[作者简介]吴富忠(1964-,男,副主任技师,主要从事卫生理化检验工作。化学测定方法蔬菜、水果及其制品中亚硝酸盐与硝酸盐的HPLC法测定吴富忠,王恒(浙江省舟山市疾病预防控制中心,浙江舟山316021[摘要]目的:建立蔬菜、水果及其制品中亚硝酸盐与硝酸盐的高效液相色谱同时测定方法。方法:样品中亚硝酸盐与硝酸盐用超纯水浸提或超声提取,经活性炭脱色后过滤或离心沉淀,滤液或上清液经0.45m水相膜过滤后进样,在PhenomenexSAX色谱柱上,以0.01mol/L磷酸二氢钾为流动相进行分离,205nm检测,外标法定量。结果:该法最低检出量分别为亚硝酸盐氮0.1mg/kg、硝酸盐氮0.07mg/kg。样品加标回收率,亚硝酸盐为91.0%~101.9%、硝酸盐为94.7%~106.0%,RSD<5%。结论:该方法操作较简单,灵敏度高,速度快,干扰少,结果准确,适用于蔬菜、水果及其制品中亚硝酸盐与硝酸盐的同时测定。[关键词]高效液相色谱法;蔬菜、水果及其制品;亚硝酸盐;硝酸盐[中图分类号]O657.7+2[文献标识码]A[文章编号]1004-8685(201011-2741-03Determinationofnitriteandnitrateinvegetables,fruitsandderivedproductsbyHPLCWUFu-zhong,WANGHeng(ZhoushanMunicipalCenterforDiseaseControlandPrevention,Zhoushan316021,China[Abstract]Objective:Todevelopamethodfordeterminationofnitriteandnitrateinvegetables,fruitsandderivedproductsbyhighperformanceliquidchromatography.Methods:Theanalyteswereextractedwithultrapurewaterultrasonicallywave,andthendecoloratedwithactivecarbonorcentrifuged,filtrateorsupernatewasfilteredby0.45mfiltermembrane.TheseparationwascarriedoutonaPhenomenexSAXcolumnwith0.01mol/Lmonopotassiumphosphateasmobilephaseanddetectedat205nmThequantificationwasaccomplishedbyexternalstandardmethod.Results:Thedetectionlimitsofthismethodfornitrite-nitrogenandnitrate-nitrogenwas0.1mg/kgand0.07mg/kg,andtherecoverieswererangedfrom91.2%~101.9%and94.7%~106.0%respectivelywithRSDslessthan5%.Conclusion:Themethodissimple,sensitive,rapid,practica,laccurateandwhichissuitableforthedeterminationofnitriteandnitrateinvegetables,fruitsandderivedproducts.[Keywords]HPLC;Vegetables;Fruitsandderivedproducts;Nitrite;Nitrate蔬菜、水果及其制品中亚硝酸盐和硝酸盐的标准测定方法是GB/T15401-1994!水果、蔬菜及其制品亚硝酸盐和硝酸盐含量的测定∀和GB/T5009.33-2010食品安全国家标准!食品中亚硝酸盐与硝酸盐的测定∀,两标准均采用盐酸萘乙二胺直接显色法和镉柱还原法测定;其中GB/T5009.33-2010食品安全国家标准新增了离子色谱法。在标准检测方法中,硝酸盐的测定,化学比色法需通过镉柱还原为亚硝酸盐[1,2];离子色谱法需将样品提取液经多种预处理小柱处理后才能进样且出峰时间较长[2],操作均较繁琐。本研究根据实际,将样品中亚硝酸盐和硝酸盐用去离子水浸提,活性炭脱色后过滤或离心沉淀,滤液或上清液经0.45m水相膜过滤,滤液直接进样,205nm紫外检测,结果准确、快速,能同时测定蔬菜、水果及其制品中亚硝酸盐和硝酸盐。1材料与方法1.1仪器Agilent1100液相色谱仪(美国安捷伦公司,包括AgilentChemStation工作站、四元梯度泵、真空脱气箱、恒温柱温箱、紫外检测器。MilliporeMilli-Q纯水系统(MolsheimFrance;Orion828型pH计(USA;IKAT25可调高速匀浆机(德国;SB2200超声波清洗器(上海Branson;水浴箱;离心机(4000r/min;JY5002型电子天平(精度0.01g,上海精宏科器。1.2试剂0.01mol/L磷酸二氢钾(HPLC级,10%磷酸调pH至3.2;10%磷酸;220g/L乙酸锌;106g/L亚铁氰化钾;超纯水(电阻率为18.2M#cm;标准储备液:称取优级纯亚硝酸钠0.2463g、硝酸钠0.2963g溶于水并定容至500m,l浓度为0.1mg/ml(以氮计,下同。2741中国卫生检验杂志2010年11月第20卷第11期ChineseJournalofHealthLaboratoryTechnology,Nov2010;Vol20No111.3色谱条件检测波长:205nm;色谱柱:PhenomenexSAX80A(2504.6mm5m;∃流动相:0.01mol/L磷酸二氢钾溶液(pH=3.2;流速1.5ml/min;柱温:30%;进样量10l。1.4实验方法1.4.1试样测定取新鲜蔬菜中食用...