PA对人胃癌细胞放射敏感性的分析

PA对人胃癌细胞放射敏感性的分析[摘要]目的观察紫杉醇(PA)对人胃癌细胞株SGC7901放射敏感性的影响。方法采用MTT法获得PA对SGC7901细胞的半数抑制浓度(IC50),并以20%的IC50剂量为增敏浓度;克隆形成实验检测单纯照射组与PA(增敏浓度)+照射组在0、2、4、6、8GyX线照射后的细胞存活率,并观察细胞周期的改变及细胞形态的变化。结果PA对SGC7901细胞的IC50为16.11ug/ml,随着照射剂量的逐渐增加,单纯照射组和PA+照射组细胞存活率呈下降趋势,从4Gy开始,PA+照射组细胞的存活率低于单纯照射组(P[关键词]紫杉醇;人胃癌细胞株;放射增敏[中图分类号]R739.63[文献标识码]A[文章编号]1674-4721(2016)08(a)-0004-03[Abstract]ObjectiveToobservetheeffectofpacli-taxel(PA)ontheradiosensitivityofhumangastriccancercelllineSGC7901.MethodsMTTassaywasemployedtoobtainthe50%inhibitionconcentration(IC50)ofPAonSGC7901cells.20%oftheIC50dosewastreatedassensitiz-ingconcentration.Theclonogenicassaywasusedtoanalyzethecellviabilityofradiation除固定液,调整细胞加入碘化丙噪(PI)染液[9-10J,groupandPA(sensitizerconcentration)plusradiationgroupwithX-rayof0,2,4,6and8Gy.Thechangesofcellcycleandcellmorphologychangeswereobserved.ResultsTheIC50ofPAonSGC7901cellswas16.11ug/ml.ThecellviabilitygotdecreasedwithincreasingradiationdoseinradiationgroupandPAplusradiationgroup.Thecellvia-bilitiesofPAplusradiationgroupwerelowerthanthoseofradiationgroupatthedoseof4,6and8Gy.TherewashigherpercentageintheG2/Mphase,andlowerpercentageintheSphaseinPAplusradiationgroupversustheothertwogroups(P1.3.3克隆形成实验取SGC7901细胞,消化接种成单细胞悬液,接种合适数量的细胞于6孔板中。实验分为单纯照射组和PA+照射组,两组都给予0、2、4、6和8Gy的X线照射,设置3个复孔。结晶紫染色,计算>50个细胞的克隆数。1.3.4细胞周期检测SGC7901细胞接种于6孔板中,浓度为1X106个/ml,培养24h,分为空白对照组、单纯照射组、PA+照射组,以1000r/min离心去上机检测并分析细胞周期分布。1.3.5细胞光镜形态学观察设空白对照组、单纯照射组、PA+照射组,配制0.15%的胰蛋白酶消化细胞,制成5X104个/ml单细胞悬液接种于24孔培养板中[11],置于培养箱内培养48h后,PBS洗涤,室温干燥后树胶封片,光镜下观察、拍照。1.4统计学处理采用统计软件SPSS15.0对实验数据进行分析,计量资料以均数土标准差(x土s)表示,釆用t检验,多组间比较采用方差分析。以P0.05)(表2)。2.4光镜观察下的细胞形态学结果光镜下观察SGC7901细胞排列分散,为多角形,SGC7901细胞界限清楚,细胞核圆形,体积大。PA+照射组细胞界限不清,细胞变圆,核仁着色浅,胞质内可见大量颗粒(图1)。3讨论恶性肿瘤对人类健康有严重威胁,放射治疗在肿瘤的治疗中具有重要作用。因为肿瘤本身存在的敏感性和乏氧程度等的不同,所以肿瘤对放射治疗敏感性有差异[12-13]o胃癌患者大多数对放射治疗的耐受性较差,因此使用良好的放射增敏剂是提高胃癌放疗效果的有效方法[14-15]。PA抗癌机制主要是结合于细胞骨架的微管蛋白,促进微管蛋白的聚集,阻滞其解聚成亚单位,抑制有丝分裂的进行,进而诱导细胞凋亡[16-18]O实验证明PA具有放射增敏作用,可能是中止对放疗敏感的G2和M期[⑼。本研究中克隆形成实验结果显示,随着X射线照射剂量的增加,胃癌细胞的集落形成下降,同等剂量下,PA+照射组与单纯照射组比较,集落形成数量下降。自4Gy照射剂量开始,单纯照射组和PA+照射组细胞的存活率比较差异显著,提示PA具有放射增敏作用。放射生物学研究指出在细胞周期的不同时期放射的敏感性也不同,放疗最敏感为M期和G2期细胞,其次是G0/G1期,可通过使进入S期的细胞减少和造成G2/M期阻滞进而改变细胞周期,杀伤肿瘤细胞。在本研究中,PA+照射组G2/M期比例升高,S期比例下降,与单纯照射组比较,差异显著,提示PA对于胃癌细胞的增敏影响可能通过增加对放射线敏感的G2/M期分布比例来实现,与相关文献报道[20]相吻...

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