第30讲微生物的利用A组基础过关1.根据分离以尿素为氮源的微生物实验,回答下列问题:(1)写出脲酶降解尿素的反应式:。(2)该实验分离细菌时用浓度为10-4和10-5土壤稀释液接种,更容易形成单菌落的是。(3)A同学筛选出的菌落为150个,其他同学只筛选出50个,并且他在设计实验时并没有设置对照。你认为A同学结果产生的原因可能有哪些?。如何设计对照实验排除可能影响实验结果的因素:。(4)涂布平板的所有操作怎样保证无菌?。(5)有脲酶的细菌在生态稳态上起什么作用?。答案(1)CO(NH2)2+H2O2NH3+CO2(2)10-5土壤稀释液(3)可能是土样不同,也可能是培养基污染或操作失误方案有二:一是由其他同学用与A同学一样的土壤进行实验,如果结果与A同学一致,则证明无误,如果结果不同,则证明A同学存在操作失误或培养基配制有问题;另一种方案是将A同学配制的培养基在不加土样的情况下进行培养,作为空白对照,以证明培养基是否受到污染(4)应从操作的各个细节保证“无菌”,都应在火焰附近进行。例如,酒精灯与培养皿的距离要合适、移液管头不要接触任何其他物质、移液管要在酒精灯火焰周围等(5)如果土壤中有许多尿素,在自然界较高温度下会被水解,水解后的氨使土壤碱化,氨还与其他阴离子物质如S、C、N等形成化合物,则会使土壤板结。有脲酶的细菌使植物废弃物和动物尸体降解,并利用了所形成的氨,有利于自然界中氮的循环解析脲即尿素,是蛋白质降解的产物。有一些细菌含有脲酶可以分解尿素,利用尿素作为其生长的氮源。本实验使用涂布分离法分离以尿素为氮源的微生物,用浓度为10-4和10-5土壤稀释液接种,更容易形成单菌落的是10-5土壤稀释液。A同学结果产生的原因可能是土样不同,也可能是培养基污染或操作失误,排除方案有二:一是由其他同学用与A同学一样的土壤进行实验,结果与A同学一致,则证明无误,如果结果不同,则证明A同学存在操作失误或培养基配制有问题;另一种方案是将A同学配制的培养基在不加土样的情况下进行培养,作为空白对照,以证明培养基是否受到污染。2.关于分离以尿素为氮源的微生物实验,请分析回答以下问题:(1)脲酶可以催化尿素分解为,其中碱性物质可以能使酚红指示剂变为。(2)分离以尿素为氮源的微生物,培养基配制必须加凝固剂,培养基在g/cm2压力下灭菌30分钟,冷却至60℃,加入通过的尿素溶液,混合均匀待用。(3)为了从土壤中分离得到以尿素为氮源的微生物,分离效果比较好的操作方法是釆用,釆用该方法分离,土壤溶液必须经过处理。答案(1)NH3和CO2(顺序可对换,错答或漏答不得分)红色(2)琼脂糖500、G6玻璃(砂)漏斗过滤(3)涂布分离法稀释解析(1)脲酶可以催化尿素分解为NH3和CO2,其中碱性物质能使酚红指示剂变为红色。(2)分离以尿素为氮源的微生物,培养基配制必须加凝固剂琼脂糖。培养基在500g/cm2压力下灭菌30分钟,冷却至600℃,加入通过G6玻璃(砂)漏斗过滤的尿素溶液,混合均匀待用。(3)涂布分离法是从土壤中分离得到以尿素为氮源的微生物的最简便的方法,采用该方法分离,土壤溶液必须经过稀释处理。3.回答与微生物的培养和利用有关的问题:(1)微生物在试管中培养时通常加棉塞,周围没有皱褶和缝隙,容易拔出,但用手提着棉塞时,试管又不能落下。棉塞的作用有两个:一是;二是保证通气良好。制作棉塞所用的棉花不能用脱脂棉,原因是。(2)测定微生物生长曲线的方法有很多,有血细胞计数板法、平板计数法、法等。制作生长曲线时,以作纵坐标,作横坐标。(3)牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基,一般要将pH调至,以利于细菌的生长繁殖。答案(1)防止杂菌污染脱脂棉易吸水,吸水后容易引起污染(2)菌落比浊菌数的对数生长时间(3)中性偏碱解析(1)微生物培养过程中棉塞既可以防止杂菌的污染,又可以保证通气良好。因为脱脂棉易吸水,吸水后容易引起污染,所以制作棉塞所用的棉花不能用脱脂棉。(2)测定微生物生长曲线的方法有很多,有血细胞计数板法、平板菌落计数法、比浊法等。制作生长曲线时,应以菌数的对数为纵坐标,生长时间为横坐标。(3)培养一般细菌时,需要将培养基的pH调至中性偏碱。4.某工厂为了生产耐高温植酸酶饲料添加剂,开展了产该酶菌株的筛选、酶的固定化及其特性分析研究,其流程如图所示:请回答:(1)土...