_聚赖氨酸生产菌株的筛选和鉴定技术与方法ε2聚赖氨酸生产菌株的筛选和鉴定3朱宏阳徐虹33吴群陈玮玮(南京工业大学制药与生命科学学院南京210109)摘要:建立了一种灵敏的ε2PL产生菌高通量的筛选方法。在分离培养基中加入150mg/LK2Cr2O7,以有利于放线菌的富集分离;并添加美蓝染料,利用产碱菌株碱性分泌物和美蓝之间的静电作用而形成独特的透明圈,从而灵敏地筛选得到产碱菌株;利用Dragendorff试剂与生物碱特有的颜色反应从产碱菌株中检出得到46株生物碱产生株;最后对产生物碱的菌株的发酵液进行ε2PL含量分析,确定4株ε2PL产生菌株。对其中一株ε2PL高产菌PL623菌株进行形态、生理生化和16SrDNA分析,结果表明PL623为北里孢菌属(Kita2satospora)。关键词:菌株筛选,鉴定,ε2聚赖氨酸,北里孢菌,16SrDNA:Q93文献标识码:A:025322654(2005)0520227304ScreeningandIdentificationofε2PLProducingStrain3ZHUHong2YangXUHong33WUQunCHENWei2Wei(CollegeofLifeScienceandPharmaceuticalEngineering,Nan激ngUniversityofTechnology,Nan激ng210109)Abstract:Asimpleandsensitivemethodwasdevelopedtoscreen---本文来源于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除---ε2PLproducedstrainsfromsoils1150mg/LK2Cr2O7wasaddedtothesolidmediumforactinomycetesenriching1Abasicdye,methyleneblue,incorporatedintheagarplatetodetectalkaliproducers,becausedyereactedwiththesecretedbasicpolymersbyelectrostaticinteractionwiththesecretedbasicpdymersandformedspecialzoon1Andthendragendorffregentwasusedtode2tectalkaloidproducers1Fourε2PLproducerswereobtainedbyTLCanalysis1Meanwhile,phylogeneticanalysisofPL623strain,includingmorphology,physiologicalandbiochemicalcharactersandchemotaxomywereperformedandphylogenetictreewasconstructedbasedonthe16SrDNAsequences1AndtheresultsindicatedthatPL623strainisamemberofKitasatospora1Keywords:Screening,Identification,ε2polylysine,Kitasatospora,16SrDNAε2聚赖氨酸(ε2poly2L2lysine,ε2PL)是由微生物合成的L2赖氨酸同聚物,由ε2氨基与α2羧基通过肽键连接而成,其聚合度一般为25～35[1,2]。ε2聚赖氨酸具有抗革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌、真菌和病毒的活性,是一种性能优良的生物防腐剂。除外,还用作化妆品、基因载体、药物包被物、电子材料和环保材料。在日本,ε2PL已作为食品防腐剂进入商品市场,国内对ε2PL研究刚刚起步。目前生产及研究的可发酵产ε2聚赖氨酸的菌主要是白色链霉菌(Streptomycesalbu23国家“十五”攻关项目资助(No12004BA713B0622)江苏省高技术项目资助(No1BG2005042)33通讯---本文来源于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除---作者Tel:025*********,E2mail:xuh@njut1edu1cn收稿日期:2004212231,修回日期:2005203209技术与方法ε2聚赖氨酸生产菌株的筛选和鉴定3朱宏阳徐虹33吴群陈玮玮(南京工业大学制药与生命科学学院南京210109)摘要:建立了一种灵敏的ε2PL产生菌高通量的筛选方法。在分离培养基中加入150mg/LK2Cr2O7,以有利于放线菌的富集分离;并添加美蓝染料,利用产碱菌株碱性分泌物和美蓝之间的静电作用而形成独特的透明圈,从而灵敏地筛选得到产碱菌株;利用Dragendorff试剂与生物碱特有的颜色反应从产碱菌株中检出得到46株生物碱产生株;最后对产生物碱的菌株的发酵液进行ε2PL含量分析,确定4株ε2PL产生菌株。对其中一株ε2PL高产菌PL623菌株进行形态、生理生化和16SrDNA分析,结果表明PL623为北里孢菌属(Kita2satospora)。关键词:菌株筛选,鉴定,ε2聚赖氨酸,北里孢菌,16SrDNA:Q93文献标识码:A:025322654(2005)0520227304ScreeningandIdentificationofε2PLProducingStrain3ZHUHong2YangXUHong33WUQunCHENWei2Wei(CollegeofLifeScienceandPharmaceuticalEngineering,Nan激ngUniversityofTechnology,Nan激ng210109)Abstract:Asimpleandsensitivemethodwasdevelopedtoscreenε2PLproducedstrainsfromsoils1150mg/LK2Cr2O7wasaddedtothesolidmediumforac...