食品安全地方标准植物源性食品中α-玉米赤霉烯醇和玉米赤霉烯酮的测定液相色谱-串联质谱法11范围本标准规定了植物源性食品中α-玉米赤霉烯醇和玉米赤霉烯酮液相色谱-质谱/质谱的测定方法。本标准适用于成品粮及其加工制品（面粉、淀粉等）、食用植物油脂及其加工制品等中α-玉米赤霉烯醇和玉米赤霉烯酮的定性确证和定量测定。本标准方法的检出限见附录A中表A.1。22规范性引用文件下列文件对于本标准的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T8170数值修约规则与极限数值的表示和判定SN/T0800.1进出口粮油、饲料检验抽样和制样方法GB/T5524植物油脂检验取样、扦样法13原理试料中α-玉米赤霉烯醇和玉米赤霉烯酮经三氯甲烷提取，采用碱性水溶液萃取并调至中性后，再经二氯甲烷萃取后，使用液相色谱-质谱/质谱仪测定，外标法量。24试剂和材料除另有规定外，所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。4.1三氯甲烷（CHCl3）。4.2二氯甲烷（CH2Cl2）。4.3无水硫酸钠（Na2SO4）。4.4氯化钠（NaCl）。4.5氢氧化钠（NaOH）。4.6一水合柠檬酸（C6H8O7·H2O）。4.7甲醇（CH3OH），色谱纯。4.8乙腈（C2H3N），色谱纯。4.9标准品：α-玉米赤霉烯醇（C18H24O5，CAS：36455-72-8）、玉米赤霉烯酮（C18H22O5,CAS：17924-92-4），纯度均大于99%。4.10饱和氯化钠溶液：称取36g氯化钠（4.4）溶于100mL水中。4.112%氢氧化钠溶液：称取20g氢氧化钠（4.5）用水溶解并定溶至1L。4.12106g/L柠檬酸溶液：称取106g一水合柠檬酸（4.6）用水溶解并定溶至1L。4.13乙腈-水溶液（1+1，体积比）：取500mL乙腈（4.8）和500mL水混合。4.14甲醇-水溶液（1+1，体积比）：取500mL甲醇（4.7）和500mL水混合。4.15标准储备液：分别准确称取α-玉米赤霉烯醇和玉米赤霉烯酮标准物质（4.9）适量（精确至0.0001g）用乙腈溶解，配制成浓度为1000mg/L的标准储备液。0℃～4℃避光保存，有效期为6个月。4.16标准中间液：准确量取标准储备液1mL于100mL容量瓶中，用乙腈-水溶液（4.13）定容至刻度，混匀备用。0℃～4℃避光保存，有效期为1个月。。4.17混合标准工作液：分别准确量取α-玉米赤霉烯醇和玉米赤霉烯酮标准储备液适量，于一组容量瓶中，用乙腈-水溶液（4.13）稀释至刻度，配制成浓度为0.500ng/mL、1.00ng/mL、5.00ng/mL、10.0ng/mL、20.0ng/mL的标准工作液。此溶液现用现配。4.18滤膜：孔径为0.22μm，有机相型。5仪器与设备5.1液相色谱-质谱/质谱仪。5.2分析天平：感量±0.0001g和±0.01g。5.3旋转蒸发仪。5.4氮吹仪。5.5振荡提取器。5.6漩涡混合器。5.7分液漏斗：125mL。5.8实验室常用玻璃器皿。。6分析步骤6.1试样制备与保存根据不同类型的样品，分别按SN/T0800.1和GB/T5524的要求制备试样。固体样品粉碎后全部通过0.425mm的标准网筛。6.2提取称取试料10g（精确至0.01g）于100mL具塞锥形瓶中。固体样品加入50mL三氯甲烷（4.1），植物油脂样品加入35mL三氯甲烷（4.1），盖紧塞子，于振荡提取器上（5.5）振荡提取30min。6.3净化使用中速滤纸过滤提取液（7.1）并用三氯甲烷定容至50mL(V1)。吸取25.0mL提取液(V2)至125mL分液漏斗（5.7）中，加入5mL饱和氯化钠溶液（4.10），混匀，再加入25mL2%氢氧化钠（4.11）溶液，剧烈振荡1min，静置分层，弃去三氯甲烷层。再用25mL三氯甲烷重复萃取一次，弃去三氯甲烷层。加入25mL柠檬酸溶液（4.12），混匀。再加入25mL二氯甲烷（4.2），剧烈振荡1min，静置分层。将二氯甲烷层溶液通过装有5g无水硫酸钠（4.3）的漏斗。再用25mL二氯甲烷重复萃取一次，操作同上。另用5mL二氯甲烷冲洗无水硫酸钠，合并二氯甲烷萃取液至浓缩瓶中，40℃以下于旋转蒸发仪上浓缩至近干。残留物用5mL二氯甲烷溶解并转移至玻璃离心管中，于40℃以下用微弱氮气吹干，残留物用1.0ml乙腈-水溶液（4.12）溶解，于漩涡混合器上（5.6）漩涡混匀后，过0.22μm有机滤膜（4.18），供仪器测定。6.4空白试验除不加试料外，采用完全相同的分析步骤。6.4测定6.4.1仪器参...