转化生长因子α在卵巢癌中的自分泌作用摘要：目的为研究TGF-α与卵巢癌发生发展的关系。方法采用免疫组化、原位杂交方法检测了TGF-α在72例卵巢肿瘤及正常卵巢组织中的表达。结果TGF-α和其mRNA在卵巢癌中的阳性率为71.05%和57.89%，在良性肿瘤、交界性肿瘤和正常卵巢组织中的检出率分别为30.00%和20.00%、58.33%和33.33%及41.67%和16.67%，各组与卵巢癌组间均有显著差异(P＜0.05)。EGF在上述各类组织中极少表达。表明TGF-α在卵巢肿瘤中有高水平的表达，且恶性程度越高，表达率越高。结论TGF-α的自分泌在卵巢癌的发生发展中起着重要的作用，而EGF可能在卵巢癌中不发挥作用。关键词：卵巢肿瘤；表皮生长因子；转化生长因子；免疫组织化学；原位杂交中分类号：R737.31文献标识码：A文章编号：1000-7431(2000)02-0118-03AUTOCRINEMECHANISMOFTGF-αINOVARIANCANCERYANGHongZHENGWei-guoXINXiao-yan（DepartmentMedicalUniversity,XijingHospital,TheFourthMilitaryMedicalUniversity,Xian710032,P.R.China）Abstract：ObjectiveTostudytheexpressionofTGF-αandEGFinovarianneoplasmandtodiscusstherelationshipbetweenthesefactorsandthedevelopmentandoccurrenceofovariancancer.MethodsImmunohistochemistryandinsituhyhridizationwereused.ResultsThepositiverateofTGF-αproteinandmRNA-inovariancancer,benigntumor,borderlinetumorandnormalovariantissuewere71.05%and57.89%,30.00%and20.00%,58.33%and33.3%,41.67%and16.67%respectively.Therewassignificantdifferencebetweenovariancancergroupandothergroups(P＜0.05).VerylowpositiveratesofEGFweredetectedinthesetissues.ConclusionTGF-αautocrinemechanismplaysanimportantroleintheoccurrenceanddevelopmentofovariancancer,butEGFdoesn't.Keywords：Ovarianneoplasm;Transforminggrowthfactor-α;Epidermalgrowthfactor;Immunohistochemistry；Insituhybridization转化生长因子和表皮生长因子及其受体所形成的自/旁分泌环的异常在一些恶性肿瘤中较为常见，提示这一系统在肿瘤的发生发展中占有重要的地位［1，2］。本研究应用免疫组化及原位杂交方法检测了72例卵巢肿瘤及正常卵巢组织中TGF-α和EGF的表达。材料与方法一、组织标本来源1988～1993年西京医院妇产科手术，经病理证实且有完整随访资料的72例卵巢肿瘤患者的病理标本。分为4组：正常卵巢组织12例，良性卵巢肿瘤10例，交界性卵巢肿瘤12例，卵巢癌38例(其中浆液性癌24例，粘液性癌8例，宫内膜样癌3例，透明细胞癌2例，未分化癌1例)。卵巢癌患者经随访至1995年12月，其中复发并死亡者20例。标本均经常规固定、包埋，做5μm厚连续切片分别做HE染色、免疫组织化学和原位杂交检测。二、主要试剂ABC试剂盒(anti-rabbit)购自美国VetorLab.兔抗EGF单克隆抗体、兔抗TGF-α多克隆抗体购自美国SantacruzBiotechnologyInc.EGF质粒、TGF-α质粒由第四军医大学病理教研室惠赠；DIGDNALabelingandDetectionkit购自德国宝灵曼IBM公司。三、实验方法1.免疫组织化学方法石蜡切片常规脱蜡至水，浸泡于10mmol/L柠檬酸溶液中(pH6.0)，放于微波炉中加热5min×2次，取出后冷却至室温，PBS缓冲液冲洗。以下步骤分别按ABCkit方法进行，实验均设立空白对照、替代对照、正常阴性对照及阳性对照。2.质粒提取及纯化［9］3.质粒鉴定及片段回收质粒酶切后回收所需片段。四、探针标记按DIGDNA标记和检测试剂盒进行，用随机引物法将DIG标记的dUTP掺入到EGF、TGF-α基因探针上。五、原位杂交参考DIG使用手册进行：标本设立不加探针的空白对照及PBR322探针对照。六、阳性标准免疫组化阳性信号为棕黄色，原位杂交阳性物质为蓝紫色细颗粒状，阳性信号位于胞浆和胞膜上，按显色有无和阳性细胞的多少而分为三个等级阴性(-)：无阳性细胞。阳性(+)：阳性细胞50%以下且显色浅。强阳性(++)：阳性细胞50%以上或显色深。七、统计学计算用χ2检验进行统计学处理。结果一、免疫组化结果1.TGF-α的表达采用ABC免疫组化法对72例卵巢肿瘤及正常卵巢组织中TGF-α进行了检测，结果显示：TGF-α的阳性率恶性肿瘤...