中西医结合临床专业毕业论文[精品论文]寒热刺激对二乙基亚硝胺诱发性肝癌模型大鼠肿瘤生物学特性的影响关键词：肝癌寒热刺激生物学特性肿瘤生成二乙基亚硝胺摘要：目的：在确立适当的寒热刺激温度基础上，研究寒热不同刺激对二乙基亚硝胺(diethylnitrosamine，DEN)诱发性肝癌模型大鼠肿瘤生物学特性包括(肿瘤发生、增殖、转移等)的不同影响，并从免疫学角度探讨其可能的作用机制。方法：1、寒热环境模拟优化：雄性Wistar大鼠30只，随机分组为空白对照组及寒热刺激组，寒热刺激组分别在40℃、36℃、-4℃、0℃环境下刺激3h，1次/d，连续1周，正常对照组在室温22℃下饲养，观察各组在不同环境下的生活状态。2、雄性Wistar大鼠42只，按体质量随机分组为空白对照组(N，n=6)、模型组(G1、n=12)、热刺激组(G2、n=12)及寒刺激组(G3、n=12)。G1、G2、G3按体质量10mg/kg给予0.2％二乙基亚硝胺灌胃，1次/d，5次/周，N组给予等量的生理盐水灌胃，至14周末停药。G2、G3分别在高温环境(36±2)℃、低温环境(0±2)℃中给予热和寒刺激3h，1次/d，5次/周，共20周。20周末处死动物，观察肝脏大体病变，并留取血清及肝、肺组织标本。3、HE染色，观察大鼠肝脏炎症变化，按Edmondson分级标准进行分级。4、采用全自动生化分析仪检测肝功能，包括丙氨酸氨基转移酶(alanineaminotransferase，ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(aspartateaminotransferase，AST)、白蛋白(albumin，ALB)及γ-谷氨酰基转移酶(γ-Glutamyltranwferase，γ-GT)等。5、应用免疫组化检测肝癌组织中血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor，VEGF)、增殖细胞核抗原(proliferatingcellnuclearantigen，PCNA)和肝细胞癌抗原(Kiel67antigen，Ki-67)的表达。6、利用酶联免疫吸附ELISA法检测血清白细胞介素-2(interleukin-2，IL-2)、IL-4、IL-10及干扰素-γ(interferon-γ，IFN-γ)的水平。结果：1、一般情况：造模前各组间大鼠体质量无差别；干预后，各组体质量均显著低于N组(P＜0.05)；G1、G2、G3间体质量差异无统计学意义(P＞0.05)。G1、G2、G3和N组死亡率分别为16.67％(2/12)、33.33％(4/12)、16.67％(2/12)及0％(0/6)。2、肝功能：ALT、AST、ALB、γ-GT测定结果显示，与N组比较，G1、G2、G3组均出现明显异常；G3组肝功能较G1、G2有改善，G2组则较G1组有所加重。3、肿瘤生成相关：肝脏病理切片HE染色显示，G1、G2、G3可见到癌性结节，并伴有肝硬化。经Edmondson分级，G2组病变程度显著重于G1、G3组。免疫组化结果显示，N组见到少量VEGF表达，G1、G2、G3均见于表达显著增强，与G1比较，G2表达增强，G3表达减弱。4、肿瘤增殖相关：免疫组化结果显示，Ki-67、PCNA在N组中见到少量表达，G1、G2、G3均见表达显著增强，与G1比较，G2表达增强，G3表达减弱。5、肿瘤转移相关：处死时，G1、G2、G3均见肿瘤肺转移，G1、G2、G3和N组肺转移率分别为25.0％(3/12)、41.67％(5/12)、16.67％(2/12)及0％(0/6)。6、免疫指标：脾指数显示，与N组比较，各组均存在显著脾肿大；G2＞G1＞G3，G2和G3间比较差异有统计学意义。ELISA结果显示，G1、G2、G3均存在着不同程度的免疫失衡，与N组比较，IL-2、IFN-γ降低，G2＜G1＜G3，IL-4及IL-10升高，G2＞G1＞G3。结论：1、长期(20周)的寒热刺激[(0±2)℃、(36±2)℃]可对大鼠机体造成不同程度的影响。2、长期(0±2)℃寒性刺激对DEN诱发性大鼠肝癌模型肿瘤的生成、转移、增殖呈现一定的抑制作用，而(36±2)℃热刺激则呈现一定程度的促进作用。3、改变大鼠体内T细胞免疫功能及Th1向Th2的漂移，可能是寒热刺激影响DEN诱发性大鼠肝癌肿瘤生物学特性的机制之一。正文内容目的：在确立适当的寒热刺激温度基础上，研究寒热不同刺激对二乙基亚硝胺(diethylnitrosamine，DEN)诱发性肝癌模型大鼠肿瘤生物学特性包括(肿瘤发生、增殖、转移等)的不同影响，并从免疫学角度探讨其可能的作用机制。方法：1、寒热环境模拟优化：雄性Wistar大鼠30只，随机分组为空白对照组及寒热刺激组，寒热刺激组分别在40℃、36℃、-4℃、0℃环境下刺激3h，1次/d，连续1周，正常对照组在室温22℃下饲养，观察各组在不同环境下的生活状态。2、雄...