HPLC法快速检测大豆籽粒中大豆低聚糖的含量

HPLC法快速检测大豆籽粒中大豆低聚糖的含量王晓岩1,郝再彬1,邱丽娟2*(1.桂林理工大学,桂林541002;2.中国农业科学院作物科学研究所,国家农作物基因资源与遗传改良重大科学工程/农业部作物种质资源利用重点开放实验室,北京100081)摘要:建立了高效液相色谱法同时快速测定大豆籽粒中大豆低聚糖的3种组分蔗糖、棉籽糖和水苏糖含量的检测方法。采用0.5量程示差折光检测器,4.6mm×250mm,5μm瑞典Kromasil-NH2原装进口柱,流速1.0mL/min,检测温度35℃,流动相乙腈∶水=60∶40,10μL进样量。在上述检测条件下,最低检出限蔗糖为0.06×10-6g、棉籽糖为0.07×10-6g、水苏糖为0.06×10-6g,标准曲线相关系数分别为0.9965、0.9996和0.9994,平均回收率分别为99.3%、94.7%和95.6%,RSD(n=10)分别为1.73%、2.01%和0.80%。该方法简单,快速,准确,可用于大豆籽粒中低聚糖含量的快速分析。关键词:低聚糖;大豆食品;高效液相色谱中图分类号:TS207文献标志码:A文章编号:1005-9989(2010)07-0287-04ThemethodforrapiddetectionofsoybeanoligosaccharidecontentbyHPLCWANGXiao-yan1,HAOZai-bin1,QIULi-juan2*(1.GuilinUniversityofTechnology,Guilin541002;2.TheNationalKeyFacilityforCropGeneResourcesandGeneticImprovement(NFCRI)/KeyLabofCropGermplasmUtilization(MOA),InstituteofCropScience,ChineseAcademyofAgriculturalSciences,Beijing100081)Abstract:Establishedahigh-performanceliquidchromatographymethodfordetectingthecontentofsucrose、raffinoseandstachyoseinsoybeangrains.Userefractive,indexdetectorwithrange0.5,Kromasil-NH2columnimportedfromSweden,anditsmodelis4.6mm×250mm5μm,thevelocityofflowis1mL/min,thedetectiontemperatureofcolumnis35℃,andtheacetonitrile:water=60∶40.Undertheconditionsoftheabove-mentionedtest,theminimumdetectionlimitofsourceis0.06×10-6g,theminimumdetectionlimitofraffinoseis0.07×10-6g,andstachyoseis0.06×10-6g.Thecorrelationcoefficientsofstandardcurveswere0.9965,0.9996and0.9994.Theaveragerecoverieswere99.3%,94.7%and95.6%.TheRSDofsampleswith10testsare1.73%,2.01%and0.80%.Themethodissimple,rapid,accurate,andcanbeusedintheoligosaccharidecontentinsoybeanquickanalysis.Keywords:oligosaccharides;soybeanfood;HPLC收稿日期:2009-10-19*通讯作者基金项目:国家“863”重点项目(2006AA100104,2006AA100110);国家“十一五”科技支撑计划课题(2006BAD13B05)。作者简介:王晓岩(1982—),安徽人,硕士研究生,研究方向为活性物质的开发与利用。·287·食品科技FOODSCIENCEANDTECHNOLOGY食品安全与检测2010年第35卷第7期大豆低聚糖(SBOS)是大豆中可溶性糖类的总称,主要由蔗糖、棉籽糖和水苏糖组成。3种糖组分在成熟大豆中的干基含量分别为5%、1%、4%,具有稳定性高、安全性好、甜度低、热值低和防龋齿等良好的功能特性,是一种功能性低聚糖[1-4]。其主要功能包括:促进双歧杆菌的增值;防止便秘和腹泻;保护肝脏功能;降低血压;增强免疫力;抗癌;延缓衰老;抑制病原菌的增长等作用[5-12]。随着经济的发展和生活的提高,我国居民的健康状况有了良好的改善,但由于饮食结构的不合理,如脂肪、糖类摄入量过多等,各种常见病的患病率增加,功能性糖的引入可部分代替或完全代替食品中的蔗糖,以适于特殊人群的需要[13-15]。目前,大豆低聚糖的测定方法有纸色谱法、薄层色谱法、气相色谱法和高效液相色谱法。检测大豆低聚糖的方法中较为准确的是气相色谱法和高效液相色谱法。其中气相色谱法需要将样品制备成易挥发且对热稳定的衍生物后才能进行测定,而液相色谱法可以直接对提取出的低聚糖进行检测,样品的处理比较简单,并且减少了样品糖分的损失[16],因此,本实验对高效液相色谱法检测大豆低聚糖进行了研究。以往的研究中,使得低聚糖的成分完全分离的保留时间大约在25min,分离较慢,不利于对批量种质的检测,为此,本文通过对检测条件的优化,建立了简单快速同时分析低聚糖中3种成分含...

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