自组装Trolox-壳聚糖纳米颗粒对神经细胞损伤的保护作用(承德医学院河北承德067000)【摘要】目的：探讨自组装方法制备Trolox-壳聚糖纳米颗粒对H2O2诱导的氧化应激损伤中SH-SY5Y细胞的保护效果。方法：SH-SY5Y细胞分为实验组和对照组，实验组细胞加入不同浓度的Trolox和Trolox-壳聚糖。MTT法检测细胞增殖情况，倒置显微镜观察SH-SY5Y细胞形态变化。结果：药物浓度为400和600&mu;M时，Trolox单体和Trolox•壳聚糖都具有保护作用。但与Trolox单体相比，纳米抗氧化剂能更好的保护细胞形态、显著提高细胞活力(P<0.05)。结论：该纳米抗氧化剂可有效得保护SH-SY5Y应激引发的氧化损伤，这为纳米技术更进一步应用于祌经系统相关疾病的抗氧化应激治疗提供了新的实验依据。【关键词】壳聚糖；SH-SY5Y细胞；抗氧化剂；氧化应激【中图分类号】R741【文献标识码】A【文章编号】1007-8231(2016)13-0085-02TheProtectiveEffectofSelf-assembledTrolox-chitosanNanoparticlesOnNerveCellDamageLIYanchao,XinZhen,XinSiyuan,ChengYu.ChengdeMedicalUniversity,HebeiChengde067000,China,China【Abstract】ObjectiveToinvestigatetheprotectiveeffectoftrolox-chitosannamoparticlesmanufacturedbyself-assembledmethodonH202-inducedoxidativestressinSH-SY5Ynervecells.Mtthod：SH-SY5Ycellswereincubatedwithdifferentconcentrationoftroloxandtrolox-chitosannanoparticles.MTTwasusedtodetecttheproliferationofSH-SY5Ycells,andinvertedmicroscopetoobservethemorphologyofSH-SY5Ycells.ResultsWhentheconcentrationofdrugswere400and600&mu;M,bothtroloxandtrolox-chitosannanoparticlesshowedfunctionsofinhibitingtheoxidantdamage.Inaddition,trolox-chitosannanoparticlesexhibitedhigherantioxidantactivitythantrolox(P<0.05).ConclusionsHavinganexcellentantioxidantactivity,trolox-chitosannanoparticlescanefficientlyprotecttheSH-SY5Ycellsfromtheoxidantstress.ltprovidesanewexperimentalbasisforthefurtherapplicationofnanotechnologyinthenervoussystemrelateddiseasesofoxidationstresstreatment.【Keywords】Chitosan;SH-SY5Ycells;Antioxidant;Oxidantstress阿尔茨海默症、帕金森病、肌萎缩侧索硬化症等是严重危害人类健康的一类神经退行性疾病，是由脑中特定区域神经元发生退变而引起的慢性进行性神经系统疾病。氧化应激在脑缺血-再灌注损伤和多种神经退行性病变的病理过程中起着主要作用，保护神经元免受氧化应激的损伤，可能是防治神经退行性疾病的奋效手段之一0抗氧化剂对这些疾病的抵御作用引起了人们的广泛关注［1】。但水溶性差［2】和生物利用率低［3】却成为制约抗氧化剂砬用的两大因素。纳米生物技术的出现为解决上述问题带来了可能［4】。我们前期研究中发现，我们以生物相容性好且生物可降解的壳聚糖为原料，通过表面修饰自组装制备的Trolox-壳聚糖纳米颗粒，可以有效地改善抗氧化剂的水溶性，使苏能更好的保护小鼠巨噬细胞对抗氧化应激的损伤［5］。本文采用培养基中加入外源性活性氧过氧化氢(H2O2)诱导细胞凋亡氧化应激的模型，探讨了Trolox-壳聚糖纳米颗粒对H2O2诱导SH-SY5Y祌经细胞氧化应激损伤的保护作用。期望所得结果可为新型纳米抗氧化剂用于预防神经系统相关疾病提供理论依据。i.材料与方法1.1试剂与仪器人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)购自中国科学院上海细胞生物学研究所；DMEM高糖培养基：美国Gibco公司；胎牛血清：南美血源；30%过氧化氢：国药集团化学试剂有限公司;Trolox:美国AcrosOrganics公司；96孔板:美国Corning公司；lnfinite200型酶联免疫检测仪：瑞士Tecan公司。1.2实验方法1.2.1MTT法测细胞活力待细胞融合度达到80%〜90%吋，消化细胞并计数，按每孔l&times;104cell,100ul接种，24h后换作基础培养基并加药物至目的浓度，进行药物处理，一定时间后，换作含MTT终浓度为0.5mg/ml的基础培养基继续孵育4h,最后弃去各孔培养基，每孔加150UIDMSO溶解紫色结晶，酶联免疫检测仪测定490和570nm吸收值。1.2.2Trolox-壳聚糖纳米颗粒的制备准确称取10mgT...