猴脑选择性超深低温断血流复苏对基质金属蛋白酶9及转化生长因子【摘要】目的：观察猴脑选择性超深低温断血流复苏对基质金属蛋白酶9（MMP-9）和转化生长因子β1（TGF-β1）表达的变化影响，探讨超深低温相关脑保护机制。方法：选择9只成年雄性健康恒河猴作为研究对象，随机分为常温组2只与超深低温组7只，分别建立等温及超深低温断血流复苏实验模型，分别对大脑皮质脑组织切片用MMP-9、TGF-β1抗体进行免疫组化染色、图像分析，对每张切片的平均灰度值进行统计学分析，比较两组MMP-9、TGF-β1含量和平均灰度值的情况。结果：超深低温组神经细胞MMP-9表达下调，而TGF-β1表达增高。结论：超深低温能抑制MMP-9的表达，增加TGF-β1的表达，促进受损脑细胞的损伤修复，提高了脑细胞对缺血缺氧损害的耐受性，抑制细胞的凋亡，是缺血缺氧情况下脑重要的内源性保护机制之一。【关键词】猴脑；超深低温；基质金属蛋白酶9（MMP-9）；转化生长因子β1（TGF-β1）【Abstract】Objective：Toexploretheeffectsofbloodflowocclusionafterresuscitationusingselectivecerebralultra-profoundhypothermiaontheexpressionmatrixmetalloproteinases-9andtransforminggrowthfactor-β1formonkeyandtoinvestigatethemechanismofbrainprotectionrelatedtoultradeephypothermia.Method：9adultmalehealthyGangesRivermonkeyswereselectedastheresearchsubjects，randomlydividedintothenormaltemperaturegroupoftwoandtheultradeeplowtemperaturegroupofseven，theisothermalandultradeephypothermiccirculatoryarrestrecoveryexperimentalmodelwereestablished，andmmunohistochemicalstainingandimageanalysiswereusedtoanalyzetheaveragegrayvalueofeachsliceofbraincortexbraintissuesectionswithMMP-9andTGF-β1antibody，theMMP-9，TGF-β1andtheaveragegrayvalueofthesituationintwogroupswerecompared.Result：TheexpressionofMMP-9wasdownregulated，whiletheexpressionofTGF-β1wasincreasedintheultradeephypothermiagroup.Conclusion：Selectiveultra-profoundhypothermiacanattenuateMMP-9expressionandpromoteTGF-β1expressionwhichinhibitapoptosis，improvethetoleranceofnervecellstoischemiaandhypoxiaandpromotetherestorationofdamagednervecells，itisoneoftheimportantendogenousprotectivemechanismsofcerebralischemiaandhypoxia.【Keywords】Monkeybrain；Ultraprofoundhypothermia；Matrixmetalloproteinases-9（MMP-9）；Transforminggrowthfactor-β1（TGF-β1）First-author’saddress：CentralHospitalofLuoheCity，Luohe462000，Chinadoi：10.3969/j.issn.1674-4985.2016.11.006低温对缺血性脑损伤有保护作用由Aleen于1939年最先报道，此后国内外学者对低温，尤其是亚低温（32～35℃）从细胞因子、递质、受体、蛋白质、酶、离子通道及基因表达等方面进行了相关的基础和临床研究[1]，但对超深低温脑保护的作用机制的研究尚在进一步探索中。基质金属蛋白酶9（matrixmetalloproteinases-9，MMP-9）和转化生长因子β1（transforminggrowthfactor-β1，TGF-β1）是重要的细胞因子[2-3]，它们参与脑缺血缺氧过程中的损伤修复，其在超深低温条件下的脑保护作用的研究目前尚没有明确的报道。本研究通过检测猴大脑皮质中MMP-9与TGF-β1在常温与选择性超深低温断血流复苏后的表达的水平变化程度，探索脑选择性超深低温断血流复苏对MMP-9及TGF-β1表达的影响，将有助于研究其在脑的不同低温脑保护技术中的作用变化，旨在为MMP-9抑制剂及TGF-β1的临床应用提供一定的理论依据，现报道如下。1材料与方法1.1实验动物选取9只成年雄性健康恒河猴（中国科学院昆明动物研究所提供）作为研究对象，平均体重（9.1±2.5）kg，年龄4～10岁，随机分为常温组2只与超深低温组7只。1.2实验仪器与药物包埋机（HistocentreShandon，英国），脱水机（PathcentreShandon，英国），漂片机（3120058SectionBathShandon，英国），切片机（HM-325，德国Microm），烤片机（3120061HotplateShandon，英国），...