药用植物夏枯草内生及根际芽胞杆菌分离与鉴定I郑榕，刘波，刘国红（1福建省农业科学院农业生物资源研究所福州350003；2福建师范人学福州350108）摘要：芽胞杆菌分布广泛，主要分布于土壤、动植物体表。【目的】为了了解采自武夷山的夏枯草标木及根际土壤芽胞杆菌的多样性，同时也为了了解药川植物内生芽胞杆菌的生物多样性。【方法】本文采用温度筛选法和稀释梯度涂布法从采口武夷山挂墩路口的夏枯草植株及其根际土壤样品中分离到了27株芽胞杆菌,通过16SrRNA作为鉴定手段对这27株芽胞杆菌进行鉴定。【结果】通过16SrRNA将27株芽胞杆菌鉴宦为15种芽胞杆菌，Bacillusaryabhattai5株、蜡状芽胞杆菌4株、炭疽芽胞杆菌4株、苏云金芽胞杆菌2株、甲基营养型芽他杆菌2株、Bacillusaerophilus1株、地衣芽胞杆菌1株、假蔡状芽他杆菌1株、简单纯芽他杆菌1株、短短芽胞杆菌1株、球形赖氮酸芽胞杆菌1^Lysinibacillusxylanilyticus1株、嗜几丁质类芽胞杆菌1株,另外2株为芽胞杆菌为疑似新种。【结论】木文研究结果表明夏枯草标木及其根际土壤中存在着丰富的芽胞杆菌种类，丰富了药用植物内生芽胞杆菌资源的研究。关键词：芽胞杆菌；鉴定；系统发育；夏枯草中图分类号：文献标识码：文章编号：TheIdentificationandPhylogeneticAnalysisoftheBac/7/usisolatedfromselfhealanditsrhizospheresoilRongZheng,BoLiu1,GuohongLiu1*21Agriculturalbio-resourceresearchinstituteFujianacademyofagriculturalsciences,Fuzhou350003,Fujiannormaluniverisy,Fuzhou350108Abtract:SpeciesofgenusBacillusarewidespreadaroundtheworld,mainlyfoundinthesoilandonthesurfaceofplantsandanimals.[Objective]InordertoknowaboutthediversityofBacillusintheselfhealanditsrhizospheresoil,andenrichBacillusdistributioninthespecialenvironmentatthesametime.[Methods]Weobtained27Bacillusstrainsfromselfhealanditsrhizospheresoilusingtemperaturescreeningmethodanddilutionplatingtechniqueandthenidentifiedthesestrainsby16SrRNA.[Results]27strainswereidentifiedas15differentspeciesandtwostrainsmaybenewBacillusspecies.[Conclusion]TheresultsshowedthatthereisadiversityofBacillusspeciesinselfhealanditsrhizospheresoil,anditenrichedthestudyoftheendogenousBacillusinthemedicinalplant.Keywords:Baciilus;identification;phylogeneticanalysis;selfheal药川植物在医药中占冇重要地位，中国是药用植物资源最丰富的国家z—,对约川植物的发现、使用和栽培，冇着悠久的历史。夏枯草为厉形科夏枯草属植物，是一味常用中药，由于其夏至后即枯，故有此名。夏枯草一般在夏季取其干燥果穗入药，含有丰富的三祜类、番体类、黄酮类、香豆素、多糖类及挥发油等化学成分一具冇清肝泻火、明冃、散结消肿等功效2。近年來的药理学研究表明夏枯草具冇抗肿瘤、抗感染、抗菌及抗病毒、抗氧化、降血脂、降血压、降血糖、调节免疫系统和调节呼吸系统等作用3。夏枯草由于其重要的临床应用价值和开发利用价值，成为一种具有潜力的药物资源。在植物植株内部及其根系土壤中存在着许多微生物。内生菌在植物体内广泛存在，在植物的根、资助项H：通讯作者：刘波，博士、研究员，从事微生物生物技术和农业生物药物演技，E-maikfzliubo@l63.com.第一作者：收稿日期：；修回日期：茎、叶、花、果实和种子等器官组织的细胞或细胞间隙均有发现。从经过严格表而消毒的植物组织或植物组织内部可分离出植物内生菌。药用植物内生菌具有合成与宿主植物相同或相似活性成分的功能，在生物防治、医药卫工等领域的应用潜力非常大4。芽胞杆菌属(Bacillus)是一类产生芽孑包的革兰氏阳性细菌，细胞呈杆状，营好氧或兼性厌氧生活，能产生具有强抗逆性的球形或椭球形芽他。芽胞杆菌在食品、农业、工业、医学、冶金、林业、环保乃至军事等诸多方血均有重要的应用价值,是一类重要的微生物类群，研究其分类学具有极其重要的意义。1材料与方法1.1材料1.1.1样品的采集、分离与纯化从武夷山挂墩路口采集的夏枯草根际土壤称取10g至90mL无菌水中混匀...