327株下呼吸道感染病原菌的鉴定及耐药性分析江苏省连云港市东方医院检验科江苏连云港222042［摘要］目的：分析我院下呼吸道感染患者痰培养的主要病原菌分布及耐药情况，指导临床合理使用抗菌药物。方法：对我院2014年1月-2014年12月978例下呼吸道感染患者痰液标木进行培养鉴定及药敏分析。结果：从978份痰标木中检出病原菌327株,阳性率为33.44%。其中革兰阴性杆菌271株(82.87%),革兰阳性球菌56株(17.13%)。下呼吸道病原菌检出率最高的5种细菌分别为：肺炎克雷伯氏菌，铜绿假单胞菌，大肠坎希氏菌，鲍曼/溶血不动杆菌和金黄色葡萄球菌。结论：革兰阴性杆菌仍是下呼吸道感染的主要病原菌，由于耐药菌株不断增多，临床应重视病原菌检测及药敏试验，避免盲目大量用药和不合理用药而导致多重耐药菌株的产生。［关键词］下呼吸道感染；痰培养；病原菌鉴定；耐药性分析【】R459.7【文献标识码】A【】1001-5213(2016)08-0069-02呼吸道感染是一种常见的疾病,近年来随着抗菌药物的广泛应用，呼吸道感病原菌的种类也在不断发生变化，新的耐药菌株也相继增加。为掌握我院细菌耐药情况，以及最近一年我院下呼吸道病原菌的分布及耐药情况，为临床医生合理选用抗菌药物提供依据，我们对我院2014年1月1日至2014年12月31日送检的978份痰标木进行培养、鉴定和耐药分析。现报告如下：1.材料与方法1.1标木收集木院2014年1月1日至2014年12月31日疑似呼吸道感染的门诊及住院患者送检的合格痰标木978份,分离到病原菌327株，标木严格按要求留取。1.2标木采集嘱病人清晨用清水反复漱口后，用力自气管咳出第一口痰，于无菌密封容器内2h内送检，或用无菌技术取呼吸道分泌物送检。1.3细菌培养鉴定痰标木合格性检查：鱗状上皮细胞小于等于10个/LP,白细胞大于等于25个八P，镜检合格的痰标本经培养前处理后接种血琼脂平板、巧克力琼脂平板、麦康凯平板以及念珠菌显色平板上（血平板、巧克力平板、麦康凯平板以及念珠菌显色平板均购自郑州安图生物工程冇限公司）。置5%一10%CO235oC培养18—24小吋，观察菌落生长情况，选取不同单个菌落作涂片染色、镜检。细菌培养及鉴定均按《全国临床检验操作规程》进行［1】。1.4仪器与试剂MicroscanautoSCAN-4细菌鉴定分析仪，PC33、NC50细菌鉴定药敏板及配套试剂均购自美国德灵公司。1.5细菌鉴定及药敏试验可疑菌落分纯后进行革兰染色、触酶及氧化酶试验。触酶阳性的革兰阳性球菌接种PC33鉴定药敏板，革兰阴性杆菌接种NC50鉴定药敏板。35oC非C02培养箱中培养16-24小吋。滴加相应试剂后，放入AS—4细菌鉴定药敏分析仪判读结果。常用质控菌株为大肠埃希菌ATCC25922,铜绿假单胞菌ATCC27853，金黄色葡萄球菌ATCC25923,均购自卫生部药品鉴定所。1.6统计学方法采用冋顾性调查，分别统计各病原菌的构成比，并用世界卫生组织细菌耐药性监测中心推荐的WHONET5.5软件进行革兰阴性杆菌及革兰阳性球菌对常用抗生素的耐药率数据处理和分析。2.结果2.1从978份痰标本中检出病原菌327株，阳性率为33.44%，与国内相关报道相符［2】，其中革兰阴性杆菌271株（82.87%），革兰阳性球菌56株（17.13%）。下呼吸道病原菌检出率最高的5种细菌分别为：肺炎克雷扪氏菌,铜绿假单胞菌，大肠埃希氏菌，鲍曼/溶血不动杆菌和金黄色葡萄球菌，具体比率见表1。3.讨论近几年，随着抗生素的不断研发和大量广泛的应用，随之而来的耐药菌株也逐年增多。以上对我院下呼吸道感染患者痰培养的培养、鉴定和分析结果表明，革兰氏阴性杆菌仍是下呼吸道感染的主要病原菌，与文献报道的78.5%相接近［3】，而革兰阳性球菌仅占17.13%,低于国内报道的21.92%［4］，可能与我院对抗菌药物的慎用和使用的抗菌药物种类不同，故病原菌的构成比不同。我院下呼吸道感染以革兰阴性杆菌为主要致病菌，分离的271株革兰阴性杆菌中病原菌检出率最高细菌为肺炎克雷怕氏菌(24.46%),其次是铜绿假单胞菌(19.57%)，大肠埃希氏菌(10.7%)，革兰阳性球菌检出率最高的为金黄色葡萄球菌(7.34%)。以上分析结果表明肺炎克雷伯氏菌、铜绿假单胞菌、人肠埃希氏菌等条件致病菌己成为下呼吸道感染的重要病原菌，与文献报道相一致［5】。肺炎克雷怕氏菌及大肠埃...