依达拉奉对幼鼠惊厥持续状态后海马XBP1mRNA和caspase12表达及神经元凋亡的影响作者：邓小龙，王海萍，焦颖，林忠东，李光乾【摘要】目的:探讨依达拉奉对幼鼠惊厥持续状态（statusconvulsion，SC）后海马内质网应激（endoplasmicreticulumstress，ERS）关键标志分子X盒结合蛋白1（X-boxbindingprotein1，XBP1）mRNA、caspase-12的表达及神经元凋亡的影响。方法：将19～21日龄SD大鼠随机分入惊厥持续状态（SC）组、依达拉奉（ED）组、生理盐水对照（NS）组；各组再按不同时间点分五个亚组。应用氯化锂-匹鲁卡品建立大鼠SC模型，用半定量逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）动态观察SC后海马XBP1、caspase-12mRNA的表达情况。用免疫组织化学方法观察海马caspase-12蛋白表达情况。用TUNEL法观察神经元凋亡细胞数。结果：幼年大鼠海马中XBP1和caspase-12在SC组表达显著增强，与NS组比较差异有显著性（P《0.01）；与SC组比较，ED组XBP1mRNA表达显著升高（P《0.01或P《0.05），caspase-12mRNA及蛋白表达显著降低（P《0.01或P《0.05）；SC组在惊厥12h后的各时间点海马CA1区TUNEL阳性细胞数均显著高于NS组（P《0.01），而ED组TUNEL阳性细胞数均较SC组显著下降（P《0.01或P《0.05）。结论：依达拉奉有可能通过上调XBP1的表达与下调caspase-12的表达，并使神经元凋亡数目减少，从而发挥对神经元的保护作用。【关键词】依达拉奉；惊厥持续状态；XBP1；caspase-12；神经元；凋亡Abstract:Objective:ToinvestigatetheexpressionofthekeymarkerofERSX-boxbindingprotein1（XBP1）mRNA，Caspase-12andneuronapoptosisintherathippocampusafterstatusconvulsion（SC），andtheeffectstowhichwhentreatedwithEdaravone.Methods：120MaleSprague-Dawley（SD）ratsaged25～30dayswererandomlyenrolledintotheNScontrolgroup（NS，n=40），statusconvulsiongroup（SC，n=40）andEdaravonegroup（ED，n=40）.Eachgroupweredividedintofivesub-groupatfivedifferenttimepoints.TheSCanimalmodelwasestablisheclusinglithium-pilocarpine.TheexpressionlevelsofXBP1andcaspase-12mRNAinthehippocampusweredynamicallydetetcedbysemiquantitativereversetranscriptionpolymerasechainreaction（RT-PCR）.Caspase-12proteinwasdetectwithimmunohistochemistrymethod.TheneuronapoptosiswasobservedwithTdT-mediateddUTPnickendlabeling（TUNEL）.Results:TheexpressionofXBP1andcaspase-12increasedmarkedlyinSCgroup.ThedifferencewasstatisticalwsignificancecomparedwithNScontrolgroup（P《0.01）.TheexpressionofXBP1mRNAinEDgroupwere---本文于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除---notablyhigerthanthatofSCgroup（P《0.01orP《0.05）.Theexpressionofcaspase-12mRNAandproteinsignificantlydecreased（P《0.01，orP《0.05）comparedtotheSCgroup.TheTUNELpositivecellsinhippocampusCA1ofSCgroupweremorethanthatofNSgroup12haftertheSC（P《0.01）.Aftertheinterventionofedaravone，TUNELpositivecellsshowedasignificantdropinSCgroup（P《0.01orP《0.05），butstillsignificantlyhigherthanthatoftheNSgroup（P《0.01，orP《0.05）.Conclusion:EdaravonemayserveasaneffectiveagentforcuringthebraindamageafterSCinvivo；themechanismofprotectingtheneuronmayincludeupregulatingtheexpressionofXBP1，downregulatingtheexpressionofcaspase-12andreducingthenumberofapoptoticneurons.Keywords:Edaravone；statusepilepticus；XBP1；caspase-12；neuron；apoptosis内质网（endoplasmicreticulum，ER）作为细胞内蛋白质合成、修饰、转运以及细胞内Ca2＋浓度稳态调节器官，对内环境的改变比较敏感。缺血低氧、氧化应激等均可导致ER腔Ca2＋稳态的改变以及大量未折叠和错折叠蛋白的堆积，从而引起内质网应激（endoplasmicreticulumstress，ERS）[1-3]。已有研究发现，惊厥持续状态（statusconvulsion，SC）后，大鼠海马中ERS凋亡相关因子Caspase-12表达上调[4-5]。而X...