四川省家畜布鲁氏菌病现状及检测方法介绍肖泸燕1；曾宪春2；谢佳利1;陈冬3；谢嘉宾3；李淳3（1.四川艺术职业学院，成都611131；2.四川省畜牧兽医杂志社，成都6100413.四川省动物疫病预防控制中心，成都610041）前言家畜布鲁氏菌病是由布鲁氏菌引起的人兽共患传染病，世界动物卫生组织（OIE）将该病列为B类动物疫病，我国将其列为二类动物疫病。该病以羊、牛和猪最易感，犬及60多种家畜、家禽、野生动物有不同程度的易感性，其特征主要是侵害生殖系统，引起流产、不孕、睾丸炎等。感染动物可长期带菌，成为对其他动物和人类最危险的传染源。该病曾在上世纪末得到有效控制，但近年来，家畜布鲁氏菌病阳性率逐步升高，疫情有反弹趋势，已成为我省重点防控的人畜共患病种。本文通过介绍全省家畜布鲁氏菌病流行现状及常见的几种检测方法，希望对基层兽医工作者有所帮助。1流行现状1.1流行区域主要分布于川西北历史重疫区，以甘孜、阿坝两州为主，其他地方为散在发病或输入性存在。1.2菌型分析我省曾从感染病人样本中分离得到菌株，显示我省主要存在有羊种菌第1、2、3生物型，牛种菌第1、3、4、6、7、9生物型。1.3流行特点我省畜间布病存在历史久远，分布广泛。该病在川西北高原牧区及半农半牧区主要以羊种及牛种交替流行为主，犬种在农区散发存在，局部地区尚有零星的猪布病感染。通过流行病学调查及监测显示，牛一般在12月至4月发生流产现象，以首胎多发；羊一般在11月至2月为流产的高峰季节；猪只在产仔和配种季节最易感染。其中甘孜、阿坝两州以流产布鲁氏菌（牛种）第9种生物型为主，又是流产布鲁氏菌和马尔他布鲁氏菌（羊种）混合感染的历史疫区，以牛（犏牛最易感，次为牦牛和黄牛）的感染率和出菌率最高，危害最严重，羊次之。流调结果显示，目前全省牛羊布病阳性率在0.5%～2.0%左右。2血清学检测方法血清学实验是检测家畜布病最主要的方法，主要包含以下几种常见方法。2.1凝集试验(RBPT、SAT)---本文来源于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除---虎红平板凝集试验（RBPT）：实验要在保证受检血清新鲜无溶血、无蛋白凝块及无腐败臭味的前提下进行。在分别滴取0.03ml血清及0.03ml抗原，用牙签轻轻搅动后，4分钟内凝集则判定为阳性，无凝集现象，呈均匀粉红色者判为阴性。该方法所需时间短、易操作，因此普遍用于我省布病的初筛。试管凝集试验（SAT）:采用此法前，需首先确定被检血清的稀释度，牛、马、骆驼稀释用1:50,1：100,1：200,1：400;猪、山羊、绵羊和狗用1：25,1:50,1:100,1:200。大规模检疫时可用2个稀释度，即牛、马、骆驼用1：50,1：100，猪、山羊、绵羊和狗用1:25,1:50。待所有试验管充分震荡后，置37℃温箱感作20小时。另外，注意比浊管的配置要与相应稀释度对应。结果判定牛、马和骆驼于1:100血清稀释度，猪、山羊、绵羊和狗于1:50血清稀释度出现“++”以上的凝集现象时，被检血清判定为阳性反应。血清凝集价在1:50时，该血清样品为疑似反应，有条件者，经3—4周后须再做一次检查，仍为疑似反应者判为阳性，凝集价在1:50以下则为阴性反应。羊和猪血清在1:25凝集为可疑，在1:50或以上凝集为阳性。RBPT在使用时操作方便、快捷，适用于大规模的筛选检疫，但易出现假阳性。SAT特异性高，检测比较准确，但操作麻烦，费时费力，不适用于大规模的筛选检测，不能区分人工免疫和自然感染。通常，我省先用RBPT筛选，阳性样品再用SAT复核以做出比较准确的判断。2.2补体结合试验（CFT）该试验是利用绵羊红细胞和溶血素可以形成结合物，在补体的作用下，发生溶血。在反应体系中，他们作为指示系统，与布氏菌的特异性抗原、抗体复合物竞争结合补体。如果发生溶血，说明血清中没有特异性抗体，判为阴性。该试验的优点：灵敏度高、特异性强、易于普及。但是该试验参与反应的成分多，影响因素复杂，操作步骤繁锁并且要求十分严格，稍有疏忽便会得出不正确的结果。因此，我省大部分地区尚未采用此方法。2.3酶联免疫吸附试验(ELISA）ELISA是国内免疫技术中应用最广的一种，我省用于检测布病的主要有iELISA;cELISA两种。iELISA的特异性和高度敏感使它成...