人乳头状瘤病毒（HPV）疫苗的最新研究进展王小兵张伟中国协和医科大学中国医学科学院肿瘤研究所生物检测中心摘要：人乳头状瘤病毒（HPV,humanpapi1lomavirus）感染是宫颈癌的主要病因。清除HPV感染和阻断由HPV感染所引发的宫颈癌前病变的进展尚缺乏理想的方法。目前，国际上已有20多种HPV相关疫苗已进入动物和临床试验阶段，主要分为预防性疫苗和治疗性疫苗，主要制剂形式是蛋白质、核酸。动物实验和临床试验结果显示HPV疫苗将在预防HPV感染及治疗由感染所引起的相关疾病方面将有重要作用。关键词：人乳头状病毒疫苗进展中图分类号：R730.7文献标识码A人乳头状病毒是一种无包膜的DNA病毒，目前已发现100多型别，主要感染生殖道粘膜和口腔、咽部上皮粘膜细胞等，是宫颈癌的主要病因，在我国妇女宫颈癌组织中HPV感染率大于95%,其中高危型HPV如16、18型占90%以上，世界范围内每年有40万新发宫颈癌病例，20万人死于该病[1]。HPV感染与宫颈上皮不典型增生及粘膜生殖道尖锐湿疣发病关系密切。因此，研制HPV疫苗来预防HPV感染和治疗HPV感染引起的相关疾病对于保护广大妇女身体健康具有重要价值。一.HPV疫苗的分型1.HPV疫苗可分为预防性和治疗性两种类型1.1HPV预防性疫苗：可阻断HPV感染皮肤和粘膜，一般由病毒衣壳蛋白L1或L1+L2组成，在细胞内可自我组装成空心病毒样颗粒（VLPs）[2],它具有与完整病毒相同的抗原空间表位，可激发机体的CD4+淋巴细胞介导的体液免疫反应，刺激机体产生保护性中和抗体。预防型疫苗种类较少，主要以HPV病毒的结构蛋白质形式存在。1.2HPV治疗性疫苗：可清除由HPV感染所引起的肿瘤残存病灶、宫颈不典型增生（CIN）及生殖器尖锐湿疣，阻断低危型病变向高危型及癌症的转变过程。主要分为蛋白质疫苗和基因疫苗。HPV引发上皮细胞的转化并最终导致癌变主要由于HPV转化基因E6、E7造成,E6可诱发P53的降解,E7可抑制Rb的抑癌功能。实验证实在宫颈上皮细胞发生癌变的整个过程中必须有E6、E7基因的持续表达，故E6、E7已成为HPV治疗性疫苗研究焦点。另外，由于HPV基因组已整合于基底层细胞染色体中，病毒复制需要El、E2的表达，因此国际上有用El、E2来设计治疗性疫苗的研究报道。1.2.1HPV治疗性蛋白疫苗：该疫苗的抗原部分一般采用E6或（和）E7,E7免疫原性优于E6,E6/E7融合后可提高免疫效果，在使用或不使用佐剂的情况下均可产生细胞免疫反应。由于E6、E7蛋白本身的免疫原性较弱以及具有潜在的致癌性，而且野生型的E6、E7不易被降解，不利于抗原的递呈，因此HPVE6、E7疫苗多经修改或融合其它蛋白以提高其免疫效果。蛋白质疫苗又分为多肽疫苗，融合蛋白疫苗，嵌合疫苗等。多肽疫苗：E6、E7与人HLA型相配的多肽片段，使用佐剂诱导机体产生CTL反应来治疗HPV感染。如E7肽段疫苗。嵌合蛋白疫苗：HPV晩期蛋白L1和L2的末端与早期蛋白相融合，以激发对早期蛋白的免疫。如L1-E7、L2E7（TA-GW）、L2E7E6（TA-CIN）等。融合蛋白疫苗：由HPV早期蛋白相互融合或早期蛋白融合有其它蛋白，能更好的激发对机体免疫系统的免疫功能。如E6/E7、HSP/E7融合蛋白等。1.2.2HPV治疗性基因疫苗：基因疫苗可分为DNA和RNA两种。采用基因载体携带E6或E7基因进入抗原呈递细胞，并持续表达抗原蛋白分子，免疫系统识别抗原后被澈活清除感染HPV的细胞。基因疫苗可持续表达抗原，并易于构建和改造，易于制成多价疫苗，不需要佐剂，热稳定性好，成本低廉等，但同时存在免疫效果弱和重组复活等安全性问题。1.2.2.1DNA疫苗：采用病毒载体或其他载体携带HPV早期基因，如重组有E7的牛痘病毒疫苗、腺病毒疫苗、腺相关病毒疫苗，一些疫苗还混合有APC的表面受体的相应配体、化学澈活剂等，还有学者将DNA疫苗中融合有可引导抗原至细胞内降解的序列、致细胞死亡的序列等。DNA疫苗的主要问题为HPV基因整合后具有潜在危险，而且不具有内在的扩增能力，以及不能在体内扩散而影响其效用的发挥。1.2.2.2RNA疫苗：具有RNA复制子可自我复制［3］。采用a病毒SINrep5作为复制子，融合有早期基因片段和其他基因片段，如单纯疱疹病毒外壳蛋白基因（VP22）、结核杆菌热休克蛋白基因（HSP70）和定位到内体、溶酶体的信号蛋白基因（LAMP...