蛹虫草菌株发酵液及菌丝提取物抑菌活性探析摘要：研究蛹虫草(Cordycepsmilitsris)的发酵液和菌丝提取物的抑菌效果，为蛹虫草抑菌活性物质的开发利用提供基础资料。采用滤纸柱、海绵柱和花泥柱3种方法检测其抑菌效果，结果表明蛹虫草发酵液及菌丝提取物对大肠杆菌(Escherichiaco1i)和金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)均有一定抑制作用，其中菌丝提取物抑菌作用较强；对大肠杆菌的抑制强于对金黄色葡萄球菌的抑制。抑菌效果检测方法以滤纸柱法检测效果较好，花泥柱法次之，海绵柱法较差。关键词：蛹虫草；抑菌；检测方法；发酵液；菌丝提取物中图分类号：S567・35；Q939・96文献标识码：A文章编号：0439-8114(2012)16-3492-04StudiesonAntibacterialActivitiesofFermentationBrothandMyceliaExtractionofCordycepsmilitarisHANYan-fengl,ZHANGYan-Wei2,DONGXuan1,HUANGYu1,LIANGZong—qi1(1.InstituteofFungusResources,CollegeofLifeScience,GuizhouUniversity,Guiyang550025,China；2.AcademyofChemistryandLifeScience,GuizhouNorma1College,Guiyang550018,China)Abstract：Fermentationbrothandmyce1iaextractionofCordycepsmi1itarisindifferentfermentativedayswereexploredfortheirantibacteria1activities・Forthethreemethodstotesttheantibacterialeffect,theresu1tsshowedthatfilterpapermethodwasthebest,foliowedbyflowermudcolumn,theworstwasspongecolumn・Theinhibitioneffectofmyce1iaextractiononbothbacteriawasstrongerthanthatoffermentationbroth；andtheinhibitioneffectofbothmaterialsonEscherichiaco1iwasstrongerthanthatonStaphy1ococcusaureus・Keywords：Cordycepsmi1itaris；antibacterial；testmethod；fermentationbroth；myce1iaextraction蛹虫草又名北冬虫夏草，是我国名贵中药材冬虫夏草的代用品，含有多种生物活性物质［1,2］o蛹虫草为虫、菌结合体，其真菌也常被称为蛹虫草(Cordycepsmi1itaris)o研究发现，蛹虫草的子实体、菌丝体和发酵液中均有多种活性成分，能抑制部分细菌和真菌，对人体具有一定的保健功效，具有潜在应用前景】3-5］o一些关于蛹虫草的研究认为，蛹虫草的抗菌成分可能是虫草素［6,7］、多糖［8］、多肽［9］、酶类［10］或酚类［11］,具有抑菌作用可能是单一成分导致也有可能是多组分协同作用。刘阳等［12］报道发酵液的抑菌效果是单一活性成分抑菌效果的2倍，表明蛹虫草中多种活性成分共同作用的抑菌效果好于单一活性成分的抑菌效果。但针对某一种微生物而言，其主要抑菌活性物质应该是一类或一种物质。试验采用3种检测材料对蛹虫草菌丝提取物和发酵液进行抑菌效果检测比较，和常用的抑菌效果检测采用的滤纸片法和牛津杯法有所不同。同时比较不同发酵天数的蛹虫草发酵液和菌丝提取物的抑菌效果，以期为蛹虫草抑菌活性物质的开发利用提供基础资料。1材料与方法1.1供试菌株蛹虫草GZUIFR-ZH菌株、大肠杆菌(Escherichiacoli)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)为贵州大学真菌资源研究所微生物实验室保存。1.2培养基PDA固体培养基：马铃薯200g去皮切块，煮沸30min后6层纱布过滤，加入葡萄糖、琼脂各20g,水1000mLo121°C灭菌30min。蛹虫草液体发酵培养基：马铃薯200g去皮切块，煮沸30min后6层纱布过滤，加入葡萄糖20g,水1000mL,分装至250mL三角瓶中，每瓶装液100mLo121°C灭菌30min。牛肉膏蛋白脓固体培养基：牛肉膏3g,蛋白豚10g,NaC15g,琼脂20g，*l000mL，pH7.0〜7.2o121°C灭菌30mino细菌培养液：牛肉膏3「蛋白Mlog,NaC15g,水1000mL,pH7.0〜7.2o121°C灭菌30mino1.3试验方法1.3.1母液培养与发酵蛹虫草菌种活化后，从PDA斜面试管中挑取适当大小的菌块，接种至液体发酵培养基中，170r/min25工摇床培养，待母液鞄子数达到106个/mL时用移液枪吸取母液转接至新的液体发酵培养基中，接种量每瓶1mL,170r/min25匸摇床培养，液体发酵培养周期为10do
