3种含重金属制剂的微生物限度检查方法的验证摘要：目的建立定痫丸、皮脂搽剂和加味黄苓油膏3种含重金属制剂的微生物限度检查方法。方法按2010年版《中华人民共和国药典》（一部）的规定测定3种制剂对细菌、真菌和酵母菌的回收率，并对其控制菌检查方法进行验证。结果定痫丸采用培养基稀释法、皮脂搽剂采用预滤过和培养基稀释法联用、加味黄苓油膏采用萃取法处理样品，5株菌回收率均可达70%以上，控制菌检查也分别采用相应的方法。结论本研究建立了定痫丸、皮脂搽剂和加味黄苓油膏3种不同剂型含重金属制剂的微生物限度检查方法。关键词：培养基稀释法；萃取法；重金属；微生物限度DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2016.07.026中图分类号：R284.1文献标识码：A文章编号:1005-5304(2016)07-0101-03VerificationofMicrobialLimitTestMethodsforThreeKindsofPreparationswithHeavyMetalsGUANMin,ZHOUQin-mei(PharmacyDepartmentofAffiliatedHospitalofNanjingUniversityofChineseMedicine,Nanjing210029,China)Abstract：ObjectiveToestablishthemethodsofmicrobiallimittestforthreekindsofpreparationswithheavymetals,suchasDingxianPills，PizhiLotionandJiaweiHuangqinOintment.MethodsAccordingtoChinesePharmacopoeia2010,therecoveryratesofbacteria，fungusandyeasttreatedbythreepreparationsweredetected・Andthemethodsoftestingcontrolbacteriawerealsovalidated.ResultsCulturemediumdilutionmethodwasprovedtobeapplicableforDingxianPills・Culturemediumdilutionmethodcombinedwithpre-filtrationmethodwasproperforPizhiLotion.AndtheextractionmethodwasadoptedforJiaweiHuangqinOintment.Therecoveryratesofthesefivevalidationstrainsreached70%byappropriatemethods・Andthesamemethodswereusedforvalidationofthecontrolbacteria・ConclusionThemethodsofmicrobiallimittestforthesethreedifferentpreparationswereestablishedthroughthisstudy・Keywords：culturemediumdilutionmethod；extractionmethod；heavymetals；microbiallimittest定痫丸、皮脂搽剂和加味黄苓油膏均为本院制剂，临床使用多年。定痫丸为口服丸剂，用于痰迷惊厥、牙关紧闭、抽搐痉挛等癫痫病症。皮脂搽剂和加味黄苓油膏分别为外用酊剂和油膏剂，具有解毒、止痒等功效。该3种制剂为不同剂型，且都含有重金属成分，已知重金属碑、汞等对微生物的生长有抑制作用[1-2],本研究按照2010年版《中华人民共和国药典》（一部）⑶的要求，采用合适的样品处理方法，如培养基稀释法、预滤过法、萃取法或几种方法联用，消除3种制剂的抑菌作用后再进行检验，以期获得更可靠、更准确的微生物限度检查方法。1仪器与试药YX-280D-TT手提式压力蒸汽灭菌器（合肥华泰基金项目：江苏省中医院科研项目（Y13043）通讯作者：周琴妹，E-mail：zhoumeizi0917@163.com医疗设备有限公司），DNP-9082电热恒温培养箱（上海申贤仪器设备厂），MJ-100B霉菌培养箱（上海浦东荣丰科学仪器有限公司），100级洁净工作台（AIRTECH,苏州安泰空气技术有限公司），DKZ系列电热恒温振荡水槽（上海一恒科技有限公司）,灭菌移液管（1、5、10mL）及无菌培养皿（90mm）。供试品定痫丸（由朱砂、青果、贝母等组成，批号1501001、1503002>1505003）>皮脂搽剂（由硫磺、白矶、轻粉组成，批号1505005>1505006、1507007）和加味黄苓油膏（由轻粉、石膏、冰片、枯矶、黄苓等组成，批号1412005>1503001>1507003）均由本院制剂部生产。金黄色葡萄球菌［CMCC（B）26003］、大肠埃希菌[CMCC(B)44102]、枯草芽抱杆菌[CMCC(B)63501]>白色念珠菌[CMCC(F)98001]>铜绿假单胞菌[CMCC(B)10104]>黑曲霉[CMCC(F)98003],均由江苏省药检所提供，传代次数均为第4代。营养琼脂培养基（批号131224）、营养肉汤培养基（批号070313）>改良马丁培养基（批号1110203）、玫瑰红钠琼脂培养基（批号1401132）.胆盐乳糖培养基（批号1401072改良马丁琼脂培养基（批号050407）>牛甲基伞形酮葡糖昔酸培养基（MUG，批号201020）、漠化十六烷基三甲鞍琼脂培养基（批号100128）、...