张宇，陈信义复方浙贝颗粒联合阿霉素对AML-KG-1a移植瘤PI3K/AKT信号通路影响#11,2**510152025303540（1.北京中医药大学东直门医院,北京100700；2.中医内科学教育部和北京市重点实验室,北京100700）摘要：目的：通过免疫组化的方法探讨复方浙贝颗粒联合阿霉素对KG-1a细胞移植瘤PI3K/AKT信号通路的影响。方法：将KG-1a细胞接种BALB/c-nu裸小鼠腋前皮下构建移植瘤动物模型，给予复方浙贝颗粒灌胃联合阿霉素腹腔注射，实验结束后处死小鼠，剥离肿瘤，将瘤块组织制成切片，通过免疫组化结合ImagePr0Plus6.0免疫组化彩色图像分析，观察复方浙贝颗粒联合阿霉素对KG-1a移植瘤细胞PI3K/AKT相关蛋白表达的影响。结果：与阿霉素组比，高剂量CZBG可以明显抑制mTOR蛋白的表达（P＜0.05），CZBG各剂量组均可以抑制NF-κB蛋白的表达（P＜0.05）。结论：CZBG可以协同阿霉素下调mTOR及NF-κB的表达。关键词：复方浙贝颗粒；KG-1a细胞系；PI3K/AKT信号通路;中图分类号：请查阅《中国图书馆分类法》TheEffectofCompoundZheBeiGranule(CZBG)combinedwithDoxorubicinontheExpressionofmTOR,PI3K,NF-κBandPTENinKG-1acelllinetumorxenograftsinMice.Zhangyu1,Chenxinyi1,2(1.DongzhimenHospitalBeijingUniversityofChineseMedicine,Beijing100700;2.KeyLabortaryofBeijingandMinistryofEducationofTCMinternalMedicine,Beijing100700)Abstract:Objective：ToinvestigatetheeffectofCompoundZheBeigranule(CZBG)combinedwithdoxorubicinontheexpressionofmTOR,PI3K,NF-κBandPTENinKG-1acelllinetransplantationtumorsinMice．Methods：SubcutaneoustumorxenograftmodelisestablishedbyinjectingtheacutemyeloidleukemiacelllineKG-1aintheaxillaryflankofBALB/c-nunudemice．Drug-combinationofCZBGintragastricadministrationanddoxorubicinintraperitonealinjection(i.p.)isgiventotheBALB/c-nunudemice．Thetumorxenograftsaremadeintosliceafterthedissection,andtheexpressionofmTOR,PI3K,NF-κBandPTENinKG-1acelllinetumorxenograftsaredetectedbyimmunohistochemicaltechnique.Theopticaldensity(OD)ofmTOR,PI3K,NF-κBandPTENinKG-1acelllinetumorxenograftsaremeasuredbyImagePmPlus6.0．Results:ComparedwithADMgroup,high-doseageCZBGcaninhibitthemTORexpressionobviously(P＜0.05)，mid-doseageandhigh-doseageCZBGcanbothinhibittheNF-κBexpression（P＜0.05)．Conclusion:CZBGcancollaboratewithdoxorubicintoreducetheexpressionofmTORandNF-κB.Keywords:CompoundZheBeigranule(CZBG);KG-1acellline;PI3K/AKTsignalpathway;0前言白血病干细胞(leukemiastemcell，LSC)的存在是难治性急性白血病（Refractoryacuteleukemia，RAML）的复发的根本原因。因LSC具有无限自我更新能力，且通常情况下处于基金项目：教育部高等学校博士点专项基金(20100013110008);北京市教委共建项目作者简介：张宇(1984-),男,2012级在读博士研究生,研究方向:中西医结合白血病防治应用研究通信联系人：陈信义(1954-),男,教授,博士生导师,研究方向:中西医结合血液肿瘤病防治.chenxinyi0729@126.com-1-静息状态[1]，而且，LSC具有天然耐药性，能够逃避化疗药物杀伤。因此，选择性针对LSC的靶向治疗有可能突破RAML难治的瓶颈。为此，我们选取高表达CD34+的人急性髓系白血病细胞系，并建立白血病移植瘤模型，以复方浙贝颗粒（CZBG）联合阿霉素（Doxorubicin,ADM）为干预药物，以免疫组化法检测PI3K/AKT通路相关蛋白表达，试图45505560657075靶向性的从LCS水平探讨CZBG逆转白血病多药耐药效应机制。1材料1.1细胞株人急性髓系白血病细胞KG-1a细胞，购于中国医学科学院血液病研究所，细胞接种于含10%胎牛血清的RPMI1640培养液中，置37℃、5%CO2和全湿条件下培养，取对数生长期细胞用于实验。1.2实验动物动物清洁级BALB/c-nu雌性裸小鼠32只，20-22g，购于北京维通利华实验动物技术有限公司，实验动物生产许可证号：SCXK(京)2012-001，SPF级动物房饲养。1.3实验用药复方浙贝颗粒（CZBG，浙贝母、汉防己、川芎）由北京康仁...