经皮穴位电刺激对大运动量耐力训练大鼠骨骼肌Bcl-2和Bax含量的影响摘要：运动性疲劳是运动医学中的常见病，对运动性疲劳及其恢复的研究已经成为运动医学中亟待解决的课题之一。经皮穴位电刺(transcutancluselectricalacupointstimulation，TEAS)，是把经皮电神经刺激疗法与针灸穴位相结合，通过皮肤将特定的低频脉冲电流输入人体以治疗疾病的方法。关键词：电刺激疲劳BCL-2：G626.5：A：ISSN1672-6715（2019）08-039-01TEAS具有安全、无创伤、易操作、便于携带等优势，因此在防治运动性疲劳方面得到广泛应用[1~3]。笔者在研究中发现，TEAS可以减缓大运动量耐力训练大鼠体重下降，稳定骨骼肌细胞能量代谢，显著降低大鼠血清肌酸激酶(CK)和肌酸激酶同工酶(CK-MM)含量，改善大鼠疲劳症状[4~6]。本实验采用TEAS的干预手段，观察其对大运动量耐力训练大鼠骨骼肌B细胞白血病-淋巴瘤-2(Bcellleukemia-lymphoma-2，Bcl-2)、B细胞白血病-淋巴瘤-2相关蛋白基因(Bcl-2-associ-ate邓小平roteingene，Bax)多肽表达的影响，探讨TEAS是否能减轻疲劳大鼠骨骼肌细胞的大量凋亡，从而减轻疲劳的发生，为针灸在防治运动性疲劳中的广泛应用提供依据。?1、实验分组。各组大鼠分别于后足三里、环跳穴位用电动剃毛器备皮，用75%酒精局部消毒，注意避免皮肤损伤。环跳穴在后肢髋关节后上缘;足(后)三里穴在后肢后外侧，当排骨小头下约5mm处[8]。正常组:常规饲养，每天将大鼠俯卧于自制大鼠固定器上15min，不加任何干预措施;模型组:共8周大运动量跑台运动，同样方法固定，不加任何干预措施;正常刺激组:不进行8周大运动量跑台运动，每天将大鼠俯卧于自制大鼠固定器上，分别于足三里、环跳穴放一直径约0.5cm长的电极片，再将电极片与韩氏HANS-200E穴位神经刺激仪相连，选用疏密波模式，刺激频率2~15Hz，强度2.5mA，时间15min。治疗1组:大鼠于跑台训练前进行TEAS干预，干预结束后1h再进行跑台运动，干预方法同正常刺激组，共8周;治疗2组:大鼠从于跑台训练第2周起，每次训练后1h进行TEAS干预，干预方法同正常刺激组，共7周。2、取材及处理末次训练治疗后各组大鼠禁食不禁水，用2%戊比巴妥钠30mL/kg腹腔注射麻醉后，迅速取右后肢腓肠肌(尽可能去除脂肪组织和结缔组织)，用锡纸包好速冻于液氮中，然后转移至低温冰箱(-80°C)中保存备用。3、指标检测采用Westernblotting方法检测各组大鼠骨骼肌凋亡和Bcl-2、Bax表达。?1.6统计学方法实验结果以(x±s)表示，采用SPSS13.0软件进行统计学处理，并对各观察指标进行正态分布检验。组间比较，符合正态分布者，采用单因素方差分析(One-wayANOVA)，不符合正态分布，采用多个独立样本比较的秩和检验(KIndepen-dentSamples)。4、讨论运动与细胞凋亡关系密切，凋亡的细胞会清除体内一些坏死的细胞，从而抑止周围组织的炎症反应，有利于骨骼肌的修复。在运动训练期间就会有肌肉细胞发生凋亡，这也是产生运动性疲劳导致运动能力降低的一个主要原因。当运动强度过大引起过度疲劳时，骨骼肌的细胞就会大量的凋亡并转化为细胞坏死。关于凋亡产生的机制至今尚未完全清楚，其中基因的调控起着关键的作用，可以说细胞凋亡是在基因控制下的细胞自我消亡过程。基因根据功能不同可分为凋亡基因和凋亡抑制基因两类。凋亡基因能诱导细胞凋亡，凋亡抑制基因能抑制细胞凋亡，其中尤以Bax及Bcl-2的研究引人注目。而细胞最终的结果是生存还是死亡，则取决于不同基因表达的比例。比如Bax/Bcl-2比值决定了细胞的命运，当比值大于正常值时，细胞则趋于凋亡，当比值小于正常值时，凋亡则受到抑制[9~10]。本实验通过Westernblotting方法检测大鼠骨骼肌细胞中Bcl-2和Bax基因表达的蛋白含量。结果显示，大强度耐力训练后，模型组大鼠骨骼肌中Bax含量与正常组比较显著增加，Bcl-2含量与正常组比较显著降低，且Bax/Bcl-2比值明显增加，说明该运动负荷超过机体生理调节能力时，能明显引起大鼠骨骼肌凋亡基因Bax增多，使抑制凋亡基因Bcl-2大量减少，抗凋亡的能力下降，引起细胞大量凋亡，造成骨骼肌的疲劳或损伤。而治疗1组、治疗2组大鼠骨骼肌中Bcl-2表达均显著高于模型组，Bax含量明显低于模型组，且Bax/Bc...