随机分为11组，每组6只，按文献［6］报道方法，以LD50（228mg/kg）灌胃，观察动物反应，分别于5min、15min、0.5h、1h、2h、3h、5h、8h、14h、20h、26h处死，立即解剖取心血、心、肝、脾、肺、肾、脑和胃，待检。1.5提取和检测固性检材1g或血1mL，加蒸馏水2mL，SKF525A20μg，振荡，固性检材超声细胞粉碎（JYD-650L智能型）匀浆3min；10%HCl调酸至pH1～2，10%NaOH调碱至pH14，振荡5min，加乙醚5mL，振荡15min，1800r/min离心15min，取上层有机相；乙醚5mL重复提取一次，合并有机相，40℃水浴挥干。残渣用20μL无水乙醇定容，取1μL进样，保留时间结合特征离子峰定性，内标法和标准曲线法定量。1.6统计学处理采用SPSS11.5统计学软件处理，数据以均数±标准差（x±s）表示。2结果2.1中毒症状LD50给药后，大鼠在半小时左右出现不同程度抽搐、兴奋性增强、对疼痛反应减弱等症状，个别动物出现中毒死亡现象。2.2气相色谱图、质谱图（见图1～图2）2.3工作曲线和提取回收率建立的心血和肝组织中曲马多检测的标准曲线回归方程Y15.64X＋0.252和Y17.1X-3.214（式中Y为心血或肝组织中曲马多浓度，X为曲马多峰面积与内标峰面积的比值）；相关系数分别为0.999和0.996；线性范围均为0.5μg/m...