食品安全地方标准茶叶中多种农药残留测定液相色谱法1范围本标准规定了茶叶中吡虫啉、啶虫脒、多菌灵、除虫脲、氟虫腈、灭幼脲、辛硫磷和阿维菌素多种农药残留的检测方法。本标准适用于茶叶中农药残留的测定。本标准的检出限为：0.062-0.156mg/kg(参见附录A)2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T6379.1测量方法与结果的准确度（正确度与精密度）第1部分：总则与定GB/T6682分析实验室用水规则和试验方法GB/T8302茶取样3原理茶叶样品经水浸泡后乙腈高速匀浆提取，盐析离心，氨基固相萃取小柱净化，用乙腈+甲苯（3：1）洗脱农药，用液相色谱测定，以保留时间定性，外标法定量。4试剂和材料4.1乙腈：色谱纯。4.2甲苯：色谱纯。4.3氯化钠：分析纯。4.4无水硫酸钠：分析纯。4.5提取液：乙腈。4.6淋洗液：乙腈+甲苯=3:1（V:V）。4.7氨基复合柱：6mL/500mg或相当于。4.8滤膜，0.20μm，有机相相滤膜。4.9农药标准品:纯度>99%，名称见附录A4.10标准溶液配置4.10.1单一组分标准溶液：准确称取各标准品约0.01g（精确到0.0001g），用甲醇定容至10ml，配制成90μg/m标准储备液，4℃保存，可使用一年。4.10.2混合标准储备液：根据各种农药在仪器上的响应值，逐一吸取一定体积的单一组分一定单一组分标准溶液（4.9.1）用甲醇作为溶剂配置成混合标准溶储备液，避光4℃保存，可使用6个月。4.10.3混合标准使用液用甲醇作为溶剂将混合标准储备液稀释成不同质量浓度的混合标准溶液，用于定量。临用现配。5仪器与设备5.1液相色谱仪：配有紫外检测器（WAD）。5.2分析天平：精度0.01mg,0.01g。5.3旋转蒸发仪。5.4氮气吹干仪。5.5匀浆机：转速不低于20000r/min。5.6离心机：转速不低于4000r/min。5.7移液器：250μL。5.8梨形瓶：200mL。6分析步骤6.1试样的制备同第一部分方法6.2提取同第一部分方法6.3净化氨基固相萃取柱上用5mL淋洗液（4.6）预淋洗氨基固相萃取柱，弃去流出液。下接梨形瓶，将6.1中待净化的浓缩液转移至氨基固相萃取柱中，用2mL淋洗液溶液洗涤梨形瓶，重复三次，并将洗涤液移入柱中，在柱上加装50mL液器，再用25mL淋洗液淋洗小柱，收集上述所有流出液于离形瓶中，40℃水浴旋转蒸发至近干，用甲醇水溶液（1：1）定容至1mL，用液相色谱仪测定。6.4测定6.4.1仪器条件a)色谱柱：C18柱，3mm5µm25cm；b)流动相、梯度洗脱及波长条件见表1，表2：表1溶剂梯度时间min水%甲醇/乙腈（7+3）%0.0065356.30653516.00653517.70653520.00010021.50010023.00010023.01010028.006535表2波长变化表时间，min06.316.0017.721.5波长/nm275245225280245c)柱温：35℃；d)进样量：5μL；6.4.2液相色谱检测及确证同第一部分方法，色谱图参见附录B7平行试验及空白试验7.1平行试验同第一部分方法7.2空白试验同第一部分方法8结果计算试样中被测农药残留量以质量分数Xt计，单位以毫克每千克（mg/kg）表示，按公式（1）计算。Xt=V1×A×V3×CS/m×V2×AS（1）式中：Xt—试样中被测物残留量，单位为毫克每千克（mg/Kg）；Cs—基质标准工作溶液中农药的浓度，单位为微克每毫升（μg/mL）；A—试样溶液中被测物的色谱峰面积；As—基质标准工作溶液中被测物的色谱峰面积；V1—提取溶剂总体积，单位为毫升（ml）；V2—吸取出用于检测的提取液的体积，单位为毫升（mL）；V3—试样最终定溶体积，单位为毫升（mL）；m—试样溶液所代表试样的质量，单位为克（g）。计算结果应扣除空白值。计算结果保留两位有效数字。9精密度本标准精密度数据是按照GB/T6379.1和GB/T6379.2的规定确定的，获得重复性和再现性的值是以95%的置信度来计算。附录A（规范性附录）农药检测检出限参考数据吡虫啉、啶虫脒、多菌灵、除虫脲、氟虫腈、灭幼脲、辛硫磷和阿维菌素检出限参考数据序号中文名英文名保留时间min检出限mg/kg1吡虫啉Imidacloprid5.9210.0532啶虫脒Acetamiprud6.7390.0623多菌灵...