miR-224在乳腺癌中的表达及其临床意义温州医学院附属三院肿瘤外科浙江省瑞安325200【摘要】目的探讨miR-224在乳腺癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系。方法用荧光定量PCR技术检测55例乳腺癌患者的癌组织及其癌旁的正常乳腺组织中miR-224的表达情况。结果miR-224在乳腺癌组织中的相对表达量为0.321±0.324,在配对的正常乳腺组织的相对表达量为0.227±0.370,两者的差异具有统计学意义(t=2.182,P=0.033<0.05),miR-224在乳腺癌中组织的表达与乳腺患者的肿块大小、淋巴结转移、病理分期有关(P均<0.05),而与患者年龄、分化程度无关(P均>0.05)。结论miR-224在乳腺癌中的表达升高，升高的miR-224提示乳腺癌患者的不良预后。【关键词】乳腺癌；miR-224；临床病理特征；预后ExpressionandclinicalsignificanceofmiR-224andinhumanbreastcancer.XUEDi-xin,CHENJi-xian,LINDao-zhe,YUming,WUWei-li,LIANGMei-zhen,HEXin-wei,UNXiao,CHENHa-ha.DepartmentofSurgicalOncology,TheThirdAffiliatedHospital,WenzhouMedicalCollege,Ruian325200，China.correspondingauthor：CHENJi-xian,E-mail:xue-di-xin@163.com[Abstract]ObjectiveToexploretheexpressionofmiR-224andtheircorrelationwithClinicopathologicalcharacteristicsinbreastcancer.MethodsExpressionofmiR-224wasdetectedbyreal-timequantitativePCRin55casesofbreastcancerandtheircorrespondingadjacentnormaltissue.ResultsTherelativeexpressionlevelofmiR-224was0.321±0.324inbreastcancer,and0.227±0.370inmatchednormaltissue，significantdifferenceswereobservedbetweenthem(t=2.182，P=0.033<0.05).lnbreastcarcinoma,therelativeexpressionlevelofmiR-224wasassociatewithsize,lymphnodemetastasis,pathologicalstage(P<0.05)，nosignific---本文来源于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除---antdifferenceswereobservedregardingage,thedegreeofdifferentiation.(P>0.05).ConclusionTheexpressionlevelofmiR-224waselevatedinbreastcancer,andoverexpressionofmiR-224indicatepoorprognostic.【Keywords】breastcancer；miR-224;Clinicopathologicalcharacteristics；prognostic.【中图分类号】R737.9【文献标识码】A【文章编号】2096-0867(2015)-09-012-02MicroRNA(miRNA)是一种小分子非编码RNA,近些年来，研究表明在乳腺癌组织中miroRNA出现异常表达，如miR-125b、miR-21、miR-191[1],并且异常表达的micoRNA与乳腺癌细胞的增值、侵袭、转移相关[2-3],而miR-224在乳腺癌患者的研究甚少，本实验研究miR-224在乳腺癌中的表达及其与临床特征的关系。资料与方法壱.一般资料收集温州医学院附属三院肿瘤外科2015年2月至2015年8月手术切除的55例术前未进行放化疗的乳腺癌患者的癌组织及其癌旁的正常粘膜组织,组织标本用液氮速冻后，保存于-80˚C冰箱中用于RNA的提取，55例乳腺癌患者均为女性，年龄31—68岁，患者均接受乳腺癌改良根治术，临床病理特征如下：年龄≤50岁为18例，年龄>50岁为37例；中低分化25例，高分化30例；T1为12例，T2+T3为43例；无淋巴结转移为22例，有淋巴结转移为33例；病理分期I、II、III期分别为7、29、19例。弐.实验方法1.microRNA提取：miRCURY™RNAIsolationKit(Takara公司)用于microRNA的提取，操作详见说明书。2.逆转录反应：用茎环引物进行miR-224的逆转录反应，反应条件如下:1---本文来源于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除---6˚C30min,42˚C30min,75˚C15min,4˚C保存。3.SYBRGreenI荧光定量PCR：采用SYBR®PremixExTaqll(TaKaRa)进行PCR,反应条件如下：预变性95˚C30s,95˚C5s,60˚C34s,共40个循环，以U6为内参，所有实验重复3次。4.RT-PCR的引物序列：miR-224茎环引物5*-CTCAACTGGTGTCGTGGAGTCGGCAATTCAGTTGAGAACGGAAC-3',miR-224上游引物5'-ACACTCCAGCTGGGCAAGTCACTAGTGGTTCCGTT-3',miR-224下游引物5'-TGGTGTCGTGGAGTCG-3’，U6的上游弓|物5I-CTCGCTTCGGC...
