三草安前汤对慢性非细菌性前列腺炎模型大鼠IL-1β、IL-6及TNFRⅡ表达的影响作者:周青,熊伟,张国民,方圆,肖红玉,龚秀英【摘要】目的观察三草安前汤对慢性非细菌性前列腺炎模型大鼠炎症因子白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)及肿瘤坏死因子受体Ⅱ(TNFRⅡ)基因和蛋白表达的影响,阐明中药复方治疗慢性非细菌性前列腺炎的炎症因子蛋白靶点。方法将72只健康雄性Wistar大鼠随机分为6组,每组12只,除正常组外,其余5组应用大鼠前列腺蛋白提纯液辅以免疫佐剂制备实验性慢性非细菌性前列腺炎大鼠模型,正常组、模型组予生理盐水,西药组予消炎痛,三草安前汤大、中、小剂量组分别予不同剂量的三草安前汤连续灌胃。30d后处死,采用免疫组织化学、荧光定量RT-PCR等方法检测炎症因子mRNA及蛋白表达。结果三草安前汤可显著降低慢性非细菌性前列腺炎模型大鼠炎症因子IL-1β、IL-6的mRNA及蛋白表达水平(P<0.01),且大、中剂量组作用优于小剂量组(P<0.05),大、中剂量组与正常组比较差异无统计学意义(P>0.05);三草安前汤各剂量组TNFRⅡ表达降低,未随剂量增加出现明显变化(P>0.05)。结论三草安前汤对慢性非细菌性前列腺炎模型大鼠异常的免疫功能有调节作用,降低炎症因子表达是其治疗慢性前列腺炎的重要机理。【关键词】三草安前汤;慢性非细菌性前列腺炎;炎症因子;动物模型Abstract:ObjectiveToobservetheeffectsofSancaoanqiandecoctiononexpressionofcytokineIL-1β,IL-6andTNFRⅡinexperimentalautoimmuneprostatitisrats,andexplorethetargetproteinofcytokineofChineseherbalcompoundintreatingchronicnonbacterialprostatitis.MethodsSeventy-twomaleWistarratsweredividedrandomlyintosixgroupsand12ratsineachgroup.AllgroupsweremadeexperimentalautoimmuneprostatitisratmodelbyinjectingSCpurifiedprostateproteinwithFCAexceptnormalgroup.Thenormalandmodelgroupweregivensaline,westernmedicinegroupwasgivenindomethacin,large,mediumandsmalldosesdecoctiongroupsweretreatedwithlarge,mediumandsmalldosesofSancaoanqiandecoction.Allratsweresacrificedafter30days.ThemRNAandproteinexpressionofcytokinesweretestedbymethodsofimmunohistochemistryandfluorescentquantitationRT-PCR.ResultsSancaoanqiandecoctioncouldreducethemRNAandproteinexpressionofIL-1β,IL-6inexperimentalautoimmuneprostatitisrats.Therewerenosignificantdifferencebetweenlargeandmediumdosesdecoctiongroup,buthadabetteractivitythansmalldose.TheexpressionofTNFRⅡwerereducedinalldosesgroupsandnodifferenceamongthreedosesof---本文于网络,仅供参考,勿照抄,如有侵权请联系删除---Sancaoanqiandecoction.ConclusionSancaoanqiandecoctioncanregulatetheimmunefunctioninchronicprostatitisratmodel.Down-regulationofcytokinesmaybeoneofimportantmechanismsintreatingchronicprostatitis.Keywords:Sancaoanqiandecoction;chronicautoimmuneprostatitis;cytokine;animalmodel慢性非细菌性前列腺炎(CAP)是男科临床常见的难治性疾病之一,炎症因子在CAP的发病过程中与炎症的过程、转归相关。前期临床观察显示,三草安前汤治疗湿热挟瘀型CAP取得满意的临床疗效[1]。为进一步探讨其作用机制,笔者从基因、蛋白水平考察了三草安前汤对CAP模型大鼠炎症因子白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)及肿瘤坏死因子受体Ⅱ(TNFRⅡ)基因表达的影响。1实验材料1.1动物健康雄性Wistar大鼠77只,3月龄,体重200~300g,湖南中医药大学实验动物中心提供。1.2主要试剂免疫组化相关试剂:兔抗大鼠IL-1β单克隆抗体,兔抗大鼠IL-6单克隆抗体(Eptomics公司,美国);兔抗大鼠TNFReceptorTypeⅡ单克隆抗体(Prosci公司,美国);SABC免疫组化试剂盒,DAB显色试剂(武汉博士德)。实时定量荧光RT-PCR相关酶类及试剂:细胞总RNA提取试剂Trizol(Gibco公司,美国),焦碳酸二乙酯DEPC(Promega公司,美国);Olig(dT)15,dNTP混合物(上海Sangon);M-MuLV、RNA酶抑制剂(Promega公司,美国);SY...