食品安全地方标准酒精饮料中氨基甲酸乙酯的测定气相色谱-质谱法1范围本标准规定了酒精饮料中氨基甲酸乙酯的气相色谱-质谱测定方法。本标准适用于白酒、啤酒、黄酒、葡萄酒等酒精饮料中氨基甲酸乙酯的测定。本标准的检出限：当试样取2.0g时，本方法氨基甲酸乙酯含量的检出限为1.0μg/kg。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3术语和定义酒精饮料系指供人们饮用的且乙醇含量在0.5%(vol)以上的饮料，包括各种发酵酒、蒸馏酒及配制酒。4原理酒精饮料加氨基甲酸乙酯同位素内标后，经过硅藻土固相萃取柱净化、洗脱，洗脱液浓缩后，用气相色谱—质谱仪测定，内标法定量。5试剂和材料除另有规定外，所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。5.1无水硫酸钠(Na2SO4)：450℃灼烧4h，冷却后贮于干燥器中备用。5.2CLE-硅藻土固相萃取柱：4000mg/12mL。5.3正己烷(C6H14):色谱纯。5.4乙酸乙酯(C4H8O2):色谱纯。5.5乙醚(C4H10O):色谱纯。5.6甲醇（CH3OH）:色谱纯。5.7氨基甲酸乙酯标准品（C3H7O2N，CAS：51-79-6）：纯度>99.0％。5.8D5-氨基甲酸乙酯(C3H7O2N-d5)。5.95%乙酸乙酯-乙醚溶液（V/V）。5.10D5-氨基甲酸乙酯溶液：准确称取适量的D5-氨基甲酸乙酯标准品，用甲醇配制成浓度为1.0mg/mL的标准储备液，使用时用甲醇稀释至1.0μg/mL。5.11氨基甲酸乙酯标准溶液：准确称取适量的氨基甲酸乙酯标准品，用甲醇配制成浓度为1.0mg/mL的标准储备液，使用时用甲醇稀释至0.2μg/mL。5.12氨基甲酸乙酯标准使用液：准确吸取0.2μg/mL氨基甲酸乙酯标准溶液0.1mL、0.2mL、0.4mL、0.6mL、0.8mL，各加1.0μg/mL的D5-氨基甲酸乙酯溶液100μL，用甲醇定容至1.0mL，得到浓度为20.0ng/mL，40.0ng/mL，80.0ng/mL，120.0ng/mL，160.0ng/mL的标准使用液（含100.0ng/mLD5-氨基甲酸乙酯）。6仪器与设备6.1气相色谱单级四级杆质谱仪。6.2电子分析天平：感量0.1mg。6.3固相萃取仪，配有抽真空装置。6.4氮吹仪。6.5漩涡混匀器。7分析步骤7.1试样制备与保存样品采集后应放阴凉处保存，尽快测定。样品开封后，应放4℃冰箱冷藏，在1周内尽快分析。7.2提取称取2.0g（准确到0.01g）的酒样，加100μLD5-氨基甲酸乙酯内标使用液，混匀。7.3净化加样到硅藻土固相萃取柱上，抽真空，让试样慢慢渗入到固相萃取柱中，静置约10min，用10mL5%乙酸乙酯-乙醚溶液（4.9）洗脱收集于具塞刻度试管中（需要抽真空），洗脱液经过无水硫酸钠脱水，在30℃下用氮气缓缓吹至近干，用甲醇定容至1.0mL制成测定液供气相色谱质谱仪分析。7.4测定7.4.1色谱参考条件色谱柱：DB-INNOWAX毛细管色谱柱:30m×0.25mm（内径）×0.25μm（膜厚）或相当色谱柱；柱温：初温50℃,保持1min,以8℃／min升至180℃。程序运行完成后240℃postrun5min；载气：氦气，纯度≥99.999％，流速1mL/min；进样口温度：200℃；进样量：1μL。7.4.2质谱参考条件电离方式：EI源,70eV；离子源温度：230℃；进样方式：无分流进样。氨基甲酸乙酯选择监测离子（m/z）：44、62、89；定量离子62；D5-氨基甲酸乙酯选择监测离子（m/z）44、64、76；定量离子64。7.5标准曲线的制备分别取不同氨基甲酸乙酯标准使用液，进样1μL，进行仪器分析，绘制标准曲线。7.6气相色谱-质谱检测及确证在上述仪器条件下测定标准溶液及样品溶液。根据氨基甲酸乙酯保留时间及碎片离子进行定性、定量分析。根据标准曲线计算测定液中氨基甲酸乙酯的含量。各检测目标化合物以保留时间和特征离子与定量离子所对应的GC/MS色谱峰面积相对丰度进行定性。要求被测试样中目标化合物的保留时间与标准溶液中目标化合物保留时间的相对偏差小于20%；样品特征离子的相对丰度与浓度相当混合标准溶液的相对丰度一致，相对丰度偏差不超过表3的规定，则可判断样品中存在相应的被测物。表3定性测定时相对离子丰度的最大允许偏差相对离子丰度＞50%20%—50%10%—20%＜10%允许的相对偏差±10%±15%±20%±50%7.7空白试验除不加试样外，采用...