［基金项目］国家自然科学基金资助项目（项目编号：30970419；项目名称：结核菌药物依赖株动物模型形成机理研究）［作者简介］孟祥红，女，博士，主任医师，研究方向：分支杆菌耐药和免疫。Email：xh5562@sina.com丙戊酸钠对依赖利福平结核分支杆菌生长影响的体外实验观察孟祥红，杨彩娥，王迪，董梅（解放军第309医院,北京100091）［摘要］目的：在体外培养条件下，研究表观遗传相关的组蛋白去乙酰化酶抑制剂-丙戊酸钠（VPA）对依赖利福平（R）结核分支杆菌菌株生长的影响。方法：采用匡氏琼脂培养基及技术，分别观察临床分离R依赖株和R耐药株在含R和V"的培养基中生长情况，探究VPA对结核菌利福平依赖性的影响。结果：利福平依赖株在含R+VPA的培养基上生长较在仅含R培养基上生长落数和旺盛程度均下降;而利福平耐药株在含R+VPA的培养基上生长与在仅含R培养基上生长落数和旺盛程度比较，未见明显差别。结论：丙戊酸钠在体外可显著抑制结核分支杆菌对利福平的依赖性。［关键词］结核分支杆菌；利福平依赖；表观遗传；组蛋白乙酰化［中图分类号］R97［文献标识码］A［文章编号］EffectofValproicAcidontheGrowthofRifampin-dependingMycobacteriumTuberculosisStrainsonCulturalMediumMENGXianghong,YANGCaie,WANGDi,DONGMei,（The309thHospitalofPLA,Beijing100091,China）［Abstract］Objective:Toinvestigatetheeffectofepigenetic-relatedhistonedeacetylaseinhibitors（HDACIs）VPAonthegrowthofrifampin-dependingmycobacteriumtuberculosisstrainsonculturalmedium.Methods:TheisolationandthecultureofthecoloniesweredonebyKuang5sagarmediumandtechniquetoinvestigatetheeffectofvalproicacidonthecharacteristicsofrifampindependenceofmycobacteriumtuberculosis.Thegrowthcharacteristicsofclinicalisolatedstrainsofrifampindependenttuberculosisandstrainsofrifampinresistanttuberculosisonculturalmediumcontainingrifampinandonculturalmediumcontainingvalproicacidwereobservedandcomparedrespectively.Results:Coloniesofclinicalisolatedrifampindependenttuberculosisgrewfasterandmorevigorousonculturalmediumcontainingrifampinthanthatonculturalmediumcontainingvalproicacidandrifampin,andnosignificantdifferencewerefoundbetweenthegrowthofclinicalisolatedstrainsofrifampinresistanttuberculosisonculturalmediumcontainingvalproicacidandrifampinandonculturalmediumcontainingrifampin.Conclusion:Valproicacidcansignificantlyinhibittherifampindependencefeatureofmycobacteriumtuberculosis［KeyWords］Mycobacteriumtuberculosis;Rifampindependence;Epigenetics;Histoneacetylation依赖现象的发现"当前结核病的防治提出新的课题。依赖现象的主要特点是：在一定药物浓度范围内，结核杆菌在含药环境中生长得更快、更旺或更多。鉴于药物依赖性肺结核病情重，耐多药，化疗效果差和预后不良的临床特征，药物依赖结核病远比一般耐药病例危害更大。近年国内学者相继报道临床结核杆菌抗廃药物依赖性以对一线抗撈药物-利福平（R）依赖率为最高（6%、1瑰）心发现：依赖利福平结核菌在含利福平的培养基上传代后，其依赖性逐渐减弱，按照经典的基因遗传学理论，上述现象得不到合理解释，而表观遗传机制有可能在结核菌药物依赖中起着重要的作用。本文采用表观遗传抑制剂丙戊酸钠（VPA）作为实验工具，在体外培养基水平观察VPA对于结核杆菌利福平依赖性的影响，以初步探讨结核分枝杆菌依赖利福平的机制。1材料1.1实验菌株和质控菌株17株临床结核分支杆菌利福平依赖株及10株耐药株均分离自解放军第309医院结核病研究所肺结核患者痰液标本，并经多重PCR方法鉴泄为人型结核分枝杆菌老核分枝杆菌标准菌株H37Rv来自于北京结核病防治所。1・2药粉和试剂利福平药粉购自成都锦华药业有限公司：丙戊酸钠购自湖南省湘中制药有限公司；小牛血清购自浙江金华清湖研究所。1.3实验分组按照含药与不含药、药物种类和浓度不同分为6个培养基组，分别为：DTI,V,R1,R2,R1V...