DNA甲基化检测方法研究进展河南农业科学ＤＮＡ甲基化检测方法研究进展邢宝松１，郭启祥２，马强１，阎祥洲１，白红杰１（１．河南省农业科学院畜牧兽医研究所，河南郑州４５０００２；２．河南省进出境检验检疫局，河南郑州４５０００３）中图分类号：Ｑ７５文献标识码：Ｂ文章编号：１００４—３２６８（２００７）１１—００１７—０３分离与杂种优势有关的基因提供一些新的思路。因此，ＤＮＡ甲基化的研究逐渐成为新的研究热点。随着对甲基化研究的不断深入，各种各样甲基化检测方法被开发出来以满足不同类型研究的要求。因此，探讨甲基化形成与改变的可能机制，建立准确性高，灵敏度高，操作简单的ＤＮＡ甲基化检测方法，对探讨甲基化调控规律，提高哺乳动物体细胞核移植效率、揭示杂种优势的表观遗传学基础意义重大。１１．１ＤＮＡ甲基化是一种重要的遗传外修饰，是表观遗传学（ｅｐｉｇｅｎｅｔｉｃｓ）的重要组成部分［１］。它参与了动物胚胎发育、基因印迹和_染色体失活等过程，在基因表达的调控中具有重要作用，异常甲基化可以导致肿瘤的形成。ＤＮＡ甲基化与组蛋白去乙酰化协同调节基因的表达。ＤＮＡ甲基化可以随着外界环境因素的变化而改变。在哺乳动物胚胎移植和体细胞核移植（ＳＣＮＴ）过程中，人工操作会引起ＤＮＡ甲基化修饰改变，从而影响成功率。２００３年，继人类基因组计划结束后，人类表观基因组协会（ＨＥＣ）宣布开始投资和实施人类表观基因组计划（ＨＥＰ）ｃ２１。其主要任务是绘制出人类基因组中甲基化可变位点图谱。在农业方面，已经将ＤＮＡ甲基化作为一种分子标记应用于农作物以及家畜动物杂交育种相关理论研究［３￣５］，通过分析亲子代ＣｐＧ岛甲基化的变化差异及其对杂种表现的影响，从表观遗传学角度揭示杂种优势的生物学基础，为提高农作物以及畜禽生产力提供新的途径，也为鉴定和ＤＮＡ甲基化的研究方法甲基化敏感限制酶方法甲基化敏感限制酶方法是经典的甲基化分析方法，主要根据一些限制性内切酶不能切开甲基化的ＤＮＡ序列。由于在真核ＤＮＡ或者哺乳动物ＤＮＡ中，只有ＣＧ相连的胞嘧啶能够被甲基化，因此，在酶切位点内包含ＣＧ序列的限制性内切酶就会遇到问题。这种方法所使用的两个经典酶对是ＨｐａⅡ一ＭｓｐＩ（ＣＣＧＧ）和ＳｍａＩ—_ｍａＩ（ＣＣＣＧＧＧ）。收稿日期：２００７一０７—２０作者简介：邢宝松（１９６９一），男，河南新密人，助理研究员，博士，主要从事动物遗传育种研究。“４．．１Ｌ．‘－Ｌ且ｊｌＬ｜‘‘．‘．ＬＪ‘．．ＩＬ．．ＩＬ．‘ＩＬＪ‘．．．Ｌ札且ＪＬ．｜‘▲且．．Ｌ卫．‘‘．．－Ｌｏ．｜－Ｌ冀“—止卫ｊＬＪｌ－皿．．１Ｌ皿—．Ｌｏ_善且ＪＬ．－Ｌ黛ＪＬＪＬ簟１．址．口幻吴保国．温亮宝．森林重大病虫害诊治专家咨询系统的研究［Ｊ］．北京林业大学学报，２００６，２８（６）：１１３—１１８．理信息系统［Ｊ］．河北农业大学学报，２００４，２７（５）：１０４—１０９．［３０］孙莉，包安明，陈嘻，等．３ｓ技术在新疆棉花精准种植中的应用［Ｊ］．中国棉花。２００４，３１（６）ｔ７—９．［３１３张映梅，李惨炼，赵惠燕．人工神经网络及其在小麦等作物病虫害预测中的应用［Ｊ］．麦类作物学报．２００２，２２（４）：１９．．口习同飞燕，文仁来，张述宽。等．广西玉米病虫害诊断决策专家系统的建立与应用［Ｊ］．广西农业科学，２００６，３７（４）：３７４—３７８．口日邵刚，李志红，王维瑞，等．北京地区蔬菜病虫害远程诊治专家系统ＶＰＲＤＥＳ的研究［Ｊ］．植物保护．２００６，３２（１）：５１—５４．［３２］高苹，居为民，陈宁。等。人工神经网络方法在赤霉病预报中的应用研究［Ｊ］．中国农业气象，２００１，２２（２）：２１—２４．口以郑永利，程家安．章强华．专家系统及其在植保领域中的应用和发展［Ｊ］．中国稻米，２００４（２）：３１－－３３．［３３］余水清，朱伟兴，等．基于Ｎｅｔ和ＷｅｂＳｅｒｖｉｃｅ的移动专家系统的研究一以番茄病虫害诊断为例［Ｊ］．农机化研究，２００６（１）１２０６—３００．口胡杨怀卿，李生才，景晓红．...