猕猴桃溃疡病枝条挥发物的GC-MS分析周良强汪洋张景荣陈莉唐立忠李臻卓明黄昭贤摘要为了研究猕猴桃感染溃疡病后枝条挥发物的组分特征，给探索猕猴桃溃疡病的病理和抗性机制提供参考，应用气相色谱-质谱联用（GC-MS）技术鉴定健康枝条和感病枝条挥发物的化学成分，采用离子流峰面积归一化法计算各成分的相对含量。结果：从猕猴桃健康和感病枝条的挥发物中分别鉴定出73和67个挥发性化合物，合计81种成分，二者相同组分59个，包括烷烃类、烯烃类、醇类、酚类、醛类、酮类、苯环类化合物、杂环类化合物、呋喃类和含氮化合物，其中烷烃类化合物和苯环类化合物为猕猴桃枝条的主要成分。进一步比较发现，感病枝条中含有2-乙基甲苯、2，3，5，6-四甲基苯酚等8种特有物质，且4-乙基甲苯、十八烷等物质比健康枝条含量明显降低。关键词猕猴桃溃疡病;枝条;挥发物;GC-MS分析：S436.634文献标志码：ADOI：10.19415/j.cnki.1673-890x.2021.10.001猕猴桃（ActinidiaLindl.）富含多种氨基酸、矿物质和维生素C，具有较高的营养价值与保健功效，现已成为许多地区的经济支柱产业[1-3]。猕猴桃果肉颜色多样，其中，红心猕猴桃口感佳、色彩美，颇受消费者青睐。自1997年世界上首个红心猕猴桃品种——中华猕猴桃‘红阳育成以来，红肉品种的选育成为了研究热点。尔后，以‘红阳猕猴桃为材料选育出一系列红肉新品种，如‘红华‘晚红‘东红‘红什1号[4-7]，已作为我国猕猴桃育种中最主要的骨干亲本[8]。红心类型的猕猴桃品种，虽然其食用品质优异，但大多对溃疡病敏感[9]，目前，主流学者认为该病由丁香假单胞杆菌猕猴桃致病变种（Pseudomonassyringaepv.Actinidiae，Psa）引起。猕猴桃溃疡病具有传播快、致病力强、难治愈等特点，是一种毁灭性的病害，可导致短期内大面积植株死亡，给生产造成重大经济损失[10]。四川是全国猕猴桃主要产区之一，近年全省猕猴桃种植面积逐年增加，产量位居全国前列，其中，红心猕猴桃产量占全国红心猕猴桃的90%以上[11]。猕猴桃溃疡病在四川省各大栽培区均有发现，近年来呈现逐步蔓延、病情不断加重的趋势。以往对猕猴桃溃疡病的研究多侧重于防治策略，包括农业防治、化学防治和生物防治方法[12-13]。最近，李亚巍等对该病菌在田间感病猕猴桃植株上的分布情况及侵染后的传播规律进行了报道[14];李靖等鉴定了四川主栽猕猴桃品种对溃疡病的抵抗能力[15]。猕猴桃溃疡病会导致植株产生抗感生理反应，引起体内代谢产物的变化。迄今对猕猴桃组织中挥發性病理产物的研究尚未见报道。本研究运用气相色谱-质谱联用仪（GC/MSSystem）分别分析了‘红阳猕猴桃健康植株枝条与感溃疡病枝条的韧皮部、木质部及髓心组织中挥发性次生代谢产物的种类和含量差异，旨在为探索猕猴桃溃疡病的病理和抗性机制提供参考。1材料与方法1.1试验材料2020年3—5月，值猕猴桃溃疡病高发期，分别于雅安市的名山区、雨城区、芦山县采集‘红阳猕猴桃感病枝条;在成都双流一个9年未发生溃疡病的猕猴桃园区采集健康枝条。采后，先用超纯水洗去枝条表面的灰尘和杂质，待晾干后在健康和染病枝条部位分离出韧皮部、木质部、髓部三类组织，染病枝条在节间处病斑取样，对照选取与感病枝条同等枝龄和粗度的健康枝条。1.2试验方法1.2.1样品处理每个样品取0.2g放入装有吸附剂PorapakQ80/100的提取管中，密闭吸附48h后，去除样品，加入适量正己烷浸泡30min。取上清液再经微孔过滤膜过滤后置于进样瓶中待测。1.2.2挥发物检测采用安捷伦7890B-7000D气相色谱-三重四级杆质谱联用仪，色谱柱为HP-5MS（30m×250μm×0.25μm），进样量为1μL，升温程序为40℃保持3min，之后以每分钟上升6℃到280℃，保持3min，最后以每分钟上升6℃到310℃，保持10min。载气为高纯氦气。离子源温度为280℃，质谱扫描范围m/z为50～500。1.2.3挥发物定性与半定量根据GC/MS总离子图，对各色谱峰对应的质谱图进行解析，通过检索比对标准质谱图谱数据库（NIST14），并结合匹配分数、各成分的保留时间、质谱裂片图及文献查对，鉴定其化学成分。采用离子流峰面积归一化法计算各挥发物组分的相对含量。2结果与分析2.1健康和溃疡病猕猴桃枝条挥发物总离子流图通...