蒲公英同部位提取物对大肠轩萄和金黄色葡萄球萄抑萄效果的比较(1．梨树县榆树台镇畜牧兽医工作站，吉林梨树..136506；2．梨树县动物疫病预防控制中心，吉林梨树..1365000；3．吉林省畜牧兽医科学研究院，吉林长春..130062)【摘要】通过水提、水提75％醇沉物和水提80％醇沉物的方法制备蒲公英全草根的提取物，比较蒲公英不同部位对大肠杆菌和金葡菌的抑菌效果，从而确定出最佳抑菌有效部位和提取方法。方法：采用药敏试验，测定蒲公英全草、根对大肠杆菌和金葡菌抑茵效果。结果：蒲公英全草、根能有效的抑制两种茵，对金葡菌作用较明显。结论：蒲公英全草的抑茵效果优于蒲公英根，水提..75％醇沉物抑菌效果优于水提和水提..80％醇沉物的抑菌效果。【关键词】蒲公英；抑菌效果；最小抑菌浓度【中图分类号]S852．61【文献标识码】A【文章编号]1672—2078(2010)10—..00010—03蒲公英是菊科多年生草本植物，别名黄花地丁、黄花三七、婆婆丁等，味苦、甘，寒。归肝，胃经。具有清热解毒，消肿散结，利尿通淋等功效n】。笔者通过水提、水提75％醇沉物和水提80％醇沉物的方法制备蒲公英全草、根的提取物，比较它们对大肠杆菌和金葡菌的抑菌效果。通比较得出最佳抑菌有效部位和提取方法，从而指导蒲公英的临床应用和为其深入研究提供依据。l材料1．1仪器无菌超净工作台；高压灭菌器；恒温振荡培养箱；微量移液器；涂菌棒等。1．2药品与试剂蒲公英全草；蒲公英根；95％乙醇物，蛋白胨，NaCI，琼脂等。l_3菌种大肠杆菌、金葡菌纯菌种。1．4培养基琼脂培养基和LB液体培养基。2方法2．1蒲公英全草提取物的制备蒲公英全草水提物：天平称蒲公英全草200g，用纱布包裹好用蒸馏水浸泡过12h，再用砂锅煎煮、过滤，重复三次，将所得的滤液合并。然后用旋转蒸发器浓缩至200mL，即得1g／mL蒲公英全草水提物。蒲公英全草水提75％醇沉物：取100mL蒲公英全草水提物，加95％乙醇375mL，使含醇量达75％(十字交叉法计算)，静置48h，滤过，回收乙醇浓缩至100mL，即得蒲公英全草水提75％醇沉物。蒲公英全草水提80％醇沉物：取50mL蒲公英全草水提..75％醇沉物，再加95％乙醇267mL，使含醇量达80％，静置48h，滤过回收乙醇，浓缩至50mL，即得蒲公英全草水提80％醇沉物。2．2蒲公英根提取物的制备蒲公英根水提物：天平称取蒲公英根200g，用纱布包裹好用蒸馏水浸泡过12h，再用砂锅煎煮、过滤，重复三次，将所得的滤液合并。然后用旋转蒸发器浓缩至200mL，即得Ig／mL蒲公英水提物。蒲公英根水提..75％醇沉物：取100mL蒲公英根水提物，加95％乙醇375mL；使含醇量达..75％(十字交叉法计算)，静置..48h，滤过，回收乙醇浓缩至..100mL，即得蒲公英根水提..75％醇沉物。蒲公英根水提..80％醇沉物：取..50mL蒲公英根水提75％醇沉物，再加95乙醇267mL，使含醇量达80％，静置48h，滤过回收乙醇，浓缩至50mL，即得蒲公英根水提..80％醇沉物。..2-3抑菌活性的测定..2．3．1细菌培养用铂金耳挑取所提供培养基上生长的大肠杆菌、金葡菌的单个菌落，接种于灭菌后的LB液体培养基中，然后置于..37℃恒温摇床中，进行..18h的增菌培养。..2．3．2药敏试验将药敏纸片分别置于不同浓度蒲公英全草、根的提取物中浸泡。将恒温振荡培养箱中的菌液取出，稀释成浓度为每毫升l0个菌液，即OD=0．5～0．6的菌液，涂布于灭菌后的琼脂培养基上各100÷1000000L，待培养基表面干燥，以生理盐水纸片为阴性对照，同时将含有不同浓度蒲公英全草、根提取物的直径..5mm的药敏纸片贴于培养基表面，记录。37℃恒温培..养24h，观察并测定抑菌环直径，重复3次。..2．3_3MIC的9,4定n采用二倍稀释法将用最佳提取方法提取的蒲公英全草、根的提取物分别稀释成..500mg／mL、..250mg／mL、..125mg／mL、..62．5mg／mL，将其各..2mL分装于灭菌后的装有..18mL琼脂培养基的三角瓶内，充分混匀，空白对照组不加药物，高压灭菌器灭菌。无菌超净台内倒入各平皿内，待琼脂培养基凝固，吸取..100vL菌液滴入每个平皿中，用涂菌棒将菌液均匀涂开，至菌液干燥。37℃恒温箱培养..18h后观察结果。3结果与分析..3．1结果下表为采用药敏试验方法测定的不同提取方表l蒲公英全草、根提...