一株产黑色素链霉菌的分类鉴定摘要：菌株S3是从厦门石胄头近海海水中分离到的，不产生抗菌活性物质，而产黑色素的一株放线菌。在其形态、培养及生理生化特征、细胞壁组分测定等传统的分类学方法的基础上测定和分析了菌株的16SrDNA序列。结果表明，菌株S3在多种培养基上产黑色素，砲子椭圆或圆柱状，在ISP培养基上培养特征与StreptomycesPuniciscabiei基本一致，菌株S3的16SrDNA序列与S.Puniciscabiei的同源性为99.595%,鉴定其为S.Puniciscabieio关键词：链霉菌，黑色素，分类中图分类号：Q93文献标识码：A文章编号：0439-8114(2014)21-5145-03D0I：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2014.21.023TaxonomyoftheStreptomycesProducingMelaninZHAOChang-huil,YEDe-zan2,3(1.HunanUniversityofScienceandEngineering,Yongzhou425100,Hunan,China；TheThirdInstituteofOceanography,StateOceanicAdministration,Xiamen361005,Fuzhou,China；TheKeyLaboratoryofMarineBiogeneticResourcesofStateOceanicAdministration,Xiamen361005,Fuzhou,China)Abstract：TheactinomycetestrainS3producingmelaninwithnoantibacteriaactivitywasisolatedfromwatersamplescollectedfromShizhoutouofXiameninChina.StrainS3wasidentifiedbymethodsoftraditionalandmolecularbiologicaltaxonomyincludingdeterminationofmorphologicalandculturalcharacteristics,physiologicalandbiochemicalproperties,cellwallcomponentsand16SrDNAsequencesanalysis・ResultsshowedthatstrainS3producedmelaninonmanymedium.Sporeswereovalorcolumnedinship.CulturalcharacteristicsofstrainS3onISPmediumwereincloseagreementwithS.Puniciscabiei・The16SrDNAsequenceofstrainS3had99.595%similaritywiththatofS.Puniciscabiei.ThestrainS3wasidentifiedasS.Puniciscabiei.Keywords：Streptomyces,melanin,taxonmy黑色素(Melanin)广泛存在于自然界生物体内，是一类由L-多巴、酪氨酸和半胱氨酸氧化或聚合而成的天然或合成色素［1］。它是医药、农业及化妆品行业的一种重要的生产原料。由于从动植物体内提取黑色素的生产过程繁琐、成本高，合成色素一般对人体有害，而产黑色素的微生物资源丰富，且生产工艺简单易行，产品无毒害，稳定性好。因此，研究微生物发酵产生黑色素具有很大的优势［2-4］。产黑色素的微生物有细菌、真菌及放线菌等。目前对陆境产黑色素的微生物研究较多，而对海洋中的微生物的报道较少。本研究从厦门石胄头海水中分离到一株放线菌，该菌具有产黑色素的能力，以期为开发产黑色素的海洋微生物打下基础。1材料与方法1.1材料1.1.1菌种来源菌株S3,大肠杆菌(Escherichiacoli),枯草芽胞杆菌(Bac订lussubt订is),金黄色葡萄球菌(Staphyloccocusaureus),宛氏拟青霉(Paecilomycesvariotii),荧光假单胞菌(Pseudomonasfluorescens）,白假丝酵母（Candidaalbicans）,以上菌株均由国家海洋局第三海洋研究所生物重点实验室保存。1.1.2主要试剂及仪器质粒提取试剂盒购自上海生T；DNAmarker>dNTPs、Taq酶等购自Takara公司；Biometre公司PCR扩增仪（T3）；Eppendorf公司微型台式离心机；日本JEOL公司JEM-1230透射式电镜；德国Bruker公司TENSOR27型红外光谱仪。1.1.3培养基2216E细菌培养基;Tyr■发酵培养基［5］；酪素培养基［6］及国际链霉菌计划（ISP）推荐的7种培养基：7］；LB培养基;黄豆粉煮汁培养基：黄豆粉40g,冷水调糊后加至1L煮20min,经纱布过滤，加入葡萄糖20g,定容至1L；胞子形成培养基［8］；以上培养基均以人工海水与蒸馆水各半配置，1X105Pa灭菌30mino1.2方法1.2.1样品采集及菌种分离从厦门石冑头（退潮后的上浮水）、湖、白城、芙蓉湖、船坞（退潮后的沉积物）采集到5个样品，分别取未稀释的水样及10倍稀释的水样和泥样，涂布于2216E、Tyr及酪素平板上，于28€培养5d,挑取呈黑色的菌落，进行分离纯化。从石胄头海水中分离到菌株S3o发酵培养及抑菌试验将菌株S3在Tyr发酵培养基活化3d,分别接种于LB培养基和黄豆粉煮汁培养基，28°C,180r/min摇床培养10do取发酵液分别接种涂布有待试菌平板的滤纸片上，28°...