D■氨基葡糖盐酸盐体内外抗肿瘤作用实验摘要：目的研究D■氨基葡糖盐酸盐(GAH)的抗肿瘤作用。方法用SRB法观察GAH的体外抗肿瘤作用，通过GAH对S180,H22荷瘤小鼠瘤重和生存时间的影响，观察GAH的体内抗肿瘤作用。结果GAH可明显抑制S180小鼠瘤体的生长，明显延长H22荷瘤小鼠的生存时间；对3种人癌细胞(HepG-2,LS-174,BGC-7901)具有一定的杀伤作用，以对HepG-2细胞的抑制作用较为明显。结论GAH于实验条件下在体内外均有一定的抗肿瘤作用。关键词：D■氨基葡糖盐酸盐；抗肿瘤作用：R979.1文献标识码：A：1672-979X(2007)02-0008-03StudyonAntitumorEffectofD-GlucosamineHydrochlorideinVitroandinVivoXUHai-激ao1,CAOXiu-mingK2,激Yu-bin1,LIHui1(1.CenterofResearchandDevelopmentonLifeSciencesandEnvironmentalSciences,HarbinUniversityofCommerce,Harbin150076,China;2.SchoolofLifeSciences,OceanUniversityofChina,Qingdao266003,China)---本文来源于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除---D■氨基葡糖盐酸盐又称葡糖胺盐酸盐D-glucosamine昆明种小鼠（黑龙江省肿瘤防治研究所提供，体重anAbstract:ObjectiveTostudytheantitumoractivityofD-glucosaminehydrochloride(GAH).MethodsTheantitumoractivityinvitrowasobservedbySRB,andtheeffectinvivowasstudiedbyobservingtumorweightandsurvivaltimeofS180andH22mice.ResultsGAHwasapowerfulantitumoragentin3kindsofhumancancercelllines(HepG-2.LS-174.BGC-7901),especiallyHepG-2.GAHalsoinhibitedthegrowthofcancercellsofS180miceandproIongedthesurvivaltimeofH22mice・ConclusionGAHhasarelativehighpotentantitumoreffectbothinvitroandinvivo.Keywords:D-glucosaminehydrochloride;antitumoractivityhydrochloride,GAH）化学名2■氨基2脱氧・D■葡糖盐酸盐，其结构为D■葡糖分子中C2■軽基被氨基取代，因氨基显碱性,与盐酸成盐［1,2］。目前，GAH抑制癌细胞及肿瘤细胞生长等作用的研究日益受到重视。本研究围绕GAH的体内、外抗肿瘤作用展开，以冀为本品的深入研究及应用提供实验基1材料1.1肿瘤细胞系和瘤株人肝癌细胞（HepG・2X肠癌细胞（LS/74\胃癌细胞（BGC-7901X小鼠肉瘤（S180＞小鼠肝癌（H22）（哈尔滨医科大学肿瘤防治所提供b1.2动物---本文来源于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除------本文来源于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除---20±2.0g,雄性。合格证号：黑动字P001010141.3主要试剂与仪器GAH（中国海洋大学刘万顺教授惠赠）；小牛血清、RPMI-1640培养液（Gibco）;SRB（Sigma）;5■氟尿吨味（5-FU,上海海普制药厂）；环磷酰胺（CTX,江苏恒瑞医药股份有限公司）；LNA-III型二氧化碳培养箱（日本）;EL311型酶标仪（美国BIO-TEK公司卜2方法2.1体外抗肿瘤作用SRB法检测GAH体外细胞毒。SRB法为一种细胞毒实验，以检测培养细胞的蛋白质来确定细胞生长和存活情况。本实验通过SRB法检测GAH体外对HEPG-2,BGC-7901,LS-174细胞的抑制作用［3］。实验所用细胞于含5%C02的379培养箱中培养传代,用含10%胎牛血清及100U/mL青霉素、100pg/mL链霉素的RMPI1640培养液培养用0.25%胰酶消化传代，每3〜4d换培养基1次，待细胞长满及时传代。将对数生长期的细胞经0.25%胰酶消化分散后计数制成细胞悬液，细胞浓度调至1x104个/mL,接种于96孔板,100pL/孔。培养箱中培养24h后，每孔加入GAH100pL（终浓度分别为0.05,0.1,0.2,0.4mg/mL）:同时设空白对照孔（每孔加RPMI-1640培养液100pL）;阳性对照组（每孔加5-FU100|jL,终浓度为0.2mg/mLb每个剂量设6个---本文来源于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除---平行孔，继续培养。48h后取出培养板，每孔加50pL预冷的50%的TCA固定细胞（TCA终浓度10%）,静置5min,用去离子水洗4~5次，空气干燥。每孔加0.4%SRB溶液100pL,室温放置30min,弃去液体，用1%醋酸轻洗4~5次，甩干。加10mmol/L非缓冲三轻甲基胺基甲烷碱液（Tris）200pL,稳定10min后用酶标仪检测各孔吸光度A值（570nm）[4]o抑瘤率=（1-...