中国大陆新记录种珊瑚拟青霉的分离鉴定及其培养基优化摘要：从山东省济南市佛慧山采集到一株寄生于君迁子(DiospyroslotusL)种子上的拟青霉属(Penicilliopsis)真菌，经系统分类学研究和DNA分子测序，确定其为中国大陆新记录种PenicilliopsisclavariaeformisSolms,并将其命名为“珊瑚拟青霉”。选择多种培养基对该菌株进行培养并对其形态特征进行了观察。关键词：中国大陆；新记录种；珊瑚拟青霉中图分类号：S182文献标识号：A文章编号：1001-4942(2018)07-0145-04AbstractOnePenicilliopsisfunguswasisolatedfromseedsofDiospyroslotusLcollectingfromFohuiMountaininJinanofShandongProvince.AftersystematictaxonomyandDNAmolecularsequencing,itwasidentifiedasPenicilliopsisclavariaeformisSolms,anewrecordspeciesintheChinesemainland.Avarietyofculturemediawereselectedforculturingthestrainanditsmorphologicalcharacteristicswereobserved.---本文来源于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除---KeywordsChinesemainland；Newrecordspecies；Penicilliopsisclavariaeformis青霉属真菌是虫生真菌中的重要类群，现记录约50种，其中许多是重要的害虫自然控制因子，有些是害虫生物防治的重要材料。Penicilliopsisclavariaeformis是Penicilliopsispesudocordyceps的无性型，Penicilliopsispesudocordyceps的全型是Pesudocordycepsseminicola[l]o台湾收集到的Pesudocordycepsseminicola在自然生长的成熟子座上发现了子囊胞子。Penicilliopsisclavariaeformis曾在印度的红树林采集到，并通过盐碱性实验表明其具有耐盐碱性，可调节碳代谢，在糖酵解、磷酸戊糖途径中具有重要作用⑵。Penicilliopsisclavariaeformis结晶纯化可得到代谢产物penicilliopsin,该代谢产物是一种橘黄色的色素物质，分离提取得到醍茜素或大黄素[3,4],这两种物质具有抗抑郁或抗肿瘤活性[5-9]。2016年作者在山东进行水生、耐盐中药资源普查时发现一株拟青霉属真菌，寄生于君迁子的种子上，形成珊瑚状的子实体，经过人工培养和分子鉴定，确定其为珊瑚拟青霉。该真菌曾于2002年在中国台湾报道过[1],本研究为首次在中国大陆报道，君迁子种子为珊瑚拟青霉新寄主。本试验使用不同的固体培养基对珊瑚拟青霉---本文来源于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除---菌进行初步优化，通过人工培养、系统分类学研究及DNA分子鉴定对该真菌形态进行了详细描述，为今后进一步研究珊瑚拟青霉的抗抑郁和抗肿瘤活性及开发相应的微生物菌剂提供理论依据。1材料与方法1.1供试材料1.1.1供试样品珊瑚拟青霉从君迁子种子中分离、纯化得到，采于济南市佛慧山，由山东中医药大学徐凌川教授鉴定。标本保存于中国科学院微生物研究所中国普通微生物菌种保藏管理中心CGMCC:14129o1.1.2试验仪器PH100-DB500U数码生物显微镜（凤凰光学）；SUPRATM55热场扫描电子显微镜（德国蔡司）；PCR反应扩增仪（加拿大BBI公司）；Biospin植物基因组DNA提取试剂盒。1.2试验方法1.2.1固体培养基的制备（1）察氏酵母膏琼脂培养基：硝酸钠0.9g；氯化钾0.15g；硫酸镁0.15g；硫酸亚铁---本文来源于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除---0.03g；酵母1.5g；磷酸二氢钾0.3g；蔗糖9g；琼脂6g；蒸馆水300mL；121°C灭菌40mino（2）燕麦琼脂培养基：燕麦12g；葡萄糖6g；蔗糖3g;蛋白豚0.6g；硫酸镁0.15g；磷酸二氢钾0.3g；琼脂6g；蒸憎水300mL；121°C灭菌40mino（3）麦芽汁琼脂培养基：麦芽汁20g；蛋白豚0.3g；葡萄糖6g；琼脂6g；蒸馅水300mL；121°C灭菌40min。（4）25%甘油硝酸盐琼脂培养基：硝酸钠0.9g；氯化钾0.15g；硫酸镁0.15g；硫酸亚铁0.03g；酵母1.5g；磷酸二氢钾0.3g；甘油78mL；琼脂6g；蒸馆水300mL；121°C灭菌40mino1.2.2光学显微镜观察从25。（2培养7d的四种固体培养基中分别挑取少量的菌丝置于显微镜下观察，以菌落生长的快慢、大小、浓密程度、颜色、质地和产砲结构及分生砲子梗（分支状况，简单，复杂，长短）的形态特征（几轮生、大小）作为鉴别主要依据。1.2.3扫描电镜...