电针对局灶性脑缺血模型大鼠脑内STAT1阳性神经元的影响作者：于涛，许能贵，符文彬，易玮，徐振华，付雪松【摘要】目的研究脑缺血后STAT1在病灶局部的调控机制以及电针的干预影响。方法采用热凝法制成MCAO模型，采用免疫组织化学的方法检测不同时间段STAT1在病灶侧皮质、海马CA1区的调控机制以及电针的干预结果。结果模型24h组多个指标稍有增高;模型组3d组指标均有显著的增高(P《0.05)。电针组中电针2h组、电针24h与模型组无显著性差异(P》0.05);电针3d组明显低于与模型组，差异有显著性(P《0.05或P《0.001)。结论电针治疗可以抑制脑缺血后的STAT1水平，这可能是其治疗脑缺血、改善受损脑功能的一个重要途径。【关键词】电针;脑缺血;STAT1在脑缺血引起的局部炎性反应中，JAKs-STATs家族的信号传导对病灶区细胞凋亡过程起着重要的作用，其中STAT1激活可能与细胞凋亡相关[1]。因此，研究脑内STAT1在脑缺血后的调控机制以及电针的干预作用，对了解电针治疗对脑缺血的内在干预机制有着一定的意义。---本文来源于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除---1动物和材料1.1动物分组广州中医药大学动物实验中心SPF级SD大鼠90只[合格证号NO031878，许可证号SYXK(粤)，2008-0020]，均为雄性，体质量(220±20)g。由随机数字表法随机分为假手术组(J组)、模型组(M组)和电针组(Z组)，每组又分为2h，24h，3d3个时间段组。1.2试剂和材料兔抗STAT1一抗(博士德公司出品)，免疫组化染色试剂盒(即用型SABC)(博士德公司出品)，Leica冰冻切片机(德国Leica公司)，Leica倒置显微镜及图像处理系统(德国Leica公司)。2方法2.1制模方法采用的热凝闭大脑中动脉致局灶性脑缺血MCOA模型[2]。假手术者只暴露大鼠大脑中动脉，不予凝闭。2.2电针干预方法电针组选取督脉经穴百会(GV20)、大椎(GV14)两穴，其定位参照大鼠的常用针灸穴位[3]。以1寸毫针向后斜刺百会0.5寸，直刺大椎0.3寸，两穴接上电针，用疏密波，5～10次/s，强度以大鼠安静耐受为度，约2～3V，时间30min，1d/次。Z2h组在手术后1h进行电针治疗，电针30min，治疗后30min后处死---本文来源于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除---灌流固定、Z24h组在造模后24h后处理;Z3d组在同一时间治疗3d后处理。假手术组和模型组均在相应的时间进行处理。2.3实验方法每组大鼠在干预结束后用10%水合氯醛麻醉，常规灌注固定。第2天，取脑组织进行冠状冰冻切片，片厚40μm。收集于0.1MPB(pH7.4)中备用。在实验中，因麻醉意外，M24h组死亡2只，M3d组死亡1只，Z2h组死亡1只。STAT1免疫组织化学方法将严格按说明书操作。对照实验以正常羊血清和PBS代替一抗，同步进行上述免疫组织化学染色，结果为阴性。2.4图像分析及统计学处理确定标记的部位，在目镜10×和物镜40×的视野下，应用Leica-Qwin图像分析系统测定梗塞周围区和同侧海马CA1区的阳性细胞数、平均截面积、平均光密度值进行半定量分析。每个区域测3个不同视野，取其均值。统计使用SPSS11.5软件包中单因素ANOVA计算法和最小显著性差异(LSD)检验法来进行均数的显著性检验，方差齐性检验水平α1=0.1，显著性检验水平α2=0.05。3结果各组大鼠病灶侧皮质区和病灶侧海马CA1区STAT1免疫阳性细胞的定量分析见表1～2。表1显示，在病灶侧皮质区，假手术组3个组---本文来源于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除---在STAT1阳性细胞数、平均截面积、平均光密度值3个指组间均无显著性差异(P》0.05);模型组中M2h在3个指标方面与J2h无明显差异(P》0.05)，M24h组较M2h组在3个指标的数值上均有一定程度地升高，但两者相较均无明显差异(P》0.05)，与J24h比较亦然;M3d各数值较前两组均有明显的升高，与M2h和J3d之间比较在3指标上均有显著性差异(P《0.001);电针组方面：3指标Z2h与J2h、M2h以及Z24h与J24h、M24h间均无显著性差异(P》0.05);Z3d与J3d间也均无显著性差异(P》0.05)，但与M3d比较差异均有显著性(P《0.001)。表1病灶侧皮质区STAT1免疫阳性细胞形态学参数表2病灶侧海马CA1区STAT1免疫阳性细胞形态学参数表2的数值和表1基本一致，假手术组3个组在STAT1阳性细...