中国消毒学杂志2004年第21卷第3期#229#:1001-7658(2004)07-0229-03=研究报告>臭氧水对真菌杀灭作用的研究肖彩雯徐深杨云东赵俊华(河北省沧州市中心医院眼科,沧州061001)提要为观察臭氧水对串珠镰孢菌及烟曲菌的杀灭效果,采用悬液定量杀菌试验进行了实验研究。结果,以含4mg/L臭氧水作用1min,对串珠菌杀灭率为99.86%,作用3min可杀灭100%,以同样浓度臭氧水对烟曲菌作用5min的杀灭率为99.57%。结果指出,臭氧水对真菌具有比较强的杀灭作用。关键词真菌;臭氧;串珠镰孢菌;烟曲菌:R187.2文献标识码:BSTUDYONFUNGICIDALEFFICACYOFOZONEWATERXIAOCai-wen,XUShen,YANGYun-dong,ZHAOJun-hua(DepartmentofOphthalmology,CangzhouMunicipalCentralHospital,HebeiProvince,Cangzhou061001,China)AbstractInordertoobservetheefficacyofozonewaterinkillingFusariummoniliformeandAspergillusfumigatus,suspensionquantitativegermicidaltestwasusedtocarryoutexperimentalstudy.Theresultsshowedthat4mg/Lozonewaterkilled99.86%ofF.moniliformeaftercontactfor1minandcouldkilled100%aftercontactfor3min.Theozonewateratsameconcentrationwitha5mincontacttimekilled99.57%ofA.fumigatus.Theresultsindicatethattheozonewaterhasrelativelystrongfungici-dalefficacy.Keywordsfungus;ozone;Fusariummoniliforme;Aspergillusfumigatus臭氧是高效消毒剂,臭氧气体或水溶液都有很强的杀菌作用,可杀灭各种微生物112。臭氧对细菌和病毒灭活效果研究较多,对真菌杀灭作用的研究较少,且仅限于对白色念珠菌杀灭作用研究。本研究以临床菌株串珠菌和烟曲菌为指标,采用臭氧发生器,通过电解纯水产生臭氧气体,高压溶于液体中,最高臭氧浓度为13mg/L。为观察不同浓度的臭氧水对临床真菌的杀灭效果,进行了实验室试验。现将结果报告如下。1方法1.1真菌孢子悬液的制备取临床分离的串珠镰孢菌和烟曲菌斜面培养物,用3ml磷酸盐缓冲液(PBS)洗下菌苔,无菌组织研磨器研磨,稀释,显微镜观察,并计数,制备成菌悬液备用。1.2臭氧水的制备采用北方微电公司生产的臭氧水生成仪,通过电解纯水的方法获取臭氧,通过泵的循环将臭氧溶本课题由河北省科学基金项目(03276196D-59)资助。于生理盐水中,用碘量法测定臭氧浓度,最高臭氧浓度为13mg/L。1.3悬液定量杀菌试验试验在室温下进行,取新生产的臭氧溶液4.5ml,加入0.5ml菌悬液,用电动振荡仪振荡至规定时间,取0.5ml混合液加至含4.5ml中和剂(含5g/L硫代硫酸钠的磷酸盐缓冲液)试管内中和10min,取0.5ml加入无菌培养皿中作倾注培养(串珠镰孢菌用马铃薯培养基,烟曲菌用沙氏培养基),置37e生化培养箱中培养3d,观察结果,计算杀灭率。2结果经4次重复试验证明,以臭氧水浓度为4mg/L作用1min与3min,对串珠镰孢菌杀灭率分别为99.86%~100%;对烟曲菌作用5min,平均杀灭率为99.57%(表1)。臭氧水随臭氧含量增加、作用时间延长,对两种真菌杀灭作用有增强趋势。3讨论本试验结果表明,臭氧水杀菌效果与臭氧气体规律一致,臭氧杀菌效果研究报道较多,多数是关于空气消毒。臭氧浓度与杀菌效果密切相关,浓度增#230#ChineseJournalofDisinfection2004;21(3)大,对真菌的杀灭效果增大,这与多数研究结果相符12,3,42。表1臭氧水对两种临床真菌的杀灭效果臭氧含量不同作用时间(min)平均杀灭率(%)(mg/L)135串珠镰孢菌1.037.7041.1338.792.046.8145.7948.403.076.5187.3893.114.099.86100.00100.00烟曲菌1.032.2435.1842.322.052.7354.6468.083.090.4393.3597.074.099.3999.6599.57注:试验在室温下进行,试验重复3次。阳性对照菌数为800000~1000000cfu/ml。试验发现,臭氧浓度为4mg/L时作用3min可100%杀灭串珠镰孢菌;但对烟曲菌即使延长作用时间,对杀灭率影响也不大。说明臭氧浓度是制约杀菌效果的关键因素。从统计结果看臭氧浓度与作用时间两者无交互作用(P<0.05),这与有关文献报道不一致。欧阳川以枯草杆菌黑色变种芽孢为指示菌,以余臭氧的浓度来评定作用不同时间的消毒效果,得出达到99.99%杀灭率时作用时间愈长,消毒所需余臭氧浓度愈低152。本试验是将臭氧溶于循环的生理盐水中,循环水温高(28e?2e),所以臭氧水的半衰期为6min。...