复方夏枯草膏质量标准探究摘要：目的建立复方夏枯草膏的质量标准。方法采用薄层色谱法，对夏枯草、甘草、玄参进行定性鉴别。采用反相高效液相色谱法测定制剂中迷迭香酸的含量，以甲醇-0.1%三氟乙酸(40：60)为流动相，检测波长为330nm。结果薄层色谱法专属性强、阴性无干扰。迷迭香酸在0.0499〜0.9980?g范围内线性关系良好，平均回收率为100.99%(RSD=1.ll%)o结论本方法简便、准确、稳定，且无干扰,可作为该制剂的质量控制方法。关键词：复方夏枯草膏；质量标准；薄层色谱法；高效液相色谱法D0I：10.3969/j.issn.1005-5304.2013.06.020中图分类号：R284.1文献标识码：A文章编号：1005-5304(2013)06-0053-03复方夏枯草膏现执行标准收载于《卫生部药品标准•中药成方制剂》第七册，由夏枯草、甘草、玄参等14味中药组成，具有清火散结等作用，主要用于瘻瘤凛痂、结核作痛等症。现行质量标准仅有“性状”及“检查”项，无法对其进行有效的质量控制，故完善、提高复方夏枯草膏的质量标准极为必要。本研究对方中的夏枯草、甘草、玄参进行了薄层色谱定性鉴别，同时建立夏枯草中迷迭香酸的含量测定方法，从而全面、有效、准确地对该制剂进行质量控制。1仪器与试药AX-200电子天平；XS205电子天平；岛津LC-20AD高效液相色谱仪；SPD-M20A二极管阵列检测器。夏枯草对照药材（批号120993-200604）、甘草对照药材（批号120904-201117）、玄参对照药材（批号121008-200906）、哈巴俄昔对照品（批号111730-201106）及迷迭香酸对照品（批号1118871-201102）均由中国食品药品检定研究院提供。复方夏枯草膏（批号12020E120202、120203）及阴性对照品由上海雷允上药业有限公司提供。甲醇为色谱纯（Merck）,其他试剂均为分析纯。2方法与结果2.1薄层色谱鉴别2.1.1夏枯草取本品1.5g,加70%乙醇30mL,超声30min,2.1.2甘草取本品10g,加水30mL,摇匀，用乙瞇提取2次，每次20mL,弃去乙瞇液，再用水饱和正丁醇提取3次，每次20mL,合并正丁醇液，用氨试液40mL洗涤,弃去氨试液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇1mL使溶解，作为供试品溶液。取甘草对照药材0.2g,加水煎煮1h,滤过，滤液蒸干，残渣加水10mL使溶解，同法制成对照药材溶液。另取甘草阴性对照品（相当于供试品的量），按供试品溶液的制备方法制成阴性对照溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述2种溶液各10?L,分别点于同一用1%氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上使成条状，以甲苯-乙酸乙酯-甲醇（7：3：1.5）为展开剂[2],展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105°C加热至斑点显色清晰，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，且阴性未见干扰。2.1.3玄参取玄参对照药材0.4g,加水50mL煎煮1h,滤过，滤液按“2.1.2”项下供试品溶液制备方法操作，为对照药材溶液。取玄参阴性对照样品（厂家提供，取相当于供试品的量），按供试品溶液的制备方法制成阴性对照溶液。另取哈巴俄昔对照品，加甲醇制成每1mL含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取对照药材溶液、对照品溶液及"2.1.2”项下供试品溶液各10?L,分别点于同一硅胶G薄层板上使成条状，以乙酸乙酯-冰醋酸-甲酸-水（15：1：1：2）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的条斑，且阴性未见干扰。2.2含量测定2.2.1色谱条件色谱柱为AlltimaHPC18柱（250mmX4.6mm,5?m）,流动相为甲醇-0.1%三氟乙酸（40:60）,流速1.0mL/min,检测波长330nm,柱温30°C[1],进样量为10?LO理论板数按迷迭香酸峰计算应不低于4000o在此条件下，迷迭香酸峰与其他组分均能达到基线分离。2.2.2对照品溶液制备取迷迭香酸对照品适量，精密称定，加稀乙醇制成每1mL含0.02mg的溶液，即得。2.2.3供试品溶液制备取本品约0.6g,精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入稀乙醇50mL,摇匀，称定质量，超声处理（功率90W,频率59kHz）30min,放冷，再称定质量用稀乙醇补足减失的质量，摇匀，滤过，取续滤液,即得。2.2.4阴性对照溶液制备取相当于供试品量的缺夏枯草阴性对照品，按供试品溶液制备方...