四川酬猴桃溃疡病发生和病原探究摘要：实地调查四川5市(县)狒猴桃(Actinidiachinensis)发病情况，从发病果园采集染病枝条并分离病原菌，进行致病性测定，以细菌常规鉴定及基于16SrDNA序列的分子生物学鉴定等确定病原菌。病害调查显示染病獄猴桃枝干上形成渗出白色或红褐色黏液的溃疡；叶片上常形成带黄晕的不规则暗褐色病斑，且名山和苍溪两地的发病情况比起其他三地更为严重。从病枝中分离到5株优势菌株，经鉴定为丁香假单胞杆菌獄猴桃致病变种(Pseudmonassyringaepv.actinidiae)。病害调查中观察到的症状与细菌性溃疡病症状相似，分离得到的病原菌与国内其他地区的报道一致。关键词：獄猴桃；溃疡病；丁香假单胞杆菌獄猴桃致病变种；病原菌；四川中图分类号：S436.634文献标识码：A文章编号：0439-8114(2013)20-4937-05OccurrenceandPathogenIdentificationofKiwifruitBacterialCankerinSichuanLIUYaol,ZHUTian-huil,FANFang-bingl,SHAOBao-linl,2(1.CollegeofForestry,SichuanAgriculturalUniversity,Ya"an625014,Sichuna,China；2.SichuanEntry~ExitInspectionandQuarantineBureau,Chengdu610041,China)Abstract:ByinvestigatingtheoccurrenceofkiwifruitbacterialcankerinfivecitiesandcountiesinSichuanprovince,pathogenicbacteriawasisolatedfrominfectedtrunksofkiwifruitscollectedfromkiwifruitorchardandidentifiedwiththepathogenicitytest,bacteriologicalstudyandmolecularidentificationbasedonthe16SrDNAsequences・Diseasesurveyshowedthattheirregulardarkbrownspotssurroundedwithyellowhaloswereoftenformedontheinfectedkiwifruitleavescankerswithwhiteorreddish-brownexudateswereshapedontheinfectedtrunks,leadersandtwigs.TheoccurrenceofdiseaseinCangxiandMingshanwasmoreseriousthanthoseintheotherthreeplaces・Furthermore，fiveisolatesofthepathogenicbacteriawereobtainedandidentifiedasPseudmonassyringaepv.actinidiae・Thesymptomsobservedintheinvestigationweresimilartothesymptomsofbacterialcankerandtheisolateswerealsoconsistentwithpreviousreportsinotherregions桃产业，建立起规模较大的种植区，但是狒猴桃溃疡病的ofChina.Keywords：Kiwifruit；bacterialcankerdisease；Pseudomonassyringaepv.actinidiae；pathogen；Sichuan獄猴桃溃疡病是一种具有毁灭性的细菌性病害，于20世纪80年代早期在日本和美国被发现并作了较为详细的报道[1,2]。随后，此病相继在韩国、伊朗、意大利等国出现[3-5]o在中国，该病最早发现于湖南[6],之后便迅速蔓延至四川、安徽、福建等省[7-9]o该病害主要危害獄猴桃(Actinidiachinensis)的新梢、侧枝、主干及叶片，造成枝蔓枯死，严重时甚至整株枯死，不仅降低猶猴桃产量，而且导致果皮厚、果酸、果色差，果实品质降低，果树树势变差，严重制约獄猴桃种植。该病于1996年被列为国内森林植物病害检疫对象[10]o近年来，四川多地大力发展狒猴发生一直伴随着整个产业的发展。为了更好地在四川地区检疫和防治该病，本研究在实地病害调查基础上，采集5地染病枝条，分离鉴定引起该病的病原菌，以期为后续防治工作提供理论基础。1材料与方法1.1病害调查与病枝采集实地逐株调查四川省都江堰市、苍溪县、崇州市、德阳状、发病率、调查时间和地点等，并从发病果采集染病的市以及名山县主要猶猴桃栽培区病害发生情况，记录发病症枝条。1.2病原菌分离病原菌分离的培养基采用牛肉膏蛋白月东(BPA)培养基(牛肉膏3g/L,蛋白M10g/L,蔗糖10g/L,琼脂20g/L,pH7.0)o将各地采集到的发病枝条洗净后，于新鲜病健交界处切取4mmX4mm的小块带病斑的组织，用无菌水冲洗3次后分别用75%的乙醇和0.5%〜1.0%的次氯酸钠进行表面消毒，病组织在消毒液中浸泡1〜2min,再用无菌水冲洗3次后移至装有无菌水的培养皿中，制成菌悬液涂布BPA培养基，25°C培养1〜2d后挑取单菌落在BPA培养基上多次划线纯化，将纯化后的分离菌株转至BPA斜面培养基上4工保存。1.3标准菌株和对照菌株标准菌株为丁香假单胞杆菌獄猴桃致病变种(Pseudomonassyringaepv.actinid...