多发性骨髓瘤患者血清自身抗体的跟踪测定李红梅仲人前范列英孔宪涛屠小卿许玲玲朱晔施笑梅摘要：应用间接荧光免疫试验和免疫印迹两种方法，对经多项试验确证的59例多发性骨髓瘤患者分别检测血清抗核抗体(ANA)和抗可提取核抗原(ENA)抗体。结果表明，ANA阳性率为39/59(66.1%)，其中ANA出现动态变化者占27/39(69.2%)，ANA阳性者中抗ENA阳性率为12/39(30.8%)，提示自身免疫在MM的发病机制中有一定的作用。关键词：多发性骨髓瘤；自身抗体中图分类号：R739.42文献标识码：B文章编号：10012087(2000)04019902多发性骨髓瘤患者血清中存在各种自身抗体，该类抗体随MM病情的发展而变化，但其变化程度尚不清楚。为进一步探讨MM与自身免疫性疾病的关系，我们对经血清醋纤膜电泳、血清和尿免疫电泳和尿ELISA等确诊的59例MM患者，用荧光免疫技术和免疫印迹试验分别检测ANA和抗ENA的结果。材料和方法一、研究对象在1994～1998年间曾进行过2次以上检测确诊为骨髓瘤患者59例，实验室重复检测骨髓瘤免疫指标的年限跨度：3年以上者1例，2年者4例，1年者11例，其余均在1年以内。重复检测骨髓瘤免疫指标的次数：5次1例，4次3例，3次15例，其余均为2次。其中男性40例，女性19例(年龄不详11例)，男∶女=2∶1，年龄36～82岁，平均59.2岁。免疫分型：IgG型33例，IgA型10例，IgD型7例，IgM型4例，游离Λ型2例，游离Κ型3例。二、[KG2方法用间接荧光免疫法测定血清中的抗核抗体(ANA)，从ANA阳性的10例MM患者中选取12份强阳性血清，运用免疫印迹技术将具有多种抗原性的细胞核盐水可提取性抗原，经凝胶电泳分离后，转印于硝酸纤维素膜上检测抗可提取性核抗原(ENA)抗体。试剂盒均由德国Euroimmun中心Stocker博士提供)。结果一、抗HEP-2细胞核抗体测定不同型别多发性骨髓瘤患者该抗体的检测结果，见表1。表1不同MM患者抗HEP-2细胞核抗体阳性情况M蛋白型n均质型颗粒型其他型总阳性(%)IgA102417(70)IgD70505(71.4)IgG33015621(63.6)7sIgM［2］40112(50)游离Λ20101(50)游离Κ31113(100)合计59327939(66.1)二、ANA与多发性骨髓瘤患者病程长短的关系随患病时间的延长ANA呈现阳性者14例，出现ANA自身抗体后又自行消失者13例，有变化者占69.2%，MM持续伴有ANA阳性者12例，其余为MM不伴有自身抗体阳性的患者。不同型别MM患者ANA阳性结果随检测时间变化情况见表2。表2MM患者不同检测时间ANA阳性结果情况自身抗体动态变化nIgAIgDIgG7sIgM游离Λ游离Κ有变化者275513211无变化者11106202合计386519413三、抗ENA检测结果抗ENA强阳性有12例，依据试剂盒标准可明确判定的抗ENA种类有：抗SSA，抗rRNA，抗U1RNP和抗Liu，但在试剂盒标准条带外的52kD、47kD、32kD、15kD和11.5kD处各有1例伴有明显条带出现，无法判读。不同时间ANA均质型强阳性血清，抗ENA均为阴性而不同时间颗粒型强阳性血清，抗ENA阴、阳性结果均有。有1例颗粒型转变为PCNA型的ANA阳性血清，抗ENA为阴性。讨论多发性骨髓瘤的发病率为2～4个/10万，自然病程在不同患者有很大差异，短者1～2个月，生存期长者可达数年［3］，因而对患者血清中自身抗体的研究受到较大限制。我中心以Hep-2细胞作为细胞核基质，通过间接荧光试验跟踪检测，结果证明MM患者血清中也存在着多种自身抗体。59例MM患者追踪检测血清中ANA，总阳性率值高达66.1%，约为国外报道从MM患者中随机检测自身抗体阳性率31%［4］的2倍。MM患者的绝大多数骨髓瘤细胞的免疫表现型都具有成熟B细胞的特点，有一些亚群细胞可以具有其他细胞的抗原，如前B细胞急淋白血病的CALLA抗原、T细胞的免疫标记、甚至粒单核细胞的抗原。这些分化过程中的表现，甚至细胞系别转变可反映在造血过程的干细胞阶段已发生异常，只是在瘤细胞的分化过程中，某些有次序的分化终止。这种经异常分化过程而形成的M蛋白有其独特的性质，能够连接多种自身抗原，或者具有自身反应性而成为内源性的活化剂。另据报道［5］，慢性胆道病、类风湿性关节炎等对某些人可促使浆细胞克隆性扩增，发生浆细胞骨髓瘤。这些均表明自身免疫性疾病与多发性骨髓瘤在发病机理上有某种内在的联系。统计结果还显示，伴随MM病程自身抗体出现不同的动态变化者...