子宫内膜异位症性不孕患者腹腔液中细胞因子和中医证候相关性研究摘要：目的探讨子宫内膜异位症(EM)性不孕患者的中医辨证分型与腹腔液细胞因子白细胞介素(IL)-6、IL-8及肿瘤坏死因子-a(TNF-a)水平之间的相关性，为临床治疗提供思路。方法选取EM性不孕患者105例，辨证分为肾虚血瘀、气滞血瘀、热郁血瘀、寒凝血瘀、气虚血瘀、痰湿瘀阻六证型组。同时选取非EM性不孕患者30例作为对照组。采用酶联免疫吸附法测定腹腔液中IL-6、IL-8及TNF-a等细胞因子的水平。结果在105例EM性不孕患者中,肾虚血瘀证35例(33.33%),气滞血瘀证18例(17.14%),气虚血瘀证11例(10.48%),证型组IL—6、IL—8、TNF-a寒凝血瘀证22例(20.95%),热郁血瘀证10例(9.52%),痰湿瘀阻证9例(8.57%)O各水平均高于对照组(P0.05)o同期选取行腹腔镜探查，经各项检查确诊为盆腔正常、临床和病理等证实非EM的不孕症患者30例作为对照组，年龄25〜41岁，原发性不孕11例，继发性不孕19例。本研究经本院伦理委员会批准，采集相应标本进行检测。1.2诊断标准1.2.1子宫内膜内异症诊断标准参照2007年中华医学会妇产科学分会子宫内膜异位症协作组颁布的《子宫内膜异位症的诊断与治疗规范》［2］。1.2.2子宫内膜异位症中医证型辨证标准参照《中药新药临床研究指导原则（试行）》［3］、《中医妇科学》［4］中关于EM的中医辨证标准，并制定中医四诊信息调查表，辨证分为气滞血瘀证、寒凝血瘀证、气虚血瘀证、肾虚血瘀证、痰湿瘀阻证、热郁血瘀证6个证型。1.2.3子宫内膜异位症性不孕症诊断标准因EM原因导致无保护性生活1年及1年以上不能受孕者。1.2.4子宫内膜异位症病变程度标准采用AFS1985年修订的EM评分标准［5］。主要根据腹膜、卵巢病变的大小及深浅，卵巢输卵管粘连的范围及粘连的厚薄，以及子宫直肠窝的封闭程度进行评分来分期。1.3纳入标准①符合EM临床及腹腔镜下诊断标准，且符合不孕症诊断标准。②年龄20〜45岁。③自愿接受本试验，并签署知情同意书者。1.4排除标准①生殖器官发育异常、输卵管梗阻、内分泌失调等因素致不孕者。②有恶性肿瘤、结核、炎症、免疫性（如甲状腺功能亢进）等疾病患者。③半年内曾行内分泌或免疫抑制治疗的患者。④合并心脑血管、肝、肾和造血系统等严重原发性疾病，以及精神病患者。⑤妊娠期或哺乳期妇女。⑥卵巢囊肿直径在10cm以上者，或Cal25>200U/mL者。⑦不符合纳入标准，因故未按规定完成试验，无法判断结果或资料不全等影响结果评价者。1.5研究方法1.5.1中医辨证分型对105例EM性不孕患者的病史进行详细、客观的记录，包括研究对象一般情况、四诊信息、临床诊断及治疗经过，详细记录妇科检查、辅助检查结果以及腹腔镜术中检查所见、术后病理结果等内容。同时依据EM的中医证型辨证标准进行中医辨证分型，对于证候辨证等主观性影响较大的指标，由2名副主任以上中医师共同确定。1.5.2细胞因子标本收集及测定方法所有患者均于月经周期第6-13日，在腹腔镜或经腹手术中，于子宫直肠陷凹及子宫膀胱陷凹收集腹腔液或腹腔冲洗液5〜IOHIL,装于无菌离心管中，水平离心2000r/min,20min后提取上清液，于-80°C冻存，保存待测。腹腔液细胞因子水平测定采用双抗体夹心酶联免疫吸附技术(SandwichELISA),IL-6、IL-8及TNF-a检测试剂盒购自上海卒瑞生物科技有限公司，敏感度5pg/mL,检测操作步骤均严格按照说明书要求进行,质控显示良好。1.6统计学方法临床资料采用双人独立录入的原则，用Excel软件建立数据库，SPSS17.0统计软件进行数据分析。结果以一x土s表示，采用t检验及F检验。检验水准a=0.05,采用双侧检验。2结果2.1中医证型分布情况105例EM性不孕患者中医证型分布情况见表lo其中肾虚血瘀证患者最多，为35例，占33.33%o表2显示，各组EM性不孕患者腹腔液中IL-6、IL-8及TNF-a水平均高于对照组（P