外科学专业优秀论文RNAi下调胰腺癌细胞hENT<,1>的表达对氟尿嘧啶细胞毒性的影响关键词：胰腺癌RNA干扰核苷转运载体5-氟尿嘧啶细胞毒性摘要：目的：研究用RNAi技术下调胰腺癌Panc-1细胞平衡型核苷载体1(humanequilibrativenucleosidetransporter1，hENT<,1>)对氟尿嘧啶(5-Fluorouraci，5-FU)细胞毒性的影响。方法：设计并合成两个能表达特异性针对hENT<,1>的shRNA(smallhairpinRNA)的DNA序列，分别与载体质粒pSilence4-1-CMVneo连接重组，构建针对hENT<,1>的shRNA表达质粒pSilence-hENT<,1>Sa和pSilence-hENT<,1>Sb。用脂质体法将pSilence-hENT<,1>Sa和pSilence-hENT<,1>Sb转染胰腺癌Panc-1细胞，并以含G418(600ug/ml)的培养液筛选阳性转染细胞(pSilence-hENT<,1>SaPanc-1及pSilence-hENT<,1>SbPanc-1)。RT-PCR检测pSilence-hENT<,1>SaPanc-1及pSilence-hENT<,1>SbPanc-1细胞中hENT<,1>-mRNA的下调效果及稳定性，选择干扰效果较好的pSilence-hENT<,1>SbPanc-1细胞进一步实验；用MTT法检测细胞在含序列浓度5-FU(0～2×10ng·L<'-1>)的培养液中48h后的生存率，并计算IC<,50>。结果：测序显示重组质粒中插入片段序列正确。RT-PCR结果显示pSilence-hENT<,1>SbPanc-1细胞hENT<,1>的mRNA表达水平下调，并在两个月内保持相对稳定。MTT结果显示pSilence-hENT<,1>SbPanc-1细胞组氟尿嘧啶的IC<,50>显著下降，为Panc-1细胞组IC<,50>的51.52％(P<0.01)。结论：用RNAi方法下调hENT<,1>mRNA表达可增强5-FU对胰腺癌细胞的毒性，hENT<,1>将可能成为提高化疗效果的新的药物作用靶点。---本文来源于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除---正文内容目的：研究用RNAi技术下调胰腺癌Panc-1细胞平衡型核苷载体1(humanequilibrativenucleosidetransporter1，hENT<,1>)对氟尿嘧啶(5-Fluorouraci，5-FU)细胞毒性的影响。方法：设计并合成两个能表达特异性针对hENT<,1>的shRNA(smallhairpinRNA)的DNA序列，分别与载体质粒pSilence4-1-CMVneo连接重组，构建针对hENT<,1>的shRNA表达质粒pSilence-hENT<,1>Sa和pSilence-hENT<,1>Sb。用脂质体法将pSilence-hENT<,1>Sa和pSilence-hENT<,1>Sb转染胰腺癌Panc-1细胞，并以含G418(600ug/ml)的培养液筛选阳性转染细胞(pSilence-hENT<,1>SaPanc-1及pSilence-hENT<,1>SbPanc-1)。RT-PCR检测pSilence-hENT<,1>SaPanc-1及pSilence-hENT<,1>SbPanc-1细胞中hENT<,1>-mRNA的下调效果及稳定性，选择干扰效果较好的pSilence-hENT<,1>SbPanc-1细胞进一步实验；用MTT法检测细胞在含序列浓度5-FU(0～2×10ng·L<'-1>)的培养液中48h后的生存率，并计算IC<,50>。结果：测序显示重组质粒中插入片段序列正确。RT-PCR结果显示pSilence-hENT<,1>SbPanc-1细胞hENT<,1>的mRNA表达水平下调，并在两个月内保持相对稳定。MTT结果显示pSilence-hENT<,1>SbPanc-1细胞组氟尿嘧啶的IC<,50>显著下降，为Panc-1细胞组IC<,50>的51.52％(P<0.01)。结论：用RNAi方法下调hENT<,1>mRNA表达可增强5-FU对胰腺癌细胞的毒性，hENT<,1>将可能成为提高化疗效果的新的药物作用靶点。目的：研究用RNAi技术下调胰腺癌Panc-1细胞平衡型核苷载体1(humanequilibrativenucleosidetransporter1，hENT<,1>)对氟尿嘧啶(5-Fluorouraci，5-FU)细胞毒性的影响。方法：设计并合成两个能表达特异性针对hENT<,1>的shRNA(smallhairpinRNA)的DNA序列，分别与载体质粒pSilence4-1-CMVneo连接重组，构建针对hENT<,1>的shRNA表达质粒pSilence-hENT<,1>Sa和pSilence-hENT<,1>Sb。用脂质体法将pSilence-hENT<,1>Sa和pSilence-hENT<,1>Sb转染胰腺癌Panc-1细胞，并以含G418(600ug/ml)的培养液筛选阳性转染细胞(pSilence-hENT<,1>SaPanc-1及pSilence-hENT<,1>SbPanc-1)。RT-PCR检测pSilence-hENT<,1>SaPanc-1及pSilence-hENT<,1>SbPanc-1细胞中hENT<,1>-mRNA的下调效果及稳定性，选择干扰效果较好的pSilence-hENT<,1>SbPanc-1细胞进一步实验；用MTT法检测细胞在含序列浓度5-FU(0～2×10ng·L<'-1>)的培养液中48h后的生存率，并计算IC<,50>。结果：测序显示重组质粒中插入片段序列正确。RT-PCR结...
