胆囊癌中骨桥蛋白及MMP-9表达及其意义［摘要］目的了解胆囊癌组织中骨桥蛋白和MMP-9的表达及其意义。方法选择正常的胆囊组织10例、胆囊腺瘤组织10例和胆曩癌组织40例，运用免疫组织化学方法，检测OPN和MMP-9的表达水平，对0PN和MMP-9表达的相关性进行分析研究。结果胆囊癌组织中OPN和MMP-9的表达水平明显高于胆囊组织和胆囊腺瘤组织(PV0.05),其中在有转移的胆囊癌组织中0PN的表达水平明显高于没有转移的胆囊癌组织(PV0.05)。胆囊癌组织中OPN和MMP-9的表达具有一致性(P<0.05)。结论0PN与MMP-9的表达情况与胆囊癌浸润、转移发生有密切的关系，本实验结果证实MMP-9和OPN均阳性表达时对胆囊癌转移及预后有重要的预测价值。［关键词］胆囊癌；肿瘤转移；骨桥蛋白；MMP-9；免疫组化［］R735.8［文献标识码］B［］1673-9701(2011)31-61-02ExpressionofOsteopontin(OPN)andMMP-9inGallbladderCancerandItsClinicalSignificanceXUGuixianglWANGZhenxulXUZhun2HU激ng激nlWANGLinlTAOKetaolHESongxionglZHANGGuixinlANXin3XUEBingchuan31.DepartmentofGeneralSurgery,QingdaoFuwaiCardiovadcularHospital，Qingdao266034,China；2.QingdaoForeignLanguageCollege,Qingdao266000,China；3.DepartmentofGeneralSurgery，theThirdAffiliatedHospitalofShanxiMedicalUniversity，Taiyuan030053，China[Abstract]ObjectiveToexploreexpressionofosteopontinandMMP-9ingallbladdercanceranditsclinicalsignificance・MethodsTheexpressionofosteopontinandMMP-9wasdetectedbyimmunohistochemicalmethodin40casesofgallbladdercancer,10casesofnormalgallbladderand10casesofgallbladderadenoma・TherelationshipbetweentheexpressionofosteopontinandMMP-9wasanalyzed・ResultsThepositiveexpressionratesofosteopontinandMMP-9ingallbladdercancertissuesweresignificantlyhigherthanthatinnormalgallbladdertissuesandgallbladderadenomatissues(P<0.05)・ThepositiveexpressionratesofosteopontininpatientsofNEVINIV,VstageswerehigherthanthatinpatientsofNEVINI,II,IIIstages)(P<0.05).Theexpressionofosteopontinwaspositivelycorrelatedwiththe囊良、恶性病变中的表达,旨在探讨两者在胆囊癌(GBC)expressionofMMP-9(P<0.05)・ConclusionBothosteopontinandMMP~9aresignifiesntlyrelatedtothemetastasisofgallbladdercancer,andoverexpressionofbothosteopontinandMMP-9hasapredictivevalueformetastasisandrecurrence・[Keywords]Gallbladdercancer；Tumormetastasis；Osteopontin；MMP—9；Immunohistochemistry笔者采用免疫组织化学方法，检测骨桥蛋白(osteopontin,0PN)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在胆的表达情况及其临床意义。1资料与方法1.1一般资料收集青岛阜外心血管病医院和山西医科大学第三医院2000年1月〜2010年7月的40例胆囊癌标本，均由医院病理科医师从病理学角度予以证实，并且常规按照NEVIN分期方法，将40例胆囊癌标本分档为：I期5例、II期2例、III期10例、IV期10例，V期13例。研究所选的胆囊癌标本均于癌灶中央位置进行常规取材，后用0.5%甲醛固定，常规石蜡包埋。随机选取2000年1月〜2010年7月正常的胆囊组织和胆囊腺瘤各10例作为对照组。纳入研究对象的患者术前均未进行抗肿瘤和抗炎治疗。1.2方法和试剂OPN、MMP-9的检测全部采用免疫组化S-P（链霉素抗生物素蛋白-过氧化物酶）法。选用购自美国Chemicon公司的抗0PN兔抗人多克隆抗体，即用型鼠抗人MMP-9单克隆抗体、超敏SP（鼠）免疫组化试剂盒及DAB显色试剂盒购自福州迈新公司。操作步骤：将包埋石蜡的胆囊组织切成厚度为5uni的片一常规脱蜡至水一Tris缓冲液洗3次，每次为5min->3%H202浸泡lOminfTris缓冲液缓慢洗3次，每次为5minf在浓度为10mmol/L的枸椽酸（pH6.0）液中煮沸5min共2次一Tris缓冲液洗3次，每次为5minf10%正常羊血清封闭f滴加1抗（即兔抗人OPN蛋白抗体、鼠抗人MMP-9单克隆抗体），恒温箱内37£放置lh-Tris缓冲液洗共3次每次为5minf用Supervision为二抗，37°C下结合30minfTris缓冲液洗3次，每次5min~^DAB室温下...