第17课时DNA的粗提取与鉴定学习目标1.通过对植物或动物组织中的DNA进行粗提取,了解DNA的物理化学性质。2.理解DNA粗提取与鉴定的原理,掌握DNA粗提取技术。3.利用DNA的性质、细胞的特征和试剂的使用方法进行实验设计和操作。预学案一、基础知识1.提取DNA的方法(1)DNA的粗提取就是要利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在①物理和化学性质方面的差异,提取DNA,去除其他成分。(2)DNA的溶解性:DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的②NaCl溶液中溶解度不同,利用这一特点,选择适当的盐浓度就能使③DNA充分溶解,而使杂质沉淀,或者相反,以达到分离目的。(3)DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性:④蛋白酶能水解蛋白质,但是对DNA没有影响。大多数蛋白质不能忍受60~80℃的高温,而DNA在⑤80℃以上才会变性。洗涤剂能够瓦解⑥细胞膜,但对DNA没有影响。2.DNA的鉴定:在⑦沸水浴条件下,DNA遇⑧二苯胺会被染成⑨蓝色。二、实验设计1.实验材料的选取:选用⑩DNA含量相对高的生物组织,成功的可能性更大。2.破碎细胞,获取含DNA的滤液:动物细胞的破碎比较容易,以鸡血细胞为例,在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水,同时用玻璃棒搅拌,过滤后收集滤液即可。如果实验材料是植物细胞,需要先用洗涤剂溶解细胞膜。3.去除滤液中的杂质:当氯化钠的物质的量浓度为0.14mol/L时,DNA的溶解度最低,而蛋白质等会溶解,利用这一原理,可以使DNA在盐溶液中溶解或析出,从而达到分离。4.DNA的析出与鉴定:将处理后的溶液过滤,加入与滤液体积相等的、冷却的酒精溶液,静置2~3min,溶液中会出现白色丝状物,这就是粗提取的DNA。用玻璃棒沿一个方向搅拌,卷起丝状物,并用滤纸吸取上面的水分。取两支20mL的试管,各加入物质的量浓度为2mol/L的NaCl溶液5mL,将丝状物放入其中一支试管中,用玻璃棒搅拌,使丝状物溶解。然后,向两支试管中各加入4mL的二苯胺试剂。混合均匀后,将试管置于沸水中加热5min,待试管冷却后,比较两支试管中溶液颜色的变化,看看溶解有DNA的溶液是否变蓝。探究案：知识点一:提取DNA的方法1.提取大分子物质的基本思路是怎样的?2.DNA与蛋白质在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同,尝试完成表中内容。试剂溶解情况DNA蛋白质物质的量浓度为2mol/LNaCl溶液物质的量浓度为0.14mol/LNaCl溶液酒精(体积分数为95%的冷酒精)3.盛放鸡血细胞液最好用什么样的容器?为什么不宜用玻璃容器?知识点二:DNA粗提取的实验操作及鉴定方法1.去除滤液中杂质有三种方法:(1)第一种方法是利用DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同,通过控制NaCl溶液的浓度去除杂质。如何进行操作?(2)利用DNA对酶的耐受性也可以去除滤液中的杂质,其原理是什么?如何进行操作?(3)利用DNA对高温的耐受性也可以去除滤液中的杂质,其原理是什么?如何进行操作?2.如何用乙醇析出DNA?预冷的乙醇有何优点?3.如何用二苯胺鉴定DNA?检测案：1关于DNA的粗提取与鉴定的实验,不是该实验依据的实验原理的一项是()。A.DNA在NaCl溶液中的溶解度,随着NaCl溶液浓度的不同而不同B.利用DNA不溶于酒精的性质,可除去细胞中溶于酒精的物质而得到较纯的DNAC.DNA是大分子有机物,不溶于水而溶于某些有机溶剂D.在沸水中DNA遇二苯胺会出现蓝色反应2下表有关“DNA粗提取与鉴定”的相关操作中所选取的试剂,不正确的是()。选项相关操作选取的试剂A破碎鸡血细胞蒸馏水B溶解核内DNA2mol/LNaCl溶液C提取杂质较少的DNA冷却的95%的酒精DDNA的鉴定双缩脲试剂3.以下与DNA的提取与鉴定有关的叙述,正确的是()。A.可用于鉴定蛋白质和DNA的试剂分别是斐林试剂和二苯胺试剂B.只能通过动物细胞提取DNAC.NaCl的物质的量浓度为0.14mol/L时,DNA的溶解度最高D.从细胞核中提取DNA时所用的提取液是NaCl溶液4.下列DNA粗提取的实验操作中,经离心或过滤后取上清液或滤液的是()。①在新鲜鸡血中加入适量的柠檬酸钠,混合均匀后离心②在盛有血细胞的塑料烧杯中加蒸馏水,快速搅拌后过滤③在2mol/L的氯化钠溶液中放入丝状物,轻轻搅拌后过滤④在溶有DNA的2mol/L的氯化钠溶液中缓缓加入蒸馏水,轻轻搅拌后过滤A.①②B.②③C.③④D.①④5.下图为DNA的粗提取与鉴定实验过程中的一些重要操作示意图。①正确的操作顺序是。②上图C、E步骤都加入蒸馏水,但其目的不...