专题1基因工程1．基因工程又叫做或。就是按照人们的愿望，把一种生物的某种基因提取出来，加以，然后放到另一种生物的细胞里，改造生物的。2．基因工程是在上进行的设计施工，基本工具是：基因的剪刀(分子手术刀)——；基因的针线(分子缝合针)——；基因的(分子运输车)——。3．限制酶(又称)：主要从中分离纯化出来；能够识别双链DNA分子的某种，并且使每一条链中的两个核苷酸之间的断开，因此具有。DNA分子经限制酶切割产生的DNA片段末端有和两种形式。例如，EcoRⅠ限制酶识别的序列是，在之间切割；SmaⅠ限制酶识别的序列是，在之间切割。4．DNA连接酶的作用是将拼接(即形成，注意不是黏合或形成氢键)成新的DNA分子(注意DNA聚合酶只能在有的条件下将加到DNA片段的，形成磷酸二酯E·coliDNA连接酶来源于，只能将双链DNA片段之间连接起来；而T键)；DNA连接酶4能缝合，但连接平末端的之间的效率。5.最常用的载体是，它是一种、结构简单、独立于细菌之外，并的很小的。6．真正被用作载体的质粒都是在天然质粒的基础上进行过的，其上有一个至多个，供外源DNA片段(基因)插入其中；还有特殊的，供。7．重组质粒进入受体细胞后，在细胞中进行自我复制(具有)，或上，随染色体DNA进行同步复制；在基因工程中使用的载体除质粒外，还、等。8．基因工程的基本操作流程：→→→。9．目的基因主要是指，也可以是一些；目的基因可以从自然界中已有的物种中分离出来(，建立从中获取或通过获取，一般只适合于，真核基因因为含有不适合该类方法)，也可以用人工的方法合成(，通过mRNA反转录得到cDNA，然后建立从中获取或通过获取；如果基因比较小且核苷酸序列已知，也可以通过用化学方法直接人工合成)。10．基因组文库的构建：将某种生物体内的DNA提取出来，选用适当的，将DNA切成一定范围大小的DNA片段，然后，将这些DNA片段分别与连接起来，导入中储存，每个受体细菌都含有了一段不同的DNA片段，而这个群体包含了这种生物的。11．cDNA文库的构建：用某种生物发育的通过产生(互补DNA)片段，与连接后储存在一个受体菌群中。12．cDNA文库属于。与基因组文库比较：cDNA文库较小，，仅含有某种生物的，；而基因组文库较大，，含有某种生物的，仅。13．PCR是的缩写，它是一项利用的原理在生物的核酸合成技术。反应中需要加入的物质有、、(的DNA聚合酶)、(dATP、dTTP、dGTP、dCTP)等；基本过程是：加热至90～95℃使→冷却至55～60℃使→加热n至70～75℃使，如此反复进行，目的基因以(2)形式扩增。14．是基因工程的核心，其目的是，并且可以，同时，使目的基因能够。15．基因表达载体的组成：、、、、。启动子是一段有特殊结构的，位于基因的，是的部位，能驱动基因；终止子也是一段有特殊结构的，位于基因的，其作用是使下来；标记基因的作用是为了，从而将含有目的基因的细胞出来，最常用的标记基因是。16．将目的基因导入植物细胞最常用的方法是，另外还有和等。17．农杆菌是一种生活在土壤中的，能在自然条件下感染，而对大多数没有感染能力。当植物体受到损伤，伤口处的细胞会分泌大量的，吸引农杆菌移向这些细胞，这时农杆菌中的上的(可转移的DNA)可转移至受体细胞，并且到受体细胞上。18．农杆菌转化法是将目的基因插入到上，通过农杆菌的作用，使目的基因进入植物细胞并插入到植物细胞中上，使目的基因的遗传特性得以；基因枪法是利用压缩气体产生的动力，将包裹在金属颗粒表面的打入受体细胞中，使目的基因与其整合并表达的方法，是常用的一种基因转化方法；花粉管通道法是在植物受粉后，，剪去，然后滴加，使目的基因借助进入受体细胞。19．将目的基因导入动物细胞最常用的方法是，基本的操作程序是：提纯含有目的基因的表达载体→从雌性动物体内取出卵(体内受精或体外受精均可以)→采用显微注射仪进行→早期胚胎培养→胚胎移植(哺乳动物)。20．原核生物通常作为受体细胞的原因是、、等，其中以应用最为广泛。21．将目的基因导入大肠杆菌(细菌)最常用的方法是：先用处理细胞，使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态，即处于，再将溶于缓冲液中与混合。22．目的基因导入受体细胞后，是...