人参皂甙Rg1对脑缺血再灌注大鼠pJNK表达的影响【摘要】目的探讨人参皂甙Rg1对脑缺血再灌注大鼠脑组织c-junN-末端激酶（pJNK）表达的影响及其意义。方法将大鼠随机分为假手术组、单纯缺血再灌注组、人参皂甙Rg110、20、40mg/kg组、尼莫地平1mg/kg组，采用大脑中动脉闭塞法建立脑缺血再灌注模型,应用免疫组织化学方法检测脑组织缺血再灌注4h后pJNK的表达。结果人参皂甙Rg1各剂量组大鼠脑组织pJNK表达阳性率分别为(23.89±6.77),(15.19±4.59),(9.15±4.77)，均低于单纯缺血再灌注组(27.15±8.46)。结论人参皂甙Rg1防治大鼠脑缺血再灌注损伤的机制可能与抑制脑组织pJNK表达有关，且以高剂量效果较好。【关键词】人参皂甙Rg1脑缺血再灌注pJNK大鼠Abstract:ObjectiveTodiscusstheeffectsofGinsenosideRg1ontheexpressionsofJNKintheratsbraintissueafterfocalcerebralischemia-reperfusionanditssignificance.MethodsRatsweredividedintothesham-operativegroup,Modelgroup,GinsenosideRg1groupsof10mg/kg,20mg/kg,40mg/kg,andNimodipinegroupof1mg/kgatrandom.Themethodofmiddlecerebralarteryocclusion(MCAO)inratswasadoptedtoestablishthemodelofcerebralischemia-reperfusion,andthentheexpressionsofJNKaftercerebralischemia-reperfusion6hwastestedbasedonthechemicalmethodinimmunitytissue.ResultsThepositiverateofexpressionofratsbraintissueineachoftheGinsenosideRg1groupsis(23.89±6.77),(15.19±4.59),(9.15±4.77)respectively.ConclusionsTheresultsshowedthatthemechanismofGinsenosideRg1toprotectthebraincellsfromdamageaftercerebralischemia-reperfusioninjurymaybeassociatedwithJNKexpressiontoinhibitbraintissue,anditwasmoreeffectivewhenGinsenosideRg1wasinhigh-dose．Keywords:GinsenosideRg1;cerebralischemia-reperfusion;JNK；rat研究表明，人参皂甙Rg1能通过抑制细胞凋亡对脑缺血再灌注损伤发挥保护作用，但其抗凋亡的机制还不十分清楚［1］。丝裂原蛋白激酶信号通路(mitogenactivatedproteinkinases，MAPKs)是脑缺血再灌注损伤中主要的信号通路，它包括5个亚家族，其中c-Jun氨基末端激酶(c-JunN-terminalkinases，JNKs)亚家族主要参与细胞凋亡的调控。本实验拟采用免疫组织化学方法检测脑缺血再灌注后大鼠海马CA1区神经元pJNK的表达，并观察人参皂甙Rg1对pJNK蛋白表达的影响，以明确人参皂甙Rg1是否通过JNK信号通路来抑制脑缺血再灌注后的神经元凋亡。1材料与方法---本文于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除---1.1实验动物分组与给药方法Sprage-Dawl大鼠，雄性（以排除雌激素影响），体重为250～300g，随机分为6组：①假手术组；②单纯缺血再灌注组；③～⑤人参皂甙Rg1给药组（10、20、40mg/kg）；尼莫地平药物对照组（1mg/kg）；每组5只大鼠。③～⑥组分别于术前5d至取材当日腹腔注射人参皂甙Rg1、尼莫地平，其余各组分别注射等量等渗生理盐水，1次/d。1.2药品及试剂人参皂甙Rg1(纯度》95%)购自吉林大学有机化学教研室；尼莫地平注射液(批号为071001)，购自山西亚宝药业；其它药品均为国产分析纯，由辽宁医学院科学实验中心提供。1.3大鼠右侧局灶性脑缺血(MCAO)模型的制备10%水合氯醛(350mg/kg)腹腔麻醉，采用改良线栓法［2］制备大鼠局灶性脑缺血模型。线栓采用头端光滑烫圆的直径0.23mm鱼线，长度由右侧颈外动脉分叉部计约（18.5±0.5）mm。栓塞2h后，将鱼线轻轻拔出并缝合皮下筋膜及皮肤，即为再灌注模型，再灌注时间为4h。1.4免疫组织化学染色及图像分析MCAO术后6h，将各组大鼠麻醉，4%多聚甲醛灌流固定，断头取脑，梯度酒精脱水，定向石蜡包埋切片，厚5μm。切片常规脱蜡至水，免疫组化Envision法染色：3%过氧化氢溶液处理15min以去除内源性过氧化物酶；然后采用pH6.0枸椽酸缓冲液高压修复抗原，自然冷却至室温后；滴加1∶200稀释的pJNK单克隆抗体4℃孵育过夜；然后滴加辣根酶标记羊抗兔多聚体（PV6001）37℃孵育30min。每步骤之间用0.01MPBS洗3次，每次5min。DAB显色，苏木素复染，脱水，透明，中...