本文档下载自文库下载网，内容可能不完整，您可以点击以下网址继续阅读或下载：wwwenkuxiazai/doc/23b52c367cd184254b3535df胶体金免疫层析法快速检测食品中金霉素残留瘦肉精检测※分析检测食品科学2010,Vol.31,No.02191胶体金免疫层析法快速检测食品中金霉素残留付云洁，刘志国*，武玉香(武汉工业学院生物与制药工程学院，湖北武汉430023)摘要：研究食品中金霉素残留的胶体金免疫层析法的快速检测方法。采用戊二醛交联法制备金霉素-BSA免疫抗原，按照常规的免疫程序免疫新西兰大白兔制备抗金霉素多克隆抗体。纯化后的抗体用ELISA法检测其特异性和效价。采用柠檬酸三钠还原法制备颗粒大小为15nm的胶体金，并制备抗体-胶体金复合物，以组装检测试纸。通过可见的颜色深浅，检测样品中金霉素的残留量。结果表明：试纸条法的金霉素检测限为0.7μg/mL，在四环素质量浓度大于1.0μg/mL时，与金霉素存在交叉反应性，其结果与高效液相色谱法测定的结果一致。本方法检测时间仅需5min，适用于食品中金霉素残留的快速检测。关键词：金霉素；多克隆抗体；酶联免疫吸附测定；胶体金；免疫层析试纸条DevelopmentofAOne-stepImmunochromatographicStripTestforRapidDetectionofChlortetracyclineResidueinFoodFUYun-激e，LIUZhi-guo*，WUYu-xiang(SchoolofBiologyandPharmaceuticalEngineering,WuhanPolytechnicUniversity,Wuhan430023,China)Abstract：Animmunochromatographicstriptestwasdevelopedtodetectchlortetracyclineresidueinfoodusingimmunecolloidalgoldtechnique.Chlortetracyclineimmuno-antigen(CTC-BSA)waspreparedbyconjugatinwwwenkuxiazai/doc/23b52c367cd184254b3535dfgchlortetracyclinetobovineserumalbuminviaglutaraldehyde,andinjectedintorabbitstoprepareanti-CTCpolyclonalantibody.Theresultedanti-CTCantibodywaspurified,anditstiterandspecificitywasdeterminedbyindirectenzyme-linkedimmunosorbentassay(ELISA).Subsequently,colloidalgoldps15nminsizewerepreparedbythemethodoftrisodiumcitratereduction.Thepurifiedanti-CTCantibodywasfinallyconjugatedtocolloidalgoldpsservedasadetectionreagenttopacktheimmunochromatographic(IC)strip.ApositivereactiongaveavisualcolortoassesstheresiduelevelofCTC.ResultssuggestedthatthelimitofquantificationofCTCwas0.7μg/mL.Cross-reactivitycouldnotbeobservedtilltheconcentrationoftetracyclinewashigherthan1μg/mL.ChlortetracyclinecontentobtainedwiththeICstripsprovidedapositivecorrelationwiththatobtainedbyHPLCmethod.Usingthismethod,theanwwwenkuxiazai/doc/23b52c367cd184254b3535dfalysisofCTCinfoodcouldbecompletedwithinlessthan5min.Keywords：chlortetracycline；polyclonalantibody；ELISA；colloidalgold；immunochromatographic(IC)strip：R927.2；R446.61文献标识码：A：1002-6630(2010)02-0191-04金霉素(chlortetracycline，CTC)属于四环素类，是由链霉菌产生的一类广谱抗生素。近年来被广泛用于畜禽生产中，然而其在食品中的过量残留对食品安全造成严重威胁。金霉素的毒性主要表现为对胃、肠、肝脏的损害及牙齿的染色等。此外，还会造成过敏反应、二重感染、致畸胎等作用[1]。抗生素残留检测方法主要有微生物法[2]、高效液相色谱法[3]、薄层色谱法、毛细管电泳法等，但这些方法对待测样品的前处理要求高，检测设备昂贵等缺陷。而以抗原与抗体的特异性反应结合为基础的免疫学方法具有快速、灵敏、特异性高等特点，是残留检测的有效方法[4-6]。而目前尚未见金霉素的免疫学学快检方法。因此，本实验通过制备金霉素多克隆抗体，建立以胶体金免疫层析技术[7-8]为基础的食品中金霉素残留快速检测方法，该方法的建立为食品中其他药物残留的快速检测提供有利的技术支持。11.1材料与方法材料、试剂与仪器新西兰白兔(体质量2kg)购于华中科技大学同济医学院动物实验室。收稿日期：2009-03-16作者简介：付云洁(1984—)，女，硕士研究生，研究方向为微生物与生化药学。E-mail：fuyun激e198...