教学片如何用快速检测试纸条检测Bt(Cry1Ab1Ac)转基因水稻

教学片:如何用快速检测试纸条检测Bt(Cry1Ab/1Ac)转基因水稻视频地址:http://www.56.com/u32/v_NTgwODM0NTM.html基本常识目前获得转基因生物安全证书的两种转基因水稻(“华恢1号”和“Bt汕优63”)都能够产生两种蛋白质Cry1Ac和Cry1Ab,在快速检测过程中,样本中只要有两种中的任何一种蛋白质,试纸条就会显示阳性。此快速检测试纸条只能检测Cry1Ac和Cry1Ab两种蛋白质,即使样本是其他的转基因品种,但是不能产生这两种蛋白质的话,快速检测试纸条也没有作用。所以,此试纸条不能检测转基因大豆,需要用专门的检测试纸条。检测步骤1.准备样本2.配制蛋白质提取液3.提取蛋白质4.快速检测5.结果分析1.准备样品将可疑的大米、稻种(去壳,约10-20粒)磨碎,尽量达到粉末状。如果是水稻叶片(约3-4片),需捣碎至泥浆状。2.配制蛋白质提取液将检测用的粉末和纯净水以1:10的比例(体积比)混合,充分摇匀备用(约3分钟)。容器可以选择10ml的塑料密封管。配制完成后常温保存,当日配当日用。3.提取蛋白质将磨碎的样本和提取液以1:4的比例(体积比)混合,充分摇匀(约1-2分钟),混合均匀后静置备用。容器可以选择1.5ml的塑料密封管。4.快速检测保持垂直方向将检测试纸条上标有“sample”的一端浸入样品提取液中。试纸条浸入样品提取液的部分不要超过0.5cm。在整个检测过程中要保持试纸条始终浸在样品提取液中(3-5分钟即可)。5.结果分析质控线一般会在3—5分钟内出现。最长的反应时间为20分钟,在这段时间里最好将试纸条从样品提取液中取出。如果质控线没有出现,那么本次检测失败。测试线显现,说明样品为阳性。测试线不显现,说明样品为阴性。测试线的颜色变化与质控线的颜色变化一样,都是由红变紫。检测试纸条需保存于4度低温条件,如在野外条件艰苦,尽量避免暴露在高温下。购买试纸北京博欧实德生物技术有限公司地址:北京朝阳区北苑路奥运媒体村天畅园1号楼C1-2006室[100107]http://www.instrument.com.cn/netshow/SH101701/office.asp注:本片所述试纸仅能够检测含有Cry1Ab/1Ac转基因成分的转基因水稻,转基因大豆种子检测纸条须另外购买,详情可咨询北京博欧实德生物技术有限公司。附:快速检测试纸条法在大豆转基因检测中的应用来源:上海农业网转基因食品的安全问题,特别是转基因食品对人及动物的健康,以及对生态环境的影响,一直是人们关注的焦点。2008年中国从美洲进口3000多万吨转基因大豆,出口欧美等国家40多万吨非转基因大豆,2009年一季度我国大豆的进出口量呈递增趋势,为加强大豆产品的食品安全管理,需要检验机构对其进行有效监控。国内外转基因检测主要有三种方法,第一种是以核酸为基础的PCR检测方法,包括定性PCR、实时荧光定量PCR、PCR-ELISA半定量和基因芯片等方法;第二种是检测外源基因的表达产物一蛋白质检测方法,分为试纸条、ELISA和蛋白芯片三种方法;第三种是利用红外检测转基因产品化学及空间结构。以核酸为基础的PCR检测方法,是目前国内外检测生物技术产品最常用的方法,PCR方法具有准确、检测限低、适用范围广的特点,但需要的仪器设备昂贵,检测周期较长,因此需要一种快速检测方法来充实,满足大豆产品在种植、加工及贸易中的监控需要。目前,快速检测试纸条法能较好地对大豆产品进行检测,且检测结果准确、速度快、成本低,适合快速检测的需要。快速检测试纸条法应用了双抗体夹心法,首先将CP4EPSPS蛋白特异的抗体,偶连于显色试剂,并参入试纸条。当试纸条被插入含有CP4EPSPS蛋白的植物组织的小量萃取物时,偶连抗体与蛋白之间就发生了结合,与偶连于显色试剂上的某些但不是全部抗体形成夹心物。膜片含有两个捕获区,一个捕获区可捕获结合的CP4EPSPS蛋白,另一个捕获区可捕获显色试剂。当夹心物和未反应的显色试剂被膜片上的特定区捕获时,这些捕获区就显现出红色。若膜片上仅存在一条红色对照线,便说明受检样品为阴性样品,若存在两条线,便说明受检样品为阳性样品。文章采用快速检测试纸条法与PCR方法,分别检测阴性大豆、不同国家阳性大豆、不同转基因含量的阳性大豆,比较两种方法检测结...

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