大白菜EMS诱变结合小抱子培养获得突变体代双艳，王彦华，轩淑欣，卢银，赵建军，申书兴(河北农业大学园艺学院，河北保定071000)摘要：本试验以5个不同基因型大白菜为试验材料，研究了不同浓度EMS浸泡花蕾不同时间对小他子发育以及产胚率和成苗率的影响。结果表明，EMS浓度高于0.1%的处理均会导致小他子致死。EMS浓度为0.03-0.1%,处理时间5-10min时，小砲子的产胚率和成苗率较高，比较适合花蕾诱变后进行小施子培养。通过对小絶了植株生殖生长时期性状调查，筛选出了在花色、叶形、对霜霉病抗性增强的突变株。木研究证明利用EMS诱变大白菜花蕾快速获得再生植株是可行的，从而为快速创建大门菜新种质奠定了基础。关键词：大白菜；EMS：诱变；小殖子培养中图分类号：S634.1ChinesecabbageEMSmutageniccombiningmicrosporeculturegettingmutantsDAIShuangyan,WANGYanhua,XUANShuxin,LUYin,ZHAOJianjun,SHENShuxing(CollegeofHorticulture,AgriculturalUniversityofHebei,HcBciBaoDing071000)Abstract:Inthisstudy,fivedifferentgenotypesofChinesecabbagewereusedforresearchinginfluencesonmicrosporedevelopment,productionrateofembryoandseedlingratebysoakingbudsusingethylmethanesulphonate(EMS)withdifferentdosesanddifferentduration.Theresultsindicatedthatmicrosporeswoundbelethalwhenthedosewashigherthan0」％^theproductionrateofembryoandseedlingwerehighwhenbudsweretreatedwith0.03〜0」％ofEMSfor5-10minanditissuitabletormicrosporecultureafterEMSmutagenicbuds・Thereproductivegrowthofhomozygousplantswereinvestigated,andmutantsofflowercolor,leafshape,andtheresistantmutantsofdownymildewwereobtained・TheresultssuggestedthatitisfeasibletoobtainregenerationplantletsbyEMSinducedmutationinChinesecabbage,andprovidedabasisforcreatingthenewgermplasmofChinesecabbagerapidly.Keywords:Chinesecabbage;EMS;Mutation;Microsporeculture0引言人工诱变是种质创新中较常用的手段和方法，甲基磺酸乙酯(EMS)是诱变育种中应用最广泛的诱变剂【7，与其他诱变剂相比，EMS诱变产生的点突变频率高，且多为显性突变，染色体畸变相对较少，可以对作物的某一种特殊性状进行改良，较多的用于作物种质资源创新和Tilling技术平台的构建。前人研究多以种子或游离小抱子作为EMS直接作用对象，如Prcm等⑶利用EMS诱变油菜种子并对后代进行小抱子培养，获得了矮化突变体和低芥酸突变体。Ferrie等⑷、Liu等⑸分别利用EMS诱变油菜的小砲子获得了有益的变异株。Liu等⑹通过EMS诱变单倍体愈伤纽织筛选出对菌核病抗性增强的甘蓝型油菜。大白菜(Brassciacampestrisssp.pekinensisL.)属-1•字花科芸蔓属蔬菜作物，是我国的巫要蔬菜。在我国冬季的蔬菜供应中居重要地位。近年来，大白菜育种材料单一已成为育种基金项H：-十二五"农村领域国家科技计划课题(2012AA100202),高等学校博士学科点专项科研基金(20101302110001),教育部重点项目(209014)作者简介：代双艳，(1985・)，女，硕士研究生，蔬菜生物技术研究。通信联系人：中书兴.(1964-),男，教授•蔬菜生物技术研究。E-mail:shcnsx@hcbau.cdu.cn取得突破性进展的瓶颈，而人丁诱变技术是实现种质创新的最宜接和冇效的方法z—。目前，在大门菜上未见利用EMS进行诱变的相关报道。本试验以不同大门菜基因型的花蕾为EMS作用对象，对EMS不同浓度和时间处理后小抱子培养的胚状体诱导和分化成苗情况进行了研究，旨在筛选EMS诱变花蕾适宜的处理浓度和时间，为该技术在芸簾属作物品种改良和遗传研究上的应用提供参考。1材料与方法1.1试验材料选用5个大白菜自交系为试验材料,编号分别为485-1\T22、‘12・7‘、4A035和219，,山河北农业大学蔬菜育种课题组提供。田间试验在河北农业大学科研农场进行，于2012年1月份温室育苗，经低温春化后，3月底定植出间，常规管理。1.2试验方法1.2.1EMS处理盛花期，从供体植株上取小砲子处于单核中期至双核期的花蕾，35个为一组，在超净工作台上浸入EMS溶液中进行诱变处理。依据木实验室已冇研究的初...