辛伐他汀对缺血再灌注损伤大鼠肾脏的保护作用[摘要]目的探讨辛伐他汀（Simvastatin）对肾缺血再灌注损伤（IRI）的保护作用。方法建立大鼠肾缺血再灌注损伤模型，随机将动物分为Simvastatin组，缺血再灌注（IR）组，锌原卟啉（ZnPP）组，假手术（sham）组。测定各组大鼠血清尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）的含量，并进行肾组织光镜形态学观察和免疫组化分析血红素加氧酶-1（HO-1）的表达情况。结果IR组和ZnPP组BUN、Cr值升高，HO-1的表达少或几乎不表达，肾组织结构紊乱；Simvastatin组除HO-1表达明显增多外，还显著逆转上述改变，组间差异有统计学意义（P<0.05）。结论Simvastatin可上调HO-1的表达，减轻大鼠肾脏的IRI。[关键词]辛伐他汀；缺血再灌注损伤；血红素加氧酶-1[中图分类号]R692[文献标识码]A[文章编号]1673-7210（2012）10（a）-0012-03肾脏在缺血再灌注（IR）过程中会严重影响其生理功能，如何减轻肾缺血再灌注损伤（IRI），成为目前研究的热点。细胞在受到应激刺激时，会启动内源性保护机制[1]，HO-1就是其中的一种方式[2]，它可被许多因素诱导而表达[3]。HO-1与IRI密切相关[4]，其分解血红素得到的产物中有重要的自由基清除剂及抗IRI因子[5]。关于他汀类药物的体外实验已经证实该药物能诱导平滑肌细胞中HO-1的表达[6]而发挥血管保护功能。在心、脑等器官的IR过程中，辛伐他汀（Simvastatin）能诱导HO-1高表达减轻其损伤[7-8]。本实验采用肾脏IRI大鼠模型，应用Simvastatin干预，观察其对肾脏IRI组织中HO-1表达以及肾脏组织炎症反应程度的影响，并探讨其可能的机制。1材料与方法1.1动论文代发中心提供优质论文发表服务物选择及分组健康雄性Wistar大鼠40只，体重（250±20）g。大鼠实验前适应饲养环境7d后随机分四组：Simvastatin组、IR组、锌原卟啉（ZnPP）组、假手术（sham）组，每组各10只。1.2IRI模型制备Simvastatin组术前给予Simvastatin10mg/（kg·d）灌胃7d；IR组术前给予等体积生理盐水灌胃7d；ZnPP组术前24h给予HO-1抑制剂ZnPP5mg/kg腹腔注射；sham组常规饲养。各组末次给药24h后，全部大鼠经腹腔注射2%戊巴比妥钠40mg/kg予以麻醉，从腹正中行4cm纵行切口打开腹腔，仔细分离右肾蒂及肾周筋膜，充分游离右侧肾脏后结扎右肾蒂并切除右肾；同法分离左侧肾脏肾蒂，充分显露左肾动脉及肾脏组织，除sham组外均用动脉夹夹闭左肾蒂45min，再灌注左肾，观察左肾色泽由暗红色变为鲜红色，表明灌注成功。还纳肠管于腹腔原位并缝合切口，放回原饲养场所待自然清醒并自由饮食。1.3标本制备及检测1.3.1尿素氮、肌酐水平测定再灌注24h后，抽取下腔静脉血样约3mL，10000r/min离心10min，上清置于-20℃冰箱保存。AU400生化分析仪测量血BUN、Cr水平。1.3.2肾脏组织学观察及HO-1免疫组化测定抽血后处死大鼠取左肾，用于组织学观察的肾组织按照切片制备要求处理并保存，然后按免疫组化三步法制备切片。结果判断：HO-1阳性反应为胞质呈棕黄色颗粒染色，采用病理图像分析软件半定量分析。1.4统计学方法采用SPSS13.0统计学软件进行数据分析，计量资料数据用均数±标准差（x±s）表示，三组间比较采用方差分析，组间两两比较采用q检验；以P<0.05为差异有统计学意义。2结果2.1各组大鼠血清尿素氮、肌酐水平比较与sham组比较，另三组大鼠都有不同程度的肾功能损害（P<0.01）；与IR及ZnPP组相比，Simvastatin组BUN、Cr值明显较低（P<0.01）；ZnPP组肾功能损伤重于IR组（P<0.01）。见表1。2.2各组大鼠肾脏病理变化的比较取平展、细胞形态和组织结构清晰的组织切片，依据Paller法[9]可见，ZnPP组肾脏损伤最重，以管型形成、肾间质出血并炎性细胞浸润为主；除sham组外，Simvastatin组肾脏损伤最轻，仅见部分轻度水肿样变性，偶见管型及炎性细胞浸润。与sham组比较，各组肾小管评分均较高（P<0.05）；与IR组相比，Simvastatin组肾小管评分明显降低（P<0.05），表明Simvastatin的应用可减轻大鼠肾组织损伤。见表2。2.3各组大鼠HO-1表达水平比较用半定量分析法，光镜下观察被染成棕褐色细胞的分布情况，无染色为0分，偶有染色为1分，局灶染色为2分，弥漫染色为3分。结果发现，ZnPP组HO-1几乎不表达...