淡竹叶清热作用药效植物基础研究作者：刘明，吴启南，宋秋烨，邬云霞【摘要】目的研究淡竹叶清热作用有效部位及化学成分，为淡竹叶的进一步开发利用和质量标准的制定提供科学依据。方法采用体外抑菌实验筛选淡竹叶有效抑菌部位，并采用HPLC-MS法分析抑菌部位的化学成分。结果淡竹叶甲醇提取部位具有抑菌作用，根据液质联用图谱及文献，分析鉴定出淡竹叶甲醇提取部位中6个化学成分，分别为香草酸、香豆酸、牡荆苷、苜蓿素7-β-D-葡萄糖氧基黄酮、芦竹素或其同分异构体白茅素及苜蓿素。结论淡竹叶甲醇提取部位具有一定的抗菌活性，对各菌种的抑菌效果有较大差异，这一部位可能与淡竹叶清热解毒功效相关。采用HPLC-MS法分析鉴定有效部位化学成分，保留了液相色谱与质谱兼具的微量、快速的优点,结合了前者的高分离效能与后者的准确性及选择性的特点,方法稳定可靠，为淡竹叶的进一步开发利用和质量标准的完善提供科学依据。【关键词】中药鉴定淡竹叶抑菌实验液质联用Abstract：ObjectiveToinvestigatetheeffectivepartandcomponentsofHeat-cleaninginHerbLophatheri,andtoprovidescientificaccordforfurtherdevelopmentandestablishmentofqualityspecificationofHerbLophatheri.MethodsScreeneffectiveantiblasticpartbybacteriostasisexperimentinvitro,andanalyzethechemicalcompositionswithHPLC-MSinthispart.ResultsThepartextractedwithMeOHwaseffectivebacteriostasis,6componentsweredetectedbyHPLC-MSatlasandrelativesinit.Theywerevanillicacid,coumaricacid,vitexin,Tricin7-β-D-glucosyloxy-flavone,arundoin,andTricin.ConclusionThepartextractedwithMeOHhasantibacterialactivity,andtheactivitiesaredifferenttodifferentbacterium,thispartmaybecorrelatedwithheat-cleaninganddetoxicatinginherbLophatheri.HPLC-MShasgoodqualityofbothHPLCandMS,itisstableandreliability,andcanprovidesciencicproifforfurtherdevelopmentandimprovementofqualityspecificationofherbLophatheri.Keywords：AuthenticationofChinesemedicines;Herblophatheri;Bacteriostasisexperiment;HPLC/MS/MS淡竹叶为禾本科植物淡竹叶LophatherumgracileBrongn.的干燥茎叶［1］。始载于《本草纲目》，1977年以来的历版《中国药典》均有收载，具有清热除烦、利尿的功效。用于热病烦渴，小便赤涩、淋痛，口舌生疮。淡竹叶为卫生部公布的药食两用中药之一，近年来多有制成保健凉茶［2］、淡竹叶酸奶［3］等。淡竹叶的有效成分物质基础研究一直较为薄弱，现有化学成分的研究显示淡竹叶主含黄酮、三萜类、多糖、酚性成分、氨基酸、有机酸及多种微量元素等［4～6］。依据现代医学理论，结合淡竹叶的中医临床功效，本实验对淡竹叶不同溶剂的提取部位进行了抑菌活性的研究，对淡竹叶清热有效物质基础进行初步筛选，并运用液质联用分析手段对所筛选的部位进行化学成分分析，为淡竹叶的进一步开发利用和质量标准的制定提供科学依据。1仪器与材料1.1仪器手提式压力蒸气灭菌器（上海华线医用核子仪器有限公司）；移液枪（北京金花移液器厂）；HPLC－MS/MS液质联用仪（Water’s公司，型号QuattroPrimer，产地：美国）。1.2菌株大肠杆菌CMCC(B)44103；金葡菌CMCC(B)26003；乙链菌CMCC（B）32210；绿脓菌CMCC(B)24430。1.3药物营养琼脂（国药集团化学试剂有限公司，批号F20040304）；肉汤培养基（国药集团化学试剂有限公司，批号20060310）；血琼脂基础（国药集团化学试剂有限公司，批号20060228）；葡萄糖肉汤（国药集团化学试剂有限公司，批号10010518）；香草酸对照品（中国药品生物制品检定所，批号110776－200402）。牡荆苷对照品（中国药品生物制品检定所，批号11876－200501）。淡竹叶采于江苏省宝华山，经南京中医药大学鉴定教研室吴启南教授鉴定为禾本科(Gramineae)植物淡竹叶LophatherumgracileBrongn.的干燥茎叶。2方法与结果2.1不同提取部位抑菌实验2.1.1提取部位制备淡竹叶置于多功能提取罐，60％乙醇回流提取5h，提取液减压回收溶剂得到淡竹叶总浸膏，总浸膏与硅藻土拌匀，分别加入石油醚、二...